This study was carried out to investigate the effects of SMG on the in vitro and in vivo inflammatory reactions. In experiment I, in vitro tests, ethanol extract of SMG showed potent radical scavenging activity tested by DPPH(I,1-diphenyl-2-picryl-hyrazyl) method and inhibited the lipopolysaccharide-induced gene expressions of interleukin-1${\beta}$, interleukin-6 and tumor necrosis factor-${\alpha}$ (above 50$\%$ at a concentration of 50㎍/㎖) by the macrophage RAW 246.7 cells. Among the herbal ingredients of SMG, ethanol extracts of Scutellaria baicalensis, Paeonia lactiflora, Glycyrrhiza glabra showed potent radical scavenging activity. And Glycyrrhiza glabra and Scutellaria baicalensis showed potent inhibitory activity of nitric oxide production. Especially, ethanol extract of Scutellaria baicalensis inhibited the gene expression of IL-1${\beta}$, IL-6 and TNF-${\alpha}$. In cyclooxygenase-2 assay, Scutellaria baicalensis and Glycyrrhiza glabra showed the potent inhibition of prostaglandin E2 generation. In experiment 2, in vivo tests, SMG showed inhibitory effects on vascular permeability (28.7$\%$) and leukocyte migration (11.5$\%$). These results mean that SMG has a anti-inflammatory effects by it's inhibitory effects of leukocyte migration and vascular permeability as well as it's inhibitory effects of lipopolysaccharide-induced gene expression of IL-1${\beta}$, IL-6 and TNF-${\alpha}$, and radical scavenging activity. Therefore, I expect that SMG may be used as a effective drug for treatment on inflammation.
적하수오 추출물의 추출용매별 항염증 작용을 알아보기 위해 LPS로 자극된 RAW 264.7 세포를 이용하여 실험을 진행 한 결과 열수 추출물 및 70% 에탄올 추출물 모두 $100{\mu}g/mL$에서 60%이상의 NO 생성 억제 율을 보이는 것을 확인 하였다. 또한 사이토 카인들에 대하여 적하수오 추출물은 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6, $PGE_2$ 생성량은 농도 의존적으로 감소하였고, 이는 적하수오 추출물이 염증성 사이토 카인의 발현을 억제 하여 염증 발생을 억제 할 수 있다고 할 수 있다. PMW는 $100{\mu}g/mL$의 농도에서 iNOS 단백질 발현량이 89%, COX-2는 54%의 효과를 나타내었으며, PME는 $100{\mu}g/mL$의 농도에서 iNOS 91%, COX-2는 57%의 단백질 발현 저해효과가 있음을 확인 할 결과로 보아 적하수오는 대식세포에서 NO, TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6, PGE2 iNOS, COX-2 발현을 억제 하며, 특히 적하수오 70% 에탄올 추출물의 경우 저 농도에서부터 효과를 나타내어 우수한 항염증 소재임을 확인 할 수 있었다.
Objectives : Mori Folium is one of the traditional medicinal herb. It was commonly used for sericulture in the world and has been traditionally administered as natural therapeutic agent for the treatment of filariasis, diabetes and dropsy in East Asia. This study investigated an anti-inflammatory potential of Mori Folium ethanol extract (MFE). Methods : We examined the effects of MFE on the lipopolysaccharide (LPS)-induced production of nitric oxide (NO) and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) in a murine macrophage cell line, RAW 264.7. Results : MFE inhibited production of NO and $PGE_2$ in a dose dependent manner and also decreased the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2, interleukin (IL)-1, IL-6 and tumor necrosis factor-${\alpha}$. As a plausible molecular mechanism, increased degradation of I-${\kappa}B{\alpha}$ and phosphorylation of I-${\kappa}B{\alpha}$, NF-${\kappa}B$ and MAP kinases by LPS were partly blocked by MFE treatment. Conclusions : These results suggest that MFE has an anti-inflammatory therapeutic potential, which may result from inhibition of NF-${\kappa}B$ activation and MAPK phosphorylation, thereby decreasing the expression of pro-inflammatory genes.
Objectives : Jema-sunghyangjungkisan (JSGS, Jima Xingxiang Zhengqi san) and yeoldahanso-tang (YDHST, Reduo hanshao decoction) are traditional herbal formulas which commonly used to prevent and treat stroke in traditional korean medicine. However, JSGS and YDHST extracts have not been previously reported to have anti-inflammatory effects. Therefore, We measured the anti-inflammatory effects of JSGS and YDHST extracts on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated murine macrophage cell line, RAW 264.7 cells. Methods : To investigate the anti-inflammatory activities of JSGS and YDHST extracts, tumor necrosis factor-alpha ($TNF-{\alpha}$), interleukin (IL)-6, nitric oxide (NO) and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) were examined in RAW 264.7 cells with LPS of $1{\mu}g/m{\ell}$. Results : JSGS and YDHST extracts did not have any cytotoxicity in RAW 264.7 cells. $TNF-{\alpha}$ concentration decreased 49.67% at $500{\mu}g/m{\ell}$ by JSGS but, YDHST has no statistically significant effect at all concentration. IL-6 accumulation on JSGS and YDHST extracts in LPS-stimulated RAW 264.7 cells reduced 22.03% and 41.44% at $500{\mu}g/m{\ell}$ respectively. In addition, JSGS has no inhibitory effects on NO accumulation and YDHST reduced 10.08% at $500{\mu}g/m{\ell}$. Moreover, JSGS and YDHST treatment does-dependently reduced the $PGE_2$ production. In particular, YDHST ($500{\mu}g/m{\ell}$) extract was more effective compared with $10ng/m{\ell}$ of indomethacin which is the $PGE_2$ positive control. Conclusions : Our results suggest that treatment of JSGS and YDHST extracts decreased the LPS-stimulated inflammation. Therefore, in the present study, we demonstrated that JSGS and YDHS may be used as a potential anti-inflammatory therapeutic agent.
