Hwang, Sung Min;Jang, Kyoung Soo;Choi, Yong Ho;Kim, Hun;Choi, Gyung Ja
Research in Plant Disease
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v.23
no.4
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pp.334-347
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2017
Bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum is an important disease in cultivation of chili pepper, causing plant death and significant yield losses. Cultivation of disease-resistant varieties is the most suitable measure to control bacterial wilt of chili pepper. To establish an efficient screening method for resistant chili pepper to R. solanacearum, six resistant or susceptible cultivars to the R. solanacearum were selected and the development of bacterial wilt on the cultivars according to several conditions was investigated. Drenching bacterial suspension into the cut roots using a scalpel was more simple and effective to distinguish resistant and susceptible cultivars than inoculation methods of root-dipping or soil-drenching without wounding. A resistant pepper, 'MC4' to R. solanacearum showed high resistance under the developed conditions which were 21- to 28-day-old pepper inoculated with $1{\times}10^8cfu/ml$ of bacterial suspension. On the other hands, the susceptible cultivars represented high disease severity under the conditions. These results indicated that we developed an efficient method to evaluate resistance of chili pepper cultivars against bacterial wilt. In addition, we successfully evaluated resistance degree of 140 commercial chili pepper cultivars to R. solanacearum using the developed method.
In order to investigate the cause of wilting symptoms in red pepper field of Korea, the frequency of occurrence of red peppers showing wilting symptoms was investigated in pepper cultivation fields in Goesan, Chungcheongbuk-do for 5 years from 2010 to 2014. There was a difference in the frequency of wilting symptoms depending on the year of investigation, but the frequency of occurrence increased as the investigation period passed from June and July to August. During this period, Ralstonia solanacearum causing the bacterial wilt was isolated at a rate four times higher than Phytophthora capsica causing the Phytophthora late blight. In wilted peppers collected in Goesan of Chungbuk and Andong of Gyeongbuk in 2013 and 2014, R. solanacearum and P. capsici were isolated from 20.3% and 3.8% of the total fields, respectively. In the year with a high rate of wilting symptoms, the average temperature was high, and the disease occurrence date of the bacterial wilt, estimated with disease forecasting model, was also fast. The inconsistency between the number of days at risk of Phytophthora late blight and the frequency of occurrence of wither symptoms is thought to be due to the generalization of the use of cultivars resistant to the Phytophthora late blight in the pepper field. In our study, the wilting symptoms were caused by the bacterial wilt caused by R. solanacearum rather than the Phytophthora late blight caused by P. capsica, which is possibly caused by increasing cultivation of pepper varieties resistant to the Phytophthora late blight in the field.
Eleven hot pepper accessions collected in Vietnam showed stable resistance to bacterial wilt as well-known resistance sources, MC4 and MC5, in repeated inoculation tests with different Ralstonia solanacearum isolates conducted from 2004 to 2010. Seven of these accessions (specifically KC981, KC1006, KC1021, KC1027, KC1045, KC1050, and KC1055) resulted in stable male sterile F1 plants in the crosses with a cytoplasmically male sterile (CMS) Chilseong (CMS-A, Srfrf ), and therefore, they were maintainers (CMS-B) with a genotype of Nrfrf. The rest (KC980, KC995, KC999, and KC1009) produced stable male fertile F1 plants in the crosses, and therefore, were restorers (CMS-C) with a genotype of N(S)RfRf. Therefore, the maintainer and restorer sources of resistance may be used in preference in breeding maternal (CMS and their maintainers) and paternal parents (restorers) for resistance to bacterial wilt, respectively, in the hybrid breeding system utilizing cytoplasmic male sterility.
The population of Ralstonia solanacearum (Rs) in soil is very important as a primary inoculum source of bacterial wilt in tobacco fields. To investigate the population of Rs, physical properties and chemical components during the tobacco growing season, soil samples were taken from the fifteen fields which were located in the flue-cured tobacco growing area, Ansung, Kyunggi province and Wonju, Kangwon province. Two fields of the fifteen were bacterial wilt free. Six fields had less than 10% plants being diseased and seven over 10%. The Rs population level determined by using SMSA medium generally showed an up-and-down pattern being low in May, high in Jun and July and low in August. The soil population in May and June showed a positive correlation with the incidence of bacterial wilt (r=0.571$^*$, r=0.688$^{**}$), but P$_2O_5$, content of soil was negatively correlated with the disease incidence (r=-0.539$^*$). These results suggest that Rs population in soil examined in May or in June, and the P$_2O_5$ content in soil should be key factors to determine the bacterial wilt potential of tobacco fields.
Bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum is one of the most devastating diseases in major Solanaceae crops. The pathogen is easily disseminated and survives for many years in plant farming system. Although chemicals are applied to control the disease, they are of limited efficacy and cause several problems. Therefore, the use of phage therapy has been suggested to control the disease as a biological agent. In this study, we discovered bacteriophages lysing diverse Ralstonia isolates from plant and soil samples obtained from the potato cultivated field in Jeju. Three times repeated pickings of plaques resulted in obtaining 173 single phages showing diverse spectrum of host-specificity. With the results, 12 core phages were selected and dendrogram was generated. Genetic diversity of the selected phages was also confirmed by AFLP (Amplified Fragment of Length Polymorphism) fingerprinting. The stability of the phages was investigated in various temperatures and various conditions of pH in vitro. The phages were stable at $16^{\circ}C-44^{\circ}C$ and pH 6-10. Morphological characterization of the phages revealed they were all classified into the Podoviridae, but had diverse head sizes. The results of this research will contribute to control the disease and further researches regarding genetic and molecular aspects will facilitate understanding phage and bacteria interaction.
