Jonson, Miranda Gilda;Choi, Hong-Soo;Kim, Jeong-Soo;Choi, Il-Ryong;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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v.25
no.2
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pp.142-150
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2009
The complete genome sequences of RNA3 and RNA4 of the 13 different Rice stripe virus (RSV) isolates were determined and characterized in this study to address the possible causes of the recent re-emergence of RSV that affected many rice fields in Korea. The genome size of each RNA segment varied among isolates and significant differences were observed in the intergenic region. There was up to 4% average divergence in the RNA4 nucleotide sequence among 13 Korean isolates and only 1.4% in the RNA3. Phylogenetic relationships among different Korean isolates revealed that there were at least 2 types of RNA3 and 4 distinct types of RNA4 genomes present in Korea. However, Korean isolates with one type of RNA3 predominate over the other while the occurrences of the RSV Korean isolates with the 4 types of RNA4 genome were not correlated to specific geographical areas. Results further indicate that RNA4 had diverged more than RNA3 and these differences in accumulation of mutations in the individual RNA segments indicate that genetic reassortment were likely to contribute to the genetic divergence in the 13 Korean isolates. All of the Korean-RNA3 sequences except for one isolate grouped with Chinese isolates (JY and Z). In contrast, the RNA 4 sequences segregated together with either Chinese (JY and Z) and Japanese (M and T) isolates but genetic relationships of Korean isolates- RNAs 3 and 4 segments to Chinese-Y isolate were low. Altogether, these results suggest that the occurrence of mixtures of RNAs 3 and 4 genotypes in the natural population of RSV may have contributed to the sudden outbreak in Korea.
Lian, Sen;Jonson, Miranda Gilda;Cho, Won-Kyong;Choi, Hong-Soo;Je, Yeon-Ho;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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v.27
no.1
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pp.37-43
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2011
Rice stripe virus (RSV) is one of serious epidemic pathogens for rice species grown in many Asian countries. Therefore, it is necessary to produce a diagnostic detection kit applicable in fields for RSV detection. In this study, RSV proteins that were derived from recombinant proteins and synthetic polypeptides as antigens were generated and were raised in rabbits for antiserum production. Among seven proteins in RSV, genes that code for NCP and NS3 proteins were cloned and subcloned into vector carrying His-tag protein and were expressed in E. coli. Of two recombinant proteins, only anti-NCP displayed stable hybridization signals in western blot analysis. Alternately, synthetic RSV polypeptides for CP, NCP, NS3 and NSvc4 we also generated and only antibodies against CP and NCP were very effective to detect RSV in both RSV infected rice and weed plants. However, antibodies against NS3 and NSvc4 showed weak specific bands as well as strong non-specific background due to the difference of viral proteins produced in the infected leaves. In summary, the antibodies generated against RSV proteins produced in this study will be useful for various assays such as for RSV diagnostic detection, immunoprecipitation, protein purification, and western blot analysis.
Virus diseases often cause serious damage to rice production in Asia. The lack of information on virus resistance genes has been a major obstacle for the breeding of resistant varieties. In order to identify DNA marker associated with resistance against rice stripe virus (RSV), the quantitative trait locus (QTL) was carried out using advanced backcross population developed from a cross between RSV-resistant tongil type cultivar Shinkwang and susceptible japonica cultivar Ilpum. A RSV resistance QTL $qSTV11^{SG}$ explaining 44.2% of the phenotypic variation was identified on chromosome 11 of Tongil type rice cultivar 'Shingwang'. $qSTV11^{SG}$ was tightly linked to DNA marker RM6897. The RM6897 divided as resistance type allele and susceptible type alleles. Twenty seven resistant varieties showed the resistant-type allele and 23 susceptible varieties were susceptible-type allele to the marker of RM6897. This results and the molecular markers presented here may be useful in rice breeding for improving RSV resistance in japonica rice.