Background: The objective of this study was to determine the effects of Daegangwhal-Tang (DGHT) hot aqueous extract on production of inflammatory mediators and antioxidants in RAW 264.7 macrophage. Methods: DGHT was extracted with water, filtered, concentrated and freeze-dried to perform. Cytotoxicity of DGHT extract was performed by MTT assay. Activated macrophages were treated with varying concentrations of DGHT extract (10, 50, 100 and $200{\mu}g/mL$), and nitric oxide (NO) and prostaglandin E2 ($PGE_2$) concentrations were measured to detect anti-oxidative effects. Interleukin-6 (IL-6), interleukin-1 beta ($IL-1{\beta}$) and tumor necrosis factor-alpha($TNF-{\alpha}$) concentrations were also measured to detect inflammatory responses to DGHT Results: Cytotoxicity of DGHT extract at concentrations of 10, 50, 100 and $200{\mu}g/mL$ were not observed. NO production was significantly decreased in the DGHT hot aqueous extract $200{\mu}g/mL$ concentration group. $PGE_2$, IL-6, $IL-1{\beta}$ and $TNF-{\alpha}$ production was significantly decreased in the DGHT hot aqueous extract 100 and $200{\mu}g/mL$ concentration groups. DGHT hot aqueous extract appeared to have DPPH free radical scavenging capability at all of concentrations, but did not exceed 50%. Conclusion: These results suggest that DGHT hot aqueous extract has concentration-dependent anti-inflammatory and anti-oxidative effect.
Objectives : Atotang was composed of 10 kinds of traditional medicinal herb. This research was performed to examine biological effects of Atotang for the development of prescription on atopic dermatitis. Methods : Atotang was extracted with 80% EtOH. Free radical scavenging assay has tested for anti-oxidative activity as well as the contents of total polyphenol. We observed the production of ROS, nitric oxide(NO) and the inflammatory cytokines such as interleukin-1beta(IL-${\beta}$), IL-6, tumor necrosis factor-alpha(TNF-${\alpha}$), Prostaglandin E2($PGE_2$) in Raw 264.7 cells stimulated by LPS. We used Disc diffusion method to investigate antibacterial activity on Candida albicans, Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermis. Result : Content of total phenolic compound of Atotang was 36.3 mg/g ext. DPPH and ABTS scavenging activities were 77% and 46% at 200 ug/ml respectively, showing dose-dependent increase. The amounts of ROS and NO in RAW 264.7 cells were decreased by 30% and 19% at 200 ug/ml, respectively, showing dose-dependent decrease. The prodcution of IL-1beta, IL-6 and TNF-alpha in RAW 264.7 cells were decreased dose-dependently by 81%, 67%, and 20% at 200 ug/ml, respectively. Atotang was reduced LPS-stimulated production of $PGE_2$ by 33%. Atotang on C. albicans, S. aureus and S. epidermis was selected by a disc diffusion method and inhibition effect of the Atotang on the growth of S. epidermis was the greatest. Conclusion : The results indicated that Atotang showed biological activities showing anti-oxidant, anti-inflammatory and antibacterial effects. Based on these results, it is concluded that Atotang can be applied to the prescription on atopic dermatitis.
Bioactive components of ultra-fine ground Saururus, the extraction yield increases when the leaves are ultra-fine ground. Comparison of normal-ground and ultra-fine ground Saururus chinensis leaves showed that the solid content and antiinflammatory activity of ultra-fine ground extracts was higher than that of normal-ground extracts. Lipopolysaccharide (LPS)-stimulated Raw 264.7 cells were treated with different concentrations of Saururus chinensis extract and the amount of nitric oxide (NO) was determined; LPS-treated cells produced 2 times more NO than cells that were not treated with LPS. Moreover, the NO production in cells treated with Saururus chinensis extract was inhibited in a concentration-dependent manner. Because the stimulant-induced NO production is regulated by the inducible nitric oxide synthase (iNOS), we measured the iNOS protein level to elucidate the mechanism by which the NO production was inhibited. We found that the amount of iNOS decreased dose-dependently. It was reduced by 53% at a Saururus chinensis extract concentration of $100{\mu}g/mL$. The protein expression of cyclooxygenase-2 (COX-2) in LPS-treated Raw 264.7 cells was inhibited by 31% at $100{\mu}g/mL$ of Saururus chinensis extract. Gel shift of the nuclear factor kappa B-DNA complex occurred in LPS-treated cells and the intensity of the band decreased gradually in a concentration-dependent manner. Ultra-fine ground Saururus chinensis extract had a concentration-dependent inhibitory effect on the production of prostaglandin $E_2$, tumor necrosis factor ${\alpha}$, interleukin $1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$), IL-6, and IL-8 in LPS-treated Raw 264.7 cells, i.e., at $50{\mu}g/mL$ of Saururus chinensis extract, their levels were decreased by 53, 67, 52, 37, and 21% respectively.
