Phellinus pini (Hymenocaetaceae) has been used for the immunomodulating activity hypolipidemic effect, gastric cancer non-insulin dependant diabetes, diarrhea, and menstrual irregularity. From the screening of each fraction for the inhibitory activity of NO production in lipopolysaccaride (LPS) activated RAW 264.7 cells, methanol extract of Phellinus pini and hexane soluble fraction exhibited inhibition of NO production compared with LPS control without toxicity. The hexane soluble fraction showed dose dependent inhibition of NO production. According to activity guided fractionation, the active hexane fr. was repeatedly chromatographed over silica gel, ergosta-4,6,8(14),22- tetraen-3-one was isolated. The compound inhibited NOS activation (IC$_{50}$ = 29.7 uM) and NO production of activated macrophage at 30 uM.
The oxidative modification of low density lipoprotein(LDL) has been implicated in the development of atherosclerosis. Oxidized LDL(oxLDL) is captured into macrophage and stimulates to form macrophage foam cell. And it can induce an inflammation and smooth muscle proliferation in atherosclerotic plaque. Objective : In this study, we aimed to investigate the effect of Bupleuri radix(SH) on the foam cell formation, a critical initiation stage of atherosclerosis. Methods : To achieve the goal, we examined the effect of SH on LDL oxidation, nitric oxide production in RAW264.7, and the effect of SH on cupuric sulfate-induced cytotoxicity, LDH release, and macrophage activity. Results : SH inhibited the formation of oxidized LDL from native LDL in RAW264.7 cell culture, and decreased the release of LDH from cupric sulfate-stimulated RAW264.7 cell. In other experiments, SH activated RAW264.7 cell, and prolonged the survival time, and inhibited foam cell formation induced by oxLDL in Raw 264.7 cells. Conclusion : These results showed that SH might prevent atherosclerosis by controlling the early stages of foam cell formation.
Objectives : The objective of this study is to study the effects of Euonymi Lignum Suberatatum pharmacopuncture solution on NO and IL-6 production in macrophage. Methods : At first, the RAW 264.7 macrophage was subclutured. In order to evaluate cytotoxicity, MTT assay performed. Then, the cell was induced by LPS, INF-$\gamma$ and Experimental groups were divided into five(Normal, Control, Euonymi Lignum Suberatatum 100, 200, $300{\mu}g/m{\ell}$). Then Euonymi Lignum Suberatatum pharmacopuncture solution was put into cell. We measured IL-6, iNOS, NO. Results : The cytotoxic effect of Euonymi Lignum Suberatatum pharmacopuncture solution in RAW 264.7 macrophage was not appeared. $300{\mu}g/m\ell$ Euonymi Lignum Suberatatum pharmacopuncture solution inhibited IL-6 production in LPS, INF-$\gamma$-stimulated RAW 264.7 macrophages significantly. Euonymi Lignum Suberatatum pharmacopuncture solution inhibited iNOS revelation in LPS, INF-$\gamma$-stimulated RAW 264.7 macrophages. All group of Euonymi Lignum Suberatatum pharmacopuncture solution inhibited NO production in LPS, INF-$\gamma$-stimulated RAW 264.7 macrophages significantly. Conclusions : Our study demonstrated that Euonymi Lignum Suberatatum pharmacopuncture solution had an inhibition effect on NO production, iNOS revelation, IL-6 production. So Euonymi Lignum Suberatatum pharmaco puncture solution may have an Anti-inflammation effect.
Aim This study was done to investigate whether SPP has inhibitory effects on the activation of RAW 264.7 cells. Method In tumor necrosis factor-a (TNF-a)/ interleukin-1b (IL-1b) and IL-6, the mRNA expression of molecular indicators related to inflammatory changes of the Reumatoid Arthritis (RA) were examined using quantitative real-time PCR. Results The treatment of SPP significantly suppressed the expression of proinflammatory cytokines and chemokines such as TNF-a, IL-1b, IL-6 compared with the control. The expression of NOS-II was considerably reduced, which was accompanied by a reduction in the production of nitric oxide (NO). It also reduced the expression of $TNF-{\alpha}$ in serum of Balb/c mice compared with control group. Conclusion SPP is an effective herbal material for suppressing the inflammation related cytokines of RAW 264.7 cells.
Objective : The aim of this study was to investigate anti-inflammatory activity of SD-01 methanol extract in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 macrophages. Methods : Cytotoxic activity of SD-01 methanol extract on RAW 264.7 cells was measured using 5-(3-caroboxymeth-oxyphenyl)-2H-tetra-zolium inner salt (MTS) assay. The nitric oxide (NO) production was measured by Griess reagent system. And proinflammatory cytokines and $PGE_2$ were measured by ELISA method. The levels of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), $I{\kappa}$-B-alpha and nuclear NF-${\kappa}$ B p65 expression were detected by western blot. Results : Our results indicated that methanol extract of SD-01 significantly inhibited the LPS-induced NO, $PGE_2$ production and iNOS, COX-2 expression accompanied by an attenuation of TNF-$\alpha$, IL-$1\beta$, IL-6 and MCP-1 production in RAW 264.7 cells. Moreover, methanol extract of SD-01 treatment also blocked LPS-induced NF-kB activation. Conclusion : These findings indicate that methanol extract of SD-01 inhibits the production of pro-inflammatory mediators and cytokines via suppression of NF-${\kappa}$ B activation. Take together, these results indicate that methanol extract of SD-01 has the potential for use as an agent of anti-chronic inflammatory diseases.