This experiment was performed to clarify the concentration of rice stripe virus in the rice Plant leaves by serological test, and was attempted to inspect the virus carrier among small brown planthopper by antibody-sensitized hemagglutination test. The antiserum was prepared by injecting intervenously into the external marginal vein of the ear of a rabbit. The precipitin titer of it was 1 : 16. The rough virus fluid prepared from diseased leaves was centrifuged at 10.000 rpm, and then the supernatant solution was treated at $55^{\circ}C$ for 5 minutes and the solution clarified by removing the agglutinate was used as the antigen solution. Antibody-sensitized erythrocyte solution was prepared from sheep erythrocytes sensitized by rice stripe virus with tannic acid, and its agglutination titer was 1 : 512. The virus concentrations in flag leaves or first leaves just below them showing different symptoms was high with progressing the severity of symptoms. And the concentrations of the virus in leaves of varieties of the rice plant showing same degree symptom were lower in suscetible varieties, Sadominori, Palgoeng, Mangyong and Nihonbare, than in the resistant one, Tongil, but in Yooshin which was known as the resistant, lower rather than in Tongil. The reacton of antibody-sensitized hemagglutination test to inspect the virus carrier, was so highly sensitive that this reaction was recognized as a method which is able to Identify the carrier accurately in short time.
Fang, Ying;Choi, Jae Young;Park, Dong Hwan;Park, Min Gu;Kim, Jun Young;Wang, Minghui;Kim, Hyun Ji;Kim, Woo Jin;Je, Yeon Ho
The Plant Pathology Journal
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v.36
no.3
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pp.280-288
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2020
RNA interference (RNAi) has attracted attention as a promising approach to control plant viruses in their insect vectors. In the present study, to suppress replication of the rice stripe virus (RSV) in its vector, Laodelphax striatellus, using RNAi, dsRNAs against L. striatellus genes that are strongly upregulated upon RSV infection were delivered through a rice leaf-mediated method. RNAi-based silencing of peroxiredoxin, cathepsin B, and cytochrome P450 resulted in significant down regulation of the NS3 gene of RSV, achieving a transcriptional reduction greater than 73.6% at a concentration of 100 ng/μl and, possibly compromising viral replication. L. striatellus genes might play crucial roles in the transmission of RSV; transcriptional silencing of these genes could suppress viral replication in L. striatellus. These results suggest effective RNAi-based approaches for controlling RSV and provide insight into RSV-L. striatellus interactions.
In 2015, a nationwide survey was carried out to investigate about occurrence pattern of virus infecting foxtail millet. A total 100 foxtail millet leaf samples showing virus-like and abnormal symptoms were collected in the seven main cultivated regions of Korea. Four viruses were identified using reverse transcription polymerase chain reaction and RNA sequencing. Of the collected 100 foxtail millet samples, 10 were Barley virus G (BVG), 4 were Rice stripe virus (RSV), 1 was Northern cereal mosaic virus (NCMV), and 1 was Sugarcane yellow leaf virus (ScYLV) infection. To our best knowledge, this is the first report of BVG and NCMV infecting foxtail millet in Korea and ScYLV is expected as new Polerovirus species. This research will be useful in breeding for improved disease-resistant foxtail millet cultivars.
Jonson, Miranda Gilda;Lian, Sen;Choi, Hong-Soo;Lee, Gwan-Seok;Kim, Chang-Suk;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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v.27
no.2
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pp.148-155
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2011
Our previous sequence and phylogenetic analyses of the Korean Rice stripe virus (RSV) suggested possible genetic reassortment of RNA segments, but whether this RNA variation contributed to the recent RSV outbreaks in Korea is yet unclear. To further clarify these RSV-RNA segment variations, we developed a reverse transcription-polymerase reaction/restriction enzyme (RT-PCR/RE) analysis-based method. We identified five REs, including DraI, EcoR1, NdeI/AseI, and SpeI, that could differentiate RSV RNA 1-4 subtypes, respectively. Our RT-PCR/RE results provided a clear pattern of RNA reassortment, i.e., different groups of isolates having their RNA segments derived from two to three different RSV ancestors, such as from Eastern and Southwestern Chinese or Japanese M and T isolates. We also found that the migratory small brown planthopper from Eastern China caught by aerial net traps that possesses RSV-RNA3 genotypes corresponds mainly to Eastern China, with a few for Southwestern China based on RT-PCR/RE, sequence and phylogenetic analyses, indicating that RSV populations in Eastern China may also have strong RNA variation. The development of an RE analysisbased method proved a useful epidemiological tool for rapid genotyping and identification of mixed infections by RSV strain and by different subtype.
