Kim, Sang-Hwan;Chung, Duck-Won;Lee, Ho-Jun;Hwang, Sue-Yun;Min, Kwan-Sik;Yoon, Jong-Taek
Reproductive and Developmental Biology
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v.33
no.1
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pp.19-24
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2009
This study was conducted to investigate the specific expression genes in the cloned bovine tissues. Donor cells, cloned tissues were analysed by RAPD-RFLP method. The results were detected three genes (CH-U7B, CH-U7M and CH-U7P) in the cloned fetus. It was found a single copy genes by southern hybridization. Sequence analysis of CH-U7M gene was shown 99% homology to a previously reported EST from a cloned bovine fetus. The putative ORF was encode a protein of hydrophobicity index 0.03. Semi-quantitative RT-PCR by using the CH-LS001 specific primer was remarkably detected in the lung tissue of cloned fetus. Further investigation of these genes may provide one of the key information to explain the early death, abnormal fetus, large off-spring and the low pregnancy rate in the production of cloned bovine.
Ki, Byeong Seong;Park, Miree;Woo, Yunmi;Lee, Woo Sik;Ko, Jung Jae;Choi, Youngsok
Reproductive and Developmental Biology
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v.39
no.2
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pp.43-47
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2015
Sirtuin proteins are evolutionary conserved Sir2-related $NAD^+$-dependent deacetylases and regulate many of cellular processes such as metabolism, inflammation, transcription, and aging. Sirtuin contains activity of either ADP-ribosyltransferase or deacetyltranfease and their activity is dependent on the localization in cells. However, the expression pattern of Sirtuins has not been well studied. To examine the expression levels of Sirtuins, RT-PCR was performed using total RNAs from various tissues including liver, small intestine, heart, brain, kidney, lung, spleen, stomach, uterus, ovary, and testis. Sirtuins were highly expressed in most of tissues including the testis. Immunostaining assay showed that Sirt1 and Sirt6 were mainly located in the nucleus of germ cells, spermatocytes, and spermatids in the seminiferous tubules, whereas Sirt2 and Sirt5 were exclusively present in the cytoplasm of germ cells and spermatocytes. Our results indicate that Sirtuins may function as regulators of spermatogenesis and their activities might be dependent on their location in the seminiferous tubules.
Adult diapause in insects is characterized by suppression of reproductive development. It is induced by environmental cues such as photoperiod, temperature, food availability, and other conditions Diapause-inducing environment is recognized and analyzed by the brain of the insects. The interpreted information is conveyed via endocrine system to target tissues such as ovaries, fat body, and other tissues. From this signal hierarchy of a brain-endocrine-target tissue axis, several factors are involved to express a diapause trait in a quantitative mode, even though the insects show a binomial phenotye between being in diapause or not. Recent works estimated that the number of the factors is relatively small by a series of crossing trials between high and low diapause lines. Heritability of the diapause is quite high (ca. 70%) in some species. Epistasis, sex-linkage, pleiotropism, and other nongenetic components also affect diapause inheritance. Most physiological studies have been focused on control mechanisms of the juvenile hormone (JH) synthesis in corpora allata (CA) because JH level in hemolymph of teneral adults is critical to decide a later developmental mode. Allatostatin, an antagonizer of JH synthesis, has been believed to be a potent brain message to CA for adult diapause induction.
Androgen plays an important role in the regulation of gonadotropin production in vertebrates . We have investigated the transcriptional pattern of androgen receptor (AR) in a variety of tissues in maturing male and female goldfish by RT-PCR. Specific primer for AR was designed based on goldfish AR gene from the GenBank (accession number AY090897). AR was shown 10 be maturity- and tissue-dependent gene expression pattern in goldfish. In immature male goldfish, significantly higher transcript level of AR was observed in the pituitary und testis , compared [0 brain and liver. Mature male goldfish showed a similar expression pattern to immature male goldfish. Interestingly. when compare to male goldfish, female goldfish showed AR mRNA expression that was found 10 be weak in pituitary, and very low expression in brain. They could not be found 10 have expression in any other tissues. Taken together. the- transcriptional analysis of AR depending on the tissue, sex. and maturity of a goldfish provides the opportunity for the study of goldfish reproductive physiology ,The results provided for the first time a comparison of the tissue distribution of AR mRNA in sexually maturating male and female goldfish.
