본 연구는 비만세포의 일종인 RBL-2H3 세포주에 대한 hexamethylene bisacetamide (HMBA)의 세포독성 유도 기전이 telomerase의 활성과 관계가 있다는 것에 대한 보고이다. RBL-2H3 세포주에 5mM HMBA를 처리시 그 세포주의 세포성장이 억제 되었다. 기전연구로서 HMBA는 telomerase활성을 억제 하였으며 RT-PCR에 의한 결과 telomerase mRNA발현의 억제에 의한 것이었다. Madl은 telomerase의 발현을 억제하는 억제인자로 잘 알려져 왔으며 이를 확인해본 결과 Madl은 발현은 유의성있게 증가 되었다. 이를 종합해보면, HMBA에 의한 RBL-2H3 세포주에 대한 세포독성은 Madl 발현의 증가에 따른 telomerase발현의 억제에 기인하는 것으로 밝혀졌다.
Soyasaponins are glycosylated, which gives rise to a wide diversity of structures and functions. We evaluated for inhibitory effects of 4 soyasaponins on antigen-induced degranulation in RBL-2H3 Cells. 4 soyasaponins had shown dose-dependently inhibited histamine and ${\beta}$-hexosaminidase.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.40
no.12
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pp.1662-1667
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2011
Anthocyanins belong to a group of flavonoid compounds and are well known for their various health beneficial effects, which include antioxidative activities. Among them, the major anthocyanins isolated from seed coat of black soybean (Glycine max L.) were previously characterized as glycosides containing glucopyranose. Asthma is an allergic disease that is strongly associated with various immune cells, including basophils and mast cells. Eosinophils, basophils, and mast cells play important roles in allergic asthma through the release of inflammatory mediators such as asthma-specific T-helper 2 (Th2) cytokines and subsequent amplification of asthma symptoms via degranulation. Rat basophilic leukemia RBL-2H3 cells are the most common in vitro models for evaluating allergic reactions. In this study, we examined the effects of anthocyanin from seed coat of black soybean on antigen-stimulated degranulation and Th2 cytokine production in RBL-2H3 cells. Cell degranulation was evaluated by measuring the release of ${\beta}$-hexosaminidase. ${\beta}$-Hexosaminidase release and Th2 cytokine production in RBL-2H3 cells was much higher upon stimulation with IgE-antigen complex than those in untreated control cells. Anthocyanins significantly suppressed IgE-antigen complex-induced degranulation of RBL-2H3 cells and inhibited IgE-antigen complex-mediated interleukin (IL)-4, IL-13, and tumor necrosis factor ${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) production in RBL-2H3 cells. These findings suggest that anthocyanins from seed coat of black soybean effectively inhibit allergic reactions and may have beneficial effects against allergic asthma.
Objectives : In this report, we investigated the effect of ethanol extract of Syzygium aromaticum(L.) Merr. & Perry.(SAE) on the RBL-2H3 cell-mediated allergic response and studied its possible mechanisms of action. Methods : Cytotoxicity on RBL-2H3 cell was evaluated by MTT assay. Anti-allergic activity of SAE was assessed by ${\beta}$-Hexosaminidase and Histamine secretion, ${\beta}$- Hexosaminidase and Histamine secretion were measured by ELISA assay. Evaluate the mechanisms of effect of SAE on the secretion of degranulate mediators, we examined the effect of SAE on the activation of mitogen-activated protein kinases using western blot analysis. Results : SAE had no cytotoxicity on rat basophilic leukemia cell(RBL-2H3). Moreover SAE dose-dependently inhibited RBL-2H3 cell degranulation and histamine release. SAE specifically blocked the IgE-induced p38 mitogen-activated protein kinase activation. Conclusions : Our findings provide evidence that Syzygium aromaticum ethanol extract inhibits mast cell derived allergic reaction, and also demonstrate the involvement of p38 MAPK phosphorylation.
Broussonetia kazinoki twig extract (BKT) is recognized for its antioxidant and anti-cancer effects and natural whitening properties. So, it is used as a raw material for cosmetics. B. kazinoki twig is also an edible raw material. B. kazinoki has been used in Asia for paper production and oriental medicine, has anti-diabetic effects, and contains various flavonoids and alkaloids. In this study, to evaluate the efficacy of BKT on allergic skin inflammatory responses, we investigated its effects on factors related to skin inflammation in HaCaT keratinocytes and allergic responses in RBL-2H3 cells. There was no cytotoxicity of the 70% ethanol extract against HaCaT and RBL-2H3 cells. In HaCaT cells, stimulation with tumor necrosis factor-alpha (TNF-𝛼) and interferon-gamma (IFN-𝛾) increased the production of several chemokines, including thymus and activation-regulated chemokine (TARC), macrophage-derived chemokine (MDC), and regulated on activation, normal T cell expressed and secreted (RANTES). However, it was observed that this elevation was notably mitigated in a concentration-dependent manner upon treatment with BKT. Furthermore, BKT treatment demonstrated a significant reduction of 𝛽-hexosaminidase and inflammatory cytokines TNF-𝛼 and IL-4 in IgE-sensitized RBL-2H3 cells. Thus, it is expected that BKT can be used as a natural cosmetic and food ingredient that effectively suppresses allergic inflammatory reactions.