A rapid and simple RT-PCR diagnosis method for detection of Rice stripe virus (RSV), one of major virus infecting rice, was developed using porous ceramic cubes in this study. The porous ceramic cube can rapidly absorb biological molecules such as small-sized proteins and nucleic acid fragments into its pores. We examined whether this ability of porous ceramic cubes could be applied for isolating viral nucleic acids or particles from the RSV- infected plant tissues. In this study, we found that the porous ceramic cube was capable of absorbing a detection level of viruses from the rice tissues infected with RSV and established RT-PCR-based RNA diagnosis method using porous ceramic cubes.
Kim, Byung-Ryun;Jeong, Tae-Woo;Han, Kwang-Seop;Hahm, Soo-Sang;Kim, Young-Jin;Nam, Yun-Gyu;Choi, Hong-Soo;Kim, Jeong-Soo;Yu, Seung-Hun
Research in Plant Disease
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v.19
no.2
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pp.84-89
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2013
The incidence factors of Rice stripe virus (RSV) were analyzed by studying the population density and the viruliferous insect rate (VIR) of small brown planthopper (SBPH), the incidence of stripe disease, alternate host, and susceptible cultivar in Chungnam Province. The population of overwintering SBPH had been decreasing, but the VIR of overwintering SBPH had not been differing for three years, 2008 to 2010. No RSV was detected in the natural host plants, such as short awn, annual bluegrass, and barley. In 2009, relatively large population of SBPH with the VIR of 5.4% migrated from China. However, there was no evidence relating of migration large amount of SBPH from China in 2008 and 2010. Also the infection rate of RSV in rice was less than 1% in these periods. The cultivation area of the susceptible varieties had steadily decreased from 41% to 19% from 2007 to 2009. Therefore, the reduction factors of rice stripe disease in Chungnam Province with higher influx of inoculum could be with an appropriate forecasting and chemical control, cultivation of resistant varieties, changes in the cropping system, and the low winter-spring temperature.
The experiments were conducted to clarify the influence of transplanting date on the occurrence of rice virus in field condition of 1984. The rate of RBSDV (rice black-slreaked dwarf virus) viruliferous vector, smaller brown planthopper (Laodelphax striatellus Fallen), was shown to be $13.6\%$ at the 2nd adult and that of rice stripe virus (RSV) viruliferous was $6.7\%$ at the 2nd adult. The vector in the field was begun to come from May 29, the maximum densities were 19.6 insects per hill on June 13 in cultivar Chucheongbyeo, 19.3 in Nagdongbyeo, 7.4 in Cheongcheongbyeo and 4.9 in Samgangoyes. The number of vectors per hill was inclined to increase by early transplanting. Although the infection of rice virus in nursery bed was not recognized until May 30 transplanting, the nursery infection could be seen from June 10 transplanting. The highest rate of nursery infection with RSV was $4.1\%$ at June 10 transplanting plot, and that of RBSDV was $14.2\%$at June 20 trans planting plot. The infection of rice virus in paddy field was the highest at May 20 transplanting plot, the lowest at July 10 plot. The earlier transplanting, the more severe occurrence of rice viruses. Occurrence of infected plants with RBSDV was shown to increase more rapidly at May 20 and May 30 planting plot than May 10 plots. However, the occurrence of infected plant with RSV was more rapid at May 10 transplanting plot than May 20 and 30.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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