Objectives : The purpose of this study is to investigate effects of Scutellariae Radix water extract on hydrogen peroxide production in LPS-induced RAW 264.7 mouse macrophages. Methods : Scutellariae Radix produced from South Korea (SK) and Scutellariae Radix produced from China (SC) were extracted by hot water. Effects of SK and SC on hydrogen peroxide production in LPS-induced RAW 264.7 were measured by dihydrorhodamine 123 assay after 20, 24, 28, 44, 48, and 52 h incubation at the concentrations of 10, 25, 50, and 100 ug/mL. Results : SK significantly increased hydrogen peroxide production in LPS-induced RAW 264.7 cells for 20, 24, 28, 44, 48, and 52 h incubation at the concentrations of 10, 25, 50, and 100 ug/mL (P < 0.05). But SC did not represent any significant effect on hydrogen peroxide production in LPS-induced RAW 264.7 cells. Conclusions : These results suggest that Scutellariae Radix, especially produced from South Korea, has the immune-enhancing property related with its increasement of bacteriocidal hydrogen peroxide production in LPS-induced macrophages.
Background and Objectives : The aim of this study was to investigate anti-inflammatory and anti-oxidant effects of Hyunggaeyungyo-tang(HYT) on RAW 264.7 cells. Material and Methods : Two types of experiments were implemented for this study: first, the experiment to study the anti-oxidant effect of HYT using riboflavin; second, in vitro experiment to investigate the suppression of NF-${\kappa}$B activation using RAW 264.7 cells (I${\kappa}$B kinase and induce nitric oxide synthase mRNA expression) Results : 1. The anti-oxidant effects of HYT was dose-dependantly increased. 2. The RAW 264.7cells were treated with LPS for 1 hours prior to the addition of indicated concentrations(0.4,-1.0mg/$m\ell$) of HYT, and the cells were further incubated for 24 hours. The LPS-induced IKK & iNOS mRNA expression were dose-dependantly decreased in HYT treated RAW 264.7cells. Conclusion : The results suggest that HYT is significantly effective in the treatment of inflammation through the suppression of NF-${\kappa}$B activation and iNOS production.
Purpose: Chrysanthemum indicum (CHI) has been used for edible and medical purposes for a long time in Korea. The purpose of this study was to evaluate the anti-inflammatory effects of CHI water extract in lipopolysaccharides (LPS)-induced RAW 264.7 macrophage cells. Methods: To investigate the anti-inflammatory effects on LPS-induced RAW 264.7 macrophage cells, CHI extract as a whole plant was used in this study. RAW 264.7 cells were treated with various concentrations of CHI extract (1, 10, and $100{\mu}g/mL$). After that Nitric Oxide (NO), inducible nitric oxide synthase (iNOS), interleukin (IL)-$1{\beta}$, cyclooxygenase (COX)-2 and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) expression level were measured. Results: CHI extract significantly suppressed the LPS-induced NO production and decreased the level of iNOS, IL-$1{\beta}$, COX-2 messenger ribonucleic acid (mRNA) expression and also the down regulation of $PGE_2$ expression in a dose-dependent manner. Conclusion: The present study suggested that CHI extract can be substituted for anti-inflammatory drugs and provide a safe and effective non pharmacological therapeutic approach.
We have studied cytotoxicity of S-nitroso-N-acetyl- N-DL-penicillamine(SNAP), a Nitric oxide (NO)-releasing compound, in RAW264.7 macrophages. SNAP is cytotoxic to RAW264.7 cells in a concentration-dependent manner. PMA(200 nM) stimulated cells to produce superoxide anton radical($O_2^{-\cdot}$) and caused a little loss of RAW264.7 cell viability for 12 hr and diminished the cytotoxicity of SNAP. The mechanism by which PMA can protect cells against NO-mediated cytotoxicity was studied by peroxynitrite-enhanced chemiluminescence method. Observed results suggested that $O_2^{-\cdot}$ produced by PMAstimulated RAW264.7 cells may quench NO released by SNAP and reduce NO, thus attenuating NO-related damages.
This study investigated the anti-inflammatory effects of Xanthoceras sorbifolia of seeds oil on RAW264.7 macrophages and TPA (12-O-tetra decanoylphorbol-acetate)-induced ear edema mice. MTT assay method to measure cytotoxicity was formed in RAW264.7 cell. The anti-inflammatory effect was measured by ability to inhibit production nitric oxide (NO) in RAW264.7 cell. Hexane and eight-percent methanol fractions from Xanthoceras sorbifolia seeds oil did not show cytotoxicity. Hexane and eight-percent methanol fractions were showed significantly inhibitory effect on NO production. TPA-induced acute edema was developed in the mouse ears, and Xanthoceras sorbifolia seeds oil dissolved in acetone was applied to inflamed ears. It was found out that Xanthoceras sorbifolia seeds oil could significantly reduce th ear swelling, compared to the control. Overall results indicate that the Xanthoceras sorbifolia seeds oil has anti-inflammatory activity and could be used as a resource of anti-inflammatory materials.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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