This study were designed to evaluate the anti-inflammatory effects of $genistein-4'-O-{\alpha}-L-rhamnopyranosyl-(1-2)-{\beta}-D-glucopyranoside$ (GRG) isolated from Sophora japonica (Leguminosae) on the lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide (NO) and prostaglandin ($PGE_2$) production by RAW 264.7 cell line. GRG significantly inhibited the LPS-induced NO and $PGE_2$ production. Consistent with these observations, GRG reduced the LPS-induced expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) at the protein and mRNA levels in a concentration-dependent manner. In addition, the release and the mRNA expression levels of tumor necrosis $factor-{\alpha}\;(TNF-{\alpha})$ and interleukin-6 (IL-6) were also reduced by GRG. Moreover, GRG attenuated the LPS-induced activation of nuclear factor-kappa B ($NF-{\kappa}B$), a transcription factor necessary for pro-inflammatory mediators, iNOS, COX-2, $TNF-{\alpha}$ and IL-6 expression. These results suggest that the down regulation of iNOS, COX-2, $TNF-{\alpha}$, and IL-6 expression by GRG are achieved by the downregulation of $NF-{\kappa}B$ activity, and that is also responsible for its anti-inflammatory effects.
Asterias amurensis (starfish) is a marine organism that is harmful to the fishing industry, but is also a potential source of functional materials. The present study was conducted to analyze the profiles of fatty acids extracted from A. amurensis tissues and their anti-inflammatory effects on RAW264.7 macrophage cells. In different tissues, the component ratios of saturated fatty acids, monounsaturated fatty acids, and polyunsaturated fatty acids differed; particularly, polyunsaturated fatty acids such as dihomo-gamma-linolenic acid (20:3n-6) and eicosapentaenoic acid (20:5n-3) were considerably different. In lipopolysaccharide-stimulated RAW264.7 cells, fatty acids from A. amurensis skin, gonads, and digestive glands exhibited anti-inflammatory activities by reducing nitric oxide production and inducing nitric oxide synthase gene expression. Asterias amurensis fatty acids effectively suppressed the expression of inflammatory cytokines such as tumor necrosis $factor-{\alpha}$, interleukin-$1{\beta}$, and interleukin-6 in lipopolysaccharide-stimulated cells. Cyclooxygenase-2 and prostaglandin $E_2$, which are critical inflammation biomarkers, were also significantly suppressed. Furthermore, A. amurensis fatty acids reduced the phosphorylation of nuclear $factor-{\kappa}B$ p-65, p38, extracellular signal-related kinase 1/2, and c-Jun N-terminal kinase, indicating that these fatty acids ameliorated inflammation through the nuclear $factor-{\kappa}B$ and mitogen-activated protein kinase pathways. These results provide insight into the anti-inflammatory mechanism of A. amurensis fatty acids on immune cells and suggest that the species is a potential source of anti-inflammatory molecules.
Menthae herba (MH) extracts exhibit anti-inflammatory effects. The purpose of this study was to determine whether the anti-inflammatory effects of MH extracts vary according to the cultivation regions. We performed a comparative analysis of MH extracts by evaluating the production of inflammatory mediators in RAW 264.7 murine macrophage cells and HaCaT human keratinocyte cells. MH extracts obtained from different cultivation regions in Korea and China significantly reduced the production of nitric oxide (NO), prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$), and tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) in RAW 264.7 cells stimulated with lipopolysaccharide (LPS). No differences in these inhibitory activities were observed between MH extracts. In HaCaT cells stimulated with TNF-${\alpha}$ and interferon-${\gamma}$ (IFN-${\gamma}$), MH extracts did not inhibit the production of macrophage-derived chemokine (MDC/CCL22), but most extracts reduced the production of the regulated on activation normal T-cell expression and secreted (RANTES/CCL5). We used clustering tree analysis of the MH extracts according to the chromatographic pattern and anti-inflammatory potency of MH extracts. We observed differences in the chromatographic pattern of MH extracts but no difference in anti-inflammatory potency. Our findings suggest that MH extracts from different regions do not show any differences in their pharmacological potency in that MH extracts are used as therapeutic agents to treat inflammatory disorders.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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