황산염 환원 반응이 혐기성 조건 하에서 수소에 대하여 경쟁관계에 있는 메탄생성 및 환원성 탈염소화 반응에 미치는 영향을 평가하기 위한 회분식 실험을 수행하였다. 황산염 환원반응은 수소문턱농도가 2 nM로 탈염소화 반응과 유사하여 낮은 수소 농도에서 탈염소화를 저해하였으며 메탄생성균이 cDCE의 탈염소화를 저해시키는 것과는 달리 PCE의 cDCE 변환 과정부터 탈염소화를 억제하였다. 또한 황산염은 메탄생성을 억제하여 메탄생성균이 수소경쟁에서 제외되었는 바, 이는 메탄생성의 수소문턱농도(10 nM)가 상대적으로 높기 때문이다. 황산염이 존재하는 경우 탈염소화 효율은 식종 미생물의 농도에 큰 영향을 받지 않았는 바, 이는 식종 미생물 증가에 의해 탈염소화뿐만 아니라 황산염 환원반응도 동시에 촉진되었기 때문이다.
The reductive dechlorination of chlorinated organic compounds by soil minerals in soil and groundwater were carried out in this study. FeS, green rust, and magnetite were chosen as the representative soil minerals which were capable of degrading chlorinated compound in soil system. FeS was the most effective reductant in degradation of carbon tetrachloride. The reductive degradation of CT and 1,1,1-TCA by FeS was much faster than that of 1,2-DCB and 2,4-DCP. The reactivity of FeS was effectively improved by the addition of trace metals. The addition of Co to FeS suspension enhanced the reaction rate of 1,2-DCB by a factor of 46 compared to that by FeS without Co.
본 연구는 사염화에틸렌(Perchloroethylene) 또는 트리클로로에틸렌(Trichloroethylene)으로 오염된 국내 지하수 내에 국외에서 보고된 환원성 탈염소화 미생물의 존재 유무와 사염화에틸렌의 생물학적 탈염소화 활성도를 평가하였다. 마이크로코즘 테스트(microcosm tests)는 4개의 오염지역(창원 A, 창원 B, 부천 및 양산) 지하수와 다양한 전자공여체 (sodium lactate, sodium propionate, sodium butyrate, sodium fumarate)를 이용하여 수행하였다. 단일 전자공여체 와 창원 A 혹은 창원 B 지하수를 주입한 전 마이크로코즘에서 사염화에틸렌 완전 탈염소화 분해 시 발생하는 최종 산물인 에틸렌이 배양 90일 후에 검출되었고, 부천 혹은 양산 지역의 지하수를 주입한 마이크로코즘에서는 배양 90 일 후 시스-1,2-디클로로에틸렌(cis-1 ,2-Dichloroethylene)만이 검출되었고, 염화비닐(Vinyl chloride) 과 에틸렌은 검출되지 않았다. 완전 탈염소화 생분해가 확인된 창원 B 지역 지하수와 불완전 탈염소화 생분해가 확인된 양산 지역 지하수 내 미생물 군집을 비교하기 위해 분자생물학적 방법을 이용한 실험을 수행하였다. 창원 B 지역 지하수의 클론 라이브러리(Clone library)에서 사염화에틸렌 완전 탈염소화 미생물, uncultured bacterium clone DCE47과 매우 유사한 염기서열 클론이 확인되었다. 그러나 양산 지역의 클론 라이브러리에서는 기존의 염화에틸렌 탈염소화 미생물과 유사한 염기서열 클론이 확인되지 않았다. 본 연구 결과를 통하여 국내 일부 지역의 지하수 내에 사염화에틸렌을 완전 탈염소화하여 무해한 에틸렌으로 분해하는 미생물이 존재함을 확인하였고, 적절한 전자공여체를 공급하는 경우 그 분해 활성도가 증가함을 확인하였다. 이 결과는 사염화에틸렌 혹은 트리클로로에틸렌으로 오염된 국내 지하수를 경제적인 공법인 환원성 탈염소화 생물학적 공정으로 복원할 수 있는 기능성을 보여주는 중요한 지표라고 사료된다.
An industrial complex in Wonju, contaminated with trichloroethene (TCE), was one of the most problematic sites in Korea. Despite repeated remedial trials for decades, chlorinated ethenes remained as sources of down-gradient groundwater contamination. Recent efforts were being made to remove the contaminants of the area, but knowledge of the indigenous microbial communities and their dechlorination abilities were unknown. Thus, the objectives of the present study were (i) to evaluate the dechlorination abilities of indigenous microbes at the contaminated site, (ii) to characterize which microbes and reductive dehalogenase genes were responsible for the dechlorination reactions, and (iii) to develop a PCE-to-ethene dechlorinating microbial consortium. An enrichment culture that dechlorinates PCE to ethene was obtained from Wonju stream, nearby a trichloroethene (TCE)-contaminated industrial complex. The community profiling revealed that known organohalide-respiring microbes, such as Geobacter, Desulfuromonas, and Dehalococcoides grew during the incubation with chlorinated ethenes. Although Chloroflexi populations (i.e., Longilinea and Bellilinea) were the most enriched in the sediment microcosms, those were not found in the transfer cultures. Based upon the results from pyrosequencing of 16S rRNA gene amplicons and qPCR using TaqMan chemistry, close relatives of Dehalococcoides mccartyi strains FL2 and GT seemed to be dominant and responsible for the complete detoxification of chlorinated ethenes in the transfer cultures. This study also demonstrated that the contaminated site harbors indigenous microbes that can convert PCE to ethene, and the developed consortium can be an important resource for future bioremediation efforts.
