This study was designed to investigate the effects of ethyl acetate (EtOAc) fraction of pine (Pinus densiflora Sieb et Zucc) needle extract on membrane fluidity (MF), basal and induced oxygen radical (BOR and IOR), lipid peroxide(LPO) and oxidized protein (OP) as an oxidative stress, and lipofuscin(LF) in liver membranes of male Sprague-Dawley rats. Rats were fed basic diets (control) and experimental diets (EtOAc-25, EtOAc-50 and EtOAc-100) for 45days. MFs were significantly increased (about 10%) in mitochondria of EtOAc-100 group compared with control group. BOR and IOR formations in mitochondria were significantly inhibited (about 12∼18% and 9 ∼l2%, respectively) in EtOAc-50 and EtOAc-100 groups, while BOR and IOR formations in microsomes were significantly inhibited (about 9∼l3% and 18∼19%, respectively) compared with control group. LPO levels were significantly inhibited (about 10% and 12∼13%, respectively) in mitochondria of EtOAc-100 and microsomes of EtOAc-50 and EtOAc-100 groups, whereas OP levels were significantly inhibited (about 13∼14%) in mitochondria of EtOAc-50 and EtOAc.-100 groups compared with control group. LF formations were significantly inhibited (about 10∼14%) in these three EtOAc groups. These results suggest that ethyl acetate fraction of pine needle may play an effective role in attenuating an oxidative stress and increasing a membrane fluidity.
Cheong, Hyeonsook;Paudyal, Dilli Parasad;Jun, Jae Yeoul;Yeum, Cheol Ho;Yoon, Pyung Jin;Park, Chan Guk;Kim, Man Yoo;So, Insuk;Kim, Ki Whan;Choi, Seok
Molecules and Cells
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v.20
no.2
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pp.235-240
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2005
Extracts of pine needles (Pinus densiflora Sieb. et Zucc.) have diverse physiological and pharmacological actions. In this study we show that pine needle extract alters pacemaker currents in interstitial cells of Cajal (ICC) by modulating ATP-sensitive $K^+$ channels and that this effect is mediated by prostaglandins. In whole cell patches at $30^{\circ}C$, ICC generated spontaneous pacemaker potentials in the current clamp mode (I = 0), and inward currents (pacemaker currents) in the voltage clamp mode at a holding potential of -70 mV. Pine needle extract hyperpolarized the membrane potential, and in voltage clamp mode decreased both the frequency and amplitude of the pacemaker currents, and increased the resting currents in the outward direction. It also inhibited the pacemaker currents in a dose-dependent manner. Because the effects of pine needle extract on pacemaker currents were the same as those of pinacidil (an ATP-sensitive $K^+$ channel opener) we tested the effect of glibenclamide (an ATP-sensitive $K^+$ channels blocker) on ICC exposed to pine needle extract. The effects of pine needle extract on pacemaker currents were blocked by glibenclamide. To see whether production of prostaglandins (PGs) is involved in the inhibitory effect of pine needle extract on pacemaker currents, we tested the effects of naproxen, a non-selective cyclooxygenase (COX-1 and COX-2) inhibitor, and AH6809, a prostaglandin EP1 and EP2 receptor antagonist. Naproxen and AH6809 blocked the inhibitory effects of pine needle extract on ICC. These results indicate that pine needle extract inhibits the pacemaker currents of ICC by activating ATP-sensitive $K^+$ channels via the production of PGs.
Effect of AGI $({\alpha}-Glucosidase\;Inhibitor)-1120$, pine (Pinus densiflora) bark extract and Chaga mushroom (Inonotus obliquus) - and Chaga mushroom mycelium extracts on cellular $NF-{\kappa}B$ activation in malignant human keratinocytes (SCC-13) were evaluated to elucidate the possible correlation of $NF-{\kappa}B$ with antioxidant activity. The antioxidant activities of these natural products were examined in three different evaluation methods, i.e., lipid peroxidation value (POV) evaluation test, and 1,1diphenyl-2-picrylhydrazyl radical (DPPH) and nitric oxide (NO) scavenging test. In a cell-based $NF-{\kappa}B$ monitoring assay systern, all samples revealed the downregulatory profiles on the cellular $NF-{\kappa}B$ activity. AGI -1120 (1, 2 mg) and Chaga mushroom extract (0.05, 0.1 mg) downregulated the $NF-{\kappa}B$ activity in a dose-dependent manner. Chaga mushroom mycelium extract (5 mg) significantly inhibited the $NF-{\kappa}B$ activity (p<0.05). Although AGI-1120 and Chaga mushroom mycelium extract exhibited no antioxidant activities evaluated in pay, Chaga mushroom extract showed antioxidant in a dose-dependent manner at concentrations of $0.05{\sim}1$ mg. While AGI-1120 and Chaga mushroom extract possessed a relatively potential DPPH radical scavenging activity, the NO scavenging activity of Chaga mushroom extract $(SC_{50}:47\;{mu}g)$ was higher than the known antioxidant, vitamin C $(SC_{50}:77\;{mu}g)$. These results suggest that AGI-1120 and Chaga mushroom- and Chaga mushroom mycelium extracts may serve as an useful radical scavenging antioxidant agents with $NF-{\kappa}B$ inhibitory effect in human skin.
Pine trees (Pinus densiflora Sieb. et Zacc.) have been used as a traditional health-promoting medicinal food in Korea. This research was performed to determine the antioxidative and antibacterial activities, tyrosinase, nitric oxide synthesis, angiotensin converting enzyme (ACE), and xanthine oxidase inhibition effects of the pine bud ethanol extract (PBE). Antioxidative activities of PBE were measured by using 2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl (DPPH) free radical scavenging activity and superoxide dismutase-like activity (SODA). DPPH radical scavenging and SOD-like activities of PBE were remarkably increased in a dose-dependent manner, and were about 88.9% and 47.9% at 1 mg/ml and 10 mg/ml, respectively