The Ralstonia solanacearum species complex (RSSC) can be divided into four phylotypes, and includes phenotypically diverse bacterial strains that cause bacterial wilt on various host plants. This study used 93 RSSC isolates responsible for potato bacterial wilt in Korea, and investigated their phylogenetic relatedness based on the analysis of phylotype, biovar, and host range. Of the 93 isolates, twenty-two were identified as biovar 2, eight as biovar 3, and sixty-three as biovar 4. Applied to the phylotype scheme, biovar 3 and 4 isolates belonged to phylotype I, and biovar 2 isolates belonged to phylotype IV. This classification was consistent with phylogenetic trees based on 16S rRNA and egl gene sequences, in which biovar 3 and 4 isolates clustered to phylotype I, and biovar 2 isolates clustered to phylotype IV. Korean biovar 2 isolates were distinct from biovar 3 and 4 isolates pathologically as well as genetically - all biovar 2 isolates were nonpathogenic to peppers. Additionally, in host-determining assays, we found uncommon strains among biovar 2 of phylotype IV, which were the tomato-nonpathogenic strains. Since tomatoes are known to be highly susceptible to RSSC, to the best of our knowledge this is the first report of tomato-nonpathogenic potato strains. These results imply the potential prevalence of greater RSSC diversity in terms of host range than would be predicted based on phylogenetic analysis.
Park, Sangryeol;Gupta, Ravi;Krishna, R.;Kim, Sun Tae;Lee, Dong Yeol;Hwang, Duk-ju;Bae, Shin-Chul;Ahn, Il-Pyung
The Plant Pathology Journal
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v.32
no.1
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pp.25-32
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2016
Potato is one of the most important crops worldwide. Its commercial cultivars are highly susceptible to many fungal and bacterial diseases. Among these, bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum causes significant yield loss. In the present study, integrated proteomics and genomics approaches were used in order to identify bacterial wilt resistant genes from Rs resistance potato cultivar CT-206-10. 2-DE and MALDI-TOF/TOF-MS analysis identified eight differentially abundant proteins including glycine-rich RNA binding protein (GRP), tomato stress induced-1 (TSI-1) protein, pathogenesis-related (STH-2) protein and pentatricopeptide repeat containing (PPR) protein in response to Rs infection. Further, semi-quantitative RT-PCR identified up-regulation in transcript levels of all these genes upon Rs infection. Taken together, our results showed the involvement of the identified proteins in the Rs stress tolerance in potato. In the future, it would be interesting to raise the transgenic plants to further validate their involvement in resistance against Rs in potato.
Ralstonia solanacearum (Rso) is a causal agent of bacterial wilt in Solanaceae crops worldwide including Republic of Korea. Rso virulence predominantly relies on type III secreted effectors (T3Es). However, only a handful of Rso T3Es have been characterized. In this study, we investigated subcellular localization of and manipulation of plant immunity by 8 Rso T3Es predicted to harbor a nuclear localization signal (NLS). While 2 of these T3Es elicited cell death in both Nicotiana benthamiana and N. tabacum, only one was dependent on suppressor of G2 allele of skp1 (SGT1), a molecular chaperone of nucleotide-binding and leucine-rich repeat immune receptors. We also identified T3Es that differentially regulate flg22-induced reactive oxygen species production and gene expression. Interestingly, several of the NLS-containing T3Es translationally fused with yellow fluorescent protein accumulated in subcellular compartments other than the cell nucleus. Our findings bring new clues to decipher Rso T3E function in planta.
Seo, Sang-Tae;Park, Jong-Han;Kim, Kyung-Hee;Lee, Sang-Hyun;Oh, Eun-Sung;Shin, Sang-Chul
Research in Plant Disease
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v.14
no.1
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pp.32-36
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2008
Bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum has become a severe problem on tomato in Korea and no effective control measures are available yet. Pseudomonas species play key roles for the biocontrol of many plant diseases especially in soil. A rhizobacterial population of 150 Pseudomonas strains, isolated from the rhizosphere soil of various plants grown at different sites, was screened for 2,4-diacetylphloroglucinol producing gene (PhlD) by PCR. Two strains (P83 and P84) among them were found to be phlD positive. When the isolates were analysed by 16S rDNA (Sensu Stricto), all isolates yielded amplified products of 1,018bp. Of the 150 isolates of Pseudomonas spp., a bacterial strain P. putida P84 isolated from tomato rhizosphere showed to suppress a wide range of phytopathogenic bacteria in vitro. The best source of carbon for P84 strain were glucose, arabinose, inositol and melibiose. In greenhouse experiments, P84 strain suppressed the development of bacterial wilt in tomato with a control value of 60%.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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