Oxygen sensitivity and substrate requirement have been known as possible reasons for the intricate growth of Dehalococcoides spp. and limiting factors of for routinely applying bioaugmentation using anaerobic Dehalococcoides-containing microbes for remediating chlorinated organic compounds. To explore the effect of the short-term exposure of the short-term exposure of oxygen on Dehalococcoides capability, dechlorination performance, and hydrogen production fermentation from formate, an anaerobic reductive dechlorination mixed-culture (Evanite culture) including dehalococcoides spp. was in this study. In the results, once the mixed-culture were exposed to oxygen, trichloroethylene (TCE) degradation rate decreased and it was not fully recovered even addition of excess formate for 40 days. In contrast, hydrogen was continuously produced by hydrogen-fermentation process even under oxygen presence. The results indicate that although the oxygen-exposed cells cannot completely dechlorinate TCE to ethylene (ETH), hydrogen fermentation process was not affected by oxygen presence. These results suggest that dechlorinating microbes may more sensitive to oxygen than fermenting microbes, and monitoring dechlorinators activity may be critical to achieve an successful remediation of a TCE contaminated-aquifer through bioaugmentation using Dehalococcoides spp..
In this study, the reductive dechlorination of triclosan using zero-valent iron (ZVI, $Fe^0$) and modified zero-valent iron (i.e., acid-washed iron (Aw/Fe) and palladium-coated iron (Pd/Fe)) was experimentally investigated, and the reduction characteristics were evaluated by analyzing the reaction kinetics. Triclosan could be reductively decomposed using zero-valent iron. The degradation rates of triclosan were about 50% and 67% when $Fe^0$ and Aw/Fe were used as reductants, respectively, after 8 h of reaction. For the Pd/Fe system, the degradation rate was about 57% after 1 h of reaction. Thus, Pd/Fe exhibited remarkable performance in the reductive degradation of triclosan. Several dechlorinated intermediates were predicted by GC-MS spectrum, and 2-phenoxyphenol was detected as the by-product of the decomposition reaction of triclosan, indicating that reductive dechlorination occurred continuously. As the reaction proceeded, the pH of the solution increased steadily; the pH increase for the Pd/Fe system was smaller than that for the $Fe^0$ and Aw/Fe system. Further, zero-order, first-order, and second-order kinetic models were used to analyze the reaction kinetics. The first-order kinetic model was found to be the best with good correlation for the $Fe^0$ and Aw/Fe system. However, for the Pd/Fe system, the experimental data were evaluated to be well fitted to the second-order kinetic model. The reaction rate constants (k) were in the order of Pd/Fe > Aw/Fe > $Fe^0$, with the rate constant of Pd/Fe being much higher than that of the other two reductants.
Two biokinetic models (\circled1 Mrichaelis-Menten kinetics with competitive inhibition \circled2 with both competitive inhibition and Haldane inhibition) for reductive dechlorination were developed and compared with results from batch kinetic tests conducted over a wide range of PCE and TCE concentrations with two different dechlorinating cultures. At PCE concentrations lower than 300 $\mu$M, both model simulated the experimental results well. However, The kinetic model that incorporated both competitive and Haldane inhibitions much better simulated experimental data for PCE concentrations greater than 300-400 $\mu$M, and TCE concentrations at half its solubility limit (4000 $\mu$M). The PM culture showed Haldane inhibition constants of 900, 6000, 7000 $\mu$M for TCE, c-DCE and VC, indicating very weak Haldane inhibition for c-DCE and VC, while the EV culture had lower Haldane inhibition constants for TCE, c-DCE, and VC of 900, 750, and 750 $\mu$M, respectively. The BM culture had better transformation abilities than the individual cultures over a wide range of PCE and TCE concentrations. Modeling results indicated that a combination of competitive and Haldane inhibition kinetics is required to simulate dechlorination over a broad range of concentrations up to the solubility limits of PCE and TCE.
난분해성 물질로 알려진 2,4,6-trichlorophenol를 혐기성 미생물의 cometabolism을 이용하여 처리할 경우 높은 탈염소화 속도를 얻기 위하여 전자콩여체 를 선정하기 위하여 회분식 실험을 수행하였다. 회분식 실험은 Serum bottle에서 중량천 폐수처리장 의 1차 소화조에서 채취한 혐기성 소화슬러지를 사 용하여 2,4,6-trichlorophen이의 환원척 탈염소화 반 응을 유도하였다. 탈염소화 과정에셔 중간생성물을 조사하였고 혐기성 미생물의 성장과 유지를 위한 에 너지원인 전자공여체에 따른 탈염소화 속도를 비교 하였다. 회분식 실험결과 2,4,6 - trichlorophenol은 ortho위치의 염소가 치환되어 2,4- Oichlorophenol 로 탈염소화되 었다2,4-dichlorophenol은 다시 ortho위치의 염소가 치환되어 4-chlorophenol로 탈 염소화되 었다. Acetate, ethanol, glucose와 metha nol를 전자공여 체로 사용한 결과 ethanol을 사용한 경우에 서 2,4,6-trichlorophenol의 탈염소화 속도가 가장 빠른 것으로 관찰되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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