효모의 유용 기능을 탐색하기 위해서는 효모만을 스크리닝 하는 방법의 정립이 요구되는데 이를 위해서 알로에에 정착하는 효모 군집을 분석하였다. 본 연구에서는 알로에 베라(Aloe vera)와 알로에 사포나리아 (Aloe saponaria)의 잎을 파쇄하여 세균을 억제하기 위해서 항생제 chloramphenicol과 streptomycin과 곰팡이 생장을 억제하기 위해서 Triton X-100과 L-sorbose를 포함한 4가지 선택 배지(DOB with CS, GPY, YM, SCG)에 도말 하였고, A. vera에서 총 67균주, A. saponaria에서 총 42균주를 분리해 내었다. 분리된 균주를 ITS 1, 4 primer를 사용하여 sequence의 계통분석을 실시한 결과, A. vera에서는 Meyerozyma 가 56균주, Rhodotorula 가 1균주, Sporobolomyces 가 1균주, Cryptococcus 가 9균주, A. saponaria에서는 Rhodosporidium 가 41균주, Sporobolomyces가 1균주로 분포 되었다. 계통분석한 모든 분리 균주가 효모로 밝혀졌으며, 특히 대형 플레이트를 도입하여 신속하고 간편하게 대량의 효모를 발굴할 수 있음을 보였다.
The yeast population on 14 species of seaweeds and in water estimated by cultural mothods over a 5-month period in south-west in Korea, Nine species of yeasts, comprising unidentified one, and one of yeast-like fungi were identified. Fifty phycase were attributed to the difference of cultural method between the present work and earlier repoeters and, to some exent, the higher number of Rhodotorula glutinis which had a prior adaptation to the release of inhibitory polyphenolic materials. Although, to what extent, all division of algae showed a similar variation in yeast population, correlated with month, the rapid decrease of yeast population in August seems to be the cause of exposure of heat irradiation in this month. The cultural estimate of per se fltration without double filter and one of unidentified species are discussed.
This review summarizes the studies on a wide variety of yeast found in kimchi and the effects of yeast on kimchi fermentation, and discusses the direction for further research. Yeast belongs to the genera Trichosporon, Saccharomyces, Sporisorium, Pichia, Lodderomyces, Kluyveromyces, Candida, Debaryomyces, Geotrichum, Kazachstania, Brassica, Yarrowia, Hanseniaspora, Brettanomyces, Citeromyces, Rhodotorula, and Torulopsis have been identified using culture-dependent methods and metagenomics analysis. The application of yeast as a starter into kimchi has resulted in an extension of shelf life and improvement of sensory characteristics due to a decrease in the amount of lactic acid. On the other hand, some yeast cause kimchi spoilage, which typically appears as an off-odor, texture-softening, and white-colony or white-film formation on the surface of kimchi. In contrast to lactic acid bacteria, there are limited reports on yeast isolated from kimchi. In addition, it is unclear how yeast affects the fermentation of kimchi and the mechanism by which white colony forming yeast predominate in the later stage of kimchi fermentation. Therefore, more research will be needed to solve these issues.
방향족 에폭사이드 기질에 대한 입체선택적 가수분해능이 우수한 Rhodotorula glutinis의 epoxide hydrolase (EH)를 codon usage를 고려한 Escherichia coli 균주에서 고효율로 발현할 수 있었다. 효모인 R. glutinis와 박테리아인 E. coli에서의 codon usage 선호도를 분석하고 그 차이를 고려하여 E. coli 에서 잘 사용되지 않는 rare codon에 대한 tRNA유전자정보가 들어 있는 pRARE plasmid를 함유한 E. coli 균주인 Rosetta(DE3)pLysS를 숙주세포로 사용하였다. R. glutinis EH를 발현시킨 재조합 E. coli를 생촉매로 사용하여 라세믹 styrene oxide 혼합물과 반응시켰을 때, (R)-styrene oxide에 대한 입체선택적 가수분해활성이 wild type R. glutinis 대비 매우 향상됨을 관찰할 수 있었다. 또한 라세믹 기질로부터 입체적으로 고순도인 99% ee 값을 갖는 광학적으로 순수한 (S)-styrene oxide를 얻을 수 있었다.
A total of 133 isolates of yeast-like fungi was tested for sensitivity to seven different antifungal agents. The yeast-like fungi tested were isolated from the milk from normal or mastitic bovine quaters or from bovine feces. They were 5 Candida albicans (C. albicans) isolates, 63 C. krusei, 27 C. tropicalis, 5 C. parapsilosis, 10 Torulopsis glabrata, 6 Rhodotorula sp., 6 Hansenula sp. and 1 Pichia sp. isolate. The antifungal agents tested were nystatin, griseofulvin, cycloheximide, 5-fluorocytosine, miconazol, clotrimazole and tolnaftate. In general, clotrimazole, miconazol and 5-fluorocytosine were more effective in antifungal activity in vitro against the test organisms than the rest of the agents tested. However, some of the isolates showed higher resistance to certain antifungal agents compared to the other isolates of the some species. They were: 1 C. albicans isolate to 5-fluorocytosine; 1 C. albicans to 5-fluorocytosine, miconazol and clotrimazole; 1 C. krusei to 5-fluorocytosine and cycloheximide; and 11 C. tropicalis isolates to cycloheximide. The minimum inhibitory concentrations(MIC) of clotrimazole were $12.5{\mu}g/ml$ or lower for all isolates tested except one C. albicans isolate, for which MIC of the drug was $100{\mu}g/ml$. On the other hand, the MIC's of cycloheximide were $6.5{\mu}g/ml$ or lower for all isolates except the following; all isolates of C. albicans ($100{\mu}g/ml$), C. pseudotropicalis ($200{\mu}g/ml$) and Rhodotorula sp. ($25-50{\mu}g/ml$), 11 C. tropicalis isolates ($100{\mu}g/ml$) and 1 C. krusei isolate ($200{\mu}g/ml$).