Kim, Jeong-Mi;Kim, Dae-Jung;Kim, Tae-Hyuk;Kim, Hyun-Sook;Choe, Myeon
Journal of Nutrition and Health
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v.43
no.4
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pp.367-373
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2010
The present study was to investigate anti-oxidative and anti-inflammatory activity of Perillae semen in RBL-2H3 basophilic leukemia cells. Inhibitory effect of Perillae semen onto free radical generation was determined by measuring DPPH and hydroxyl radical scavenging activities in vitro. Anti-inflammatory actions of Perillae semen extracts (100, 250, $500\;{\mu}g/mL$) were assessed by testing their effects on the degranulation of mast cells. For this, $\beta$-hexosaminidase released from RBL-2H3 cells was used and proinflammatory cytokines were measured by an ELISA kit. Our results indicated that Perillae semen water extracts effectively inhibited free radical generation. At the concentration of $500\;{\mu}g/mL$ of water extract, the degranulation of RBL-2H3 cells were inhibited by 42.1%. The IgE-antigen complex increased the accumulation of IL-4 and TNF-$\alpha$ secretion in RBL-2H3 cells and treatments with 250 and $500\;{\mu}g/mL$ of Perillae semen extracts suppressed the IgE induced secretion of IL-4 and TNF-$\alpha$ protein by 20.5, 26.9% and 14.5, 16.5% respectively. We observed that Perillae semen water extract reduced $\beta$-hexosaminidase, IL-4, and TNF-$\alpha$ secretion in RBL-2H3 cells. These results provide that Perillae semen may be beneficial in the treatment of allergic inflammatory disease.
Jung, Jae In;Kim, Hyung Seo;Ji, Han Kyeol;Lee, Hyun Sook;Lee, Jae-Yong;Kim, Eun Ji
Journal of Nutrition and Health
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v.51
no.3
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pp.208-214
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2018
Purpose: Platycodon grandiflorum (a domestic diploid variety, DV-PG) has been used as a food and component of various traditional oriental medicines. Although DV-PG is known to have an anti-allergic effect, little is known about the beneficial health effects of the tetraploid 'Etteum' variety in the Platycodon grandiflorum (TV-PG), which is a recently developed variety. In this study, we investigated the effect of TV-PG on the rat basophilic leukemia mast cell (RBL-2H3)-mediated allergic response. Methods: To examine the effects of TV-PG on the allergic response, RBL-2H3 cells were sensitized with dinitropheny (DNP)-immunoglobin E, treated with various concentrations of TV-PG, and challenged with DNP-human serum albumin. We estimated cell granulation by measuring the release of ${\beta}$-hexosaminidase and production of inflammatory mediators by ELISA. Results: TV-PG had no effect on the proliferation or cytotoxicity of RBL-2H3 cells within the concentration range of 0 to $200{\mu}g/mL$. TV-PG inhibited degranulation of RBL-2H3 cells by antigen stimulation in a dose-dependent manner. TV-PG also suppressed the production of inflammatory cytokines and mediators such as interleukin-4, tumor necrosis $factor-{\alpha}$, prostagladin E2, and leukotriene B4 in RBL-2H3 cells by antigen stimulation. Conclusion: These results indicate that TV-PG exhibits anti-allergic activity via inhibition of degranulation as well as suppression of inflammatory mediators and cytokine release. These findings suggest that TV-PG may have potential as a preventive and therapeutic agent for the treatment of various allergic diseases.
Objectives : In this study, we investigated the effect of modified-Okbyungpoongsan (mOP) on mast cell-mediated allergic response in basophilic leukemia cell line, RBL-2H3 mast cells. Methods : Cells were stimulated with anti-DNP-IgE after the treatment of DNP-HSA (AI/D), and then incubated with different concentrations of mOP (0.1, 0.2, 0.5 and 1 mg/$m{\ell}$) in RBL-2H3 cells. Cell toxicity was determined by WST-1 assay. The degranulation of mast cells was observed by microscope with toluidine blue staining and also the levels of beta-hexosaminidase, histamine and TNF-alpha were measured in culture supernatants by enzyme-linked immunosorbant assay. Results : mOP inhibited anti-DNP-IgE-imduced degranulation of mast cells in RBL-2H3 cells. mOP also significantly decreased the levels of histamine and inflammatory cytokine, TNF-alpha in RBL-2H3 cells, but slightly decreased the level of beta-hexosaminidase. Conclusions : These results indicate that mOP, an oriental prescription could be inhibit the allergic response through suppressing the mast cell activation.
Cyanidin-3-glucoside (C3G), an anthocyanin, is one of the most widespread dietary flavonoids. We investigated the effects of C3G in PMA/ionomycin (PI)-induced RBL-2H3 cells. C3G inhibited the production of IL-4 and IL-13 and also decreased the level of mRNA in a dose-dependent manner. Furthermore, western blot analysis implied that C3G down-regulated the protein level of c-Jun, NF-ATc1 and NF-${\kappa}B$ but not c-Fos. Taken together, we suggest that C3G may have suppressive effects on Th2 cytokines and will be studied further to develop as functional foods that help alleviate allergy symptoms.
The anti-allergic effect of the methanol extract of Zizania latifolia Turcz was investigated. Methanol extract of Z. latifolia Trucz did not display any cytotoxicity activities in the IgE-sensitized RBL-2H3 cells. The extract was found to inhibit compound 48/80-induced degranulation and antigen-induced $\beta$-hexosaminidase release as well as PMA plus A23187-induced TNF-$\alpha$ production in RBL-2H3 mast cells in a dose-dependent manner. Release of $\beta$-hexosaminidase, a marker for the release of histamine in mast cells, was inhibited with an $IC_{50}$ value of $73.8\;{\mu}g/mL$. These results suggest that Z. latifolia extracts may be useful for the prevention of type I allergic reaction.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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