Structural aspects of highly reduced vegetative organs in the aquatic Spirodela polyrhiza were examined using scanning and transmission electron microscopy. The study focused mainly on young and mature fronds with turions and their cellular features were compared. Mature fronds were composed of thin-walled chlorenchyma with highly vacuolated cells; most of which were frequently occupied by either tanniferous deposits or various crystals. Fronds of photoautotrophic offspring were produced from the meristematic region of the reproductive pockets within mother fronds, where they remained until separation. Moderate degrees of wall ingrowth and plasmalemma proliferation were detected briefly in the epidermis of daughter fronds during early development. Vascular tissues were generally much reduced, but air chambers were well-established in fronds. Chloroplasts having grana with several thylakoids were distributed throughout the plant, but starch grains were encountered frequently in the mesophyll chloroplasts of younger fronds and initial stage of the turion. Their cytoplasm was dense with small vacuoles in most cases. Further, big starch grains, up to several microns, occupying most of the plastid volume were formed in the turion prior to sink for overwintering. Plasmodesmata were numerous in the examined tissues, except mature turions, suggesting a symplastic pathway of the metabolites within body.
Ovarian cancer is the most lethal gynecological malignancy, and specific biomarkers are important needed to improve diagnosis, prognosis, and to forecast and monitor treatment efficiency. There are a lot of pathological factors, including reactive oxygen species (ROS), involved in the process of cancer initiation and progression. The oxidative modification of proteins by ROS is implicated in the etiology or progression of disorders and diseases. In this study, a labeling experiment with the thiol-modifying reagent biotinylated iodoacetamide (BIAM) revealed that a variety of proteins were differentially oxidized between normal and tumor tissues of ovarian cancer patients. To identify cysteine oxidation-sensitive proteins in ovarian cancer patients, we performed comparative analysis by nano-UPLC-$MS^E$ shotgun proteomics. We found oxidation-sensitive 22 proteins from 41 peptides containing cysteine oxidation. Using Ingenuity program, these proteins identified were established with canonical network related to cytoskeletal network, cellular organization and maintenance, and metabolism. Among oxidation-sensitive proteins, the modification pattern of Collagen alpha-1(VI) chain (COL6A1) was firstly confirmed between normal and tumor tissues of patients by 2-DE western blotting. This result suggested that COL6A1 might have cysteine oxidative modification in tumor tissue of ovarian cancer patients.
Choi, S. C.;H. H. Yeon;S. K. Choi;H. Lee;S. Hong;C. S. Park;S. H. Lee;S. H. Lee
Reproductive and Developmental Biology
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v.28
no.1
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pp.65-70
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2004
In mammals, male and female germline stem cells are derived from primodial germ cells. Despite many efforts to identify stem cells from gonads, there has been little successe to identify germline stem cells yet. In this study, we isolate and characterized porcine germline stem cells using only stem cell markers that are prevalently expressed in various tissues. Gonadal cells derived from both male and female formed colonies and showed AP activities and different lectin binding properties. Pluripotency of germline stem cells was also identified by positive signals against putative stem cells markers such as SSEA-1 and SSEA-3. In addition, nestin was also found in primary gonad cells that have a similar morphology to the AP-positive cells. The nestin expression suggests that the germline stem cells may have similar expression of the prevalent stem cell markers found in other tissues. The demonstration of nestin expression together with pluripotent cell markers calls further investigation of the possible differentiation of nestin-positive cells into neurons.