효모의 유용 기능을 탐색하기 위해서 참나리에 정착하는 효모 군집을 분석하였다. 본 연구에서는 잎에서 총 82 균주, 줄기에서 총 94 균주, 꽃에서는 총 97 균주를 분리하였다. 분리된 균주를 ITS 1과 4 primer를 사용하여 ITS 영역 염기서열의 계통분석을 실시한 결과, 참나리 잎에서는 Pseudozyma가 31 균주, Aureobasidium pullulans가 28 균주, Cryptococcus가 11 균주, 줄기에서는 A. pullulans가 40 균주, Cryptococcus가 23균주, Candida 11 균주, 꽃에서는 A. pullulans가 95 균주, Rhodotorula 1 균주, Metschnikowia 1 균주가 분포하였다. 특히, 참나리 잎과 줄기, 꽃 모든 시료에서 A. pullulans가 우점하였으며, 꽃에서는 97 균주 중에서 95 균주의 A. pullulans가 검출되어 한 종이 절대적으로 우점함을 알 수가 있었다. 참나리 잎에서는 82 균주 중에서 Pseudozyma가 31 균주로 가장 우점함을 보였으며, 참나리 줄기에서는 94 분리 균주 중에서 Cryptococcus가 23 균주로 두번째로 우점함을 보였다. 참나리의 부위별로 분포양상이 다름을 확인하였다. 향후 이들 효모 균주들의 바이오테크놀로지 분야에 응용을 기대해본다.
Preparative isolation of lipid granules from Fhodotorula glutinis, which has been studied for long time to produce edible lipids, was carried out by flotation method in Ficoll-Linear density gradient. When the isolated lipid granules were suspended in a series of solutions containing varying concentration of osmotic stabilizer (sorbitoal and mannitol) ranging from 0.8M to 0M, the lipid granules appeared to be disrupted at a concentration between 0.8M and 0.7, and again at a concentration below 0.1M, suggesting that lipid granules have a membraneous structure and that at least two types of lipid granules are present. Compositional analysis of lipids from lipid granules revealed that lipids are composed mainly of neutral lipids (87.8% of total lipids), predominantly as triacylglycerols (71.89%). Marked differences were observed inphospholipids between lipids of lipid granules and those of whole cells . The major components of phospholipids in lipid granules and inwhole cells are phosphatidylcholine(38.6%) and phosphatidylserine(42.8%), respectively. In addition, significant differences were also observed in the fatty acid composition of phospholipids. As phospholipids are important structural components of membranes, these differences lead to the suggesting that the membrane of lipid granules may be distinct functionally and structurally from other membranes of yeast cells. The major fatty acid components of neutral lipidss of whole cells and lipid granules are palmitic , oleic and linoleic acid. However , degreeof fatty acid unsaturation of neutal lipids of lipid granules was much lower than that of neutral lipids of whole cells.
배양액 중에 탄소원과 질소원의 농도를 조절하여 C/N 비가 Rhodotorula sp.의 균체생육과 지질생성에 미치는 영향을 조사하고 생성된 지질의 지방산조성을 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 배양액의 질소농도가 높을수록 균체지방 함량은 감소하고 대신 단백질 함량이 증가하며 질소가 과소할 경우에는 지질 함량은 높으나 균체 생육이 부진하였다. 지질생산의 최적 C/N 비는 45∼50 (48) 이었으며 질소의 기준량은 질소동화율(Nitrogen digestion rate)과 밀접한 관계가 있었다. 생육 과정에서 체단백질의 합성과 지질의 집중적인 축적간에는 시간적인 구분 현상이 뚜렷하여 단백질은 배양초기에 주로 합성되고 지질은 중반 이후에 집중적으로 합성 축적되었다. 그리고 총지방산의 함량은 지질생성량이 가장 많은 조건, 즉 최적 C/N 비에서 가장 높았다. C/N 비가 증가할수록 포화지방산의 함량이 증가하고 불포화지방산의 함량은 감소하였으며 이것은 주로 palnitic acid와 oleic acid사이의 상호 증감에 기인되는 것이었다.
Psychrophilic yeast strains, HJ3011, HJ3023, and HJ3021, which were isolated from the Han River during winter season of December 1980 to February 1981 were identified as Candida sp., Candida nivalis, and Rhodotorula rubra respectively. The effect of temperature on growth was carried out in this study. Growth rate constants of strains HJ3011 and HJ3023 were the highest value at $15^{\circ}C\;and\;16{\sim}20^{\circ}C$ respectively, and both growth rates diminished gradually above $20^{\circ}C$ and were decreased to zero at $25^{\circ}C$. According to the results obtained in this experiment, above two strains of yeast were confirmed as psychrophile. On the other hand since the strain of HJ3021 exhibited the highest growth rate constant at $15^{\circ}C$ and could slightly grow above $25^{\circ}C$, this strain was defined as psychrotroph.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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