In mouse, the heat shock protein 70-2 (hsp70-2) is found to have special function in spermatogenesis. Based on the observation, the hypothesis that human hspA2 (human gene; 98.2% amino acid homology with hsp70-2) might have important function in spermatogenesis in human testes was proposed. To test the hypothesis, we examined the expression of hspA2 in human tissues. Expression vector pDMC4 for expression of the human hspA2 protein using pTricHisB (invitrogen, USA) was constructed and the expressed hspA2 protein was cross-reacted with antiserum 2A raised against mouse hsp70-2 protein. Based on the cross-reactivity, we determined the expression level of hspA2 protein in human tissues by western blot analysis using the antiserum 2A. We demonstrated that antiserum 2A antibodies detected human hspA2 protein with specificity which was produced in the E.coli expression system. On Western blot analyses, significant hspA2 expression was observed in testes with normal spermatogenesis, whereas a low level of hspA2 was expressed in testis with Sertoli-cell only syndrome. Also, a small amount of hspA2 was detected in breast, stomach, prostate, colon, liver, ovary, and epididymis. These results demonstrate that the hspA2 protein is highly expressed in male specific germ cells, which in turn suggests that hspA2 protein might playa specific role during meiosis in human testes as suggested in the murine model. However, further studies should be attempted to determine the function of hspA2 protein in human spermatogenesis.
Cho, In Ae;Lee, Yeon Jee;Lee, Hee Jung;Choi, In Young;Shin, Jeong Kyu;Lee, Soon Ae;Lee, Jong Hak;Choi, Won Jun
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.45
no.3
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pp.143-148
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2018
Objective: The favored method of preserving fertility in young female cancer survivors is cryopreservation and autotransplantation of ovarian tissue. Reducing hypoxia until angiogenesis takes place is essential for the survival of transplanted ovarian tissue. The aim of this study was to investigate the role of angiopoietin-1 (Angpt-1), angiopoietin-2 (Angpt-2), and vascular endothelial growth factor (VEGF) in ovarian tissue grafts that were cryopreserved using two methods. Methods: Ovarian tissues harvested from ICR mice were divided into three groups: group I (control), no cryopreservation; group II, vitrification in EFS (ethylene-glycol, ficoll, and sucrose solution)-40; and group III, slow freezing in dimethyl sulfoxide. We extracted mRNA for VEGF, Angpt-1, and Angpt-2 from ovarian tissue 1 week following cryopreservation and again 2 weeks after autotransplantation. We used reverse transcriptase-polymerase chain reaction to quantify the levels of VEGF, Angpt-1, and Angpt-2 in the tissue. Results: Angpt-1 and Angpt-2 expression decreased after cryopreservation in groups II and III. After autotransplantation, Angpt-1 and Angpt-2 expression in ovarian tissue showed different trends. Angpt-1 expression in groups II and III was lower than in group I, but Angpt-2 in groups II and III showed no significant difference from group I. The vitrified ovarian tissues had higher expression of VEGF and Angpt-2 than the slow-frozen ovarian tissues, but the difference was not statistically significant. Conclusion: Our results indicate that Angpt-2 may play an important role in ovarian tissue transplantation after cryopreservation although further studies are needed to understand its exact function.
Circular RNAs (circRNAs), one kind of non-coding RNA, have been reported as critical regulators for modulating gene expression in cancer. In this study, microarray analysis was used to screen circRNA expression profiles of bladder cancer (BC) 5637 cells, T24 cells and normal control SV-HUC-1 cells. The data from the microarray showed that hsa_circ_0075828 (named circCASC15) was most highly expressed in 5637 and T24 cells. circCASC15 was highly expressed in BC tissues and cells. Overexpression of circCASC15 was closely associated with BC tumor stage and promoted cell proliferation significantly in vitro and in vivo. Mechanistically, circCASC15 could act as miR-1224-5p sponge to activate the expression of CREB1 to promote cell proliferation in BC. In short, circCASC15 promotes cell proliferation in BC, which might be a new molecular target for BC diagnosis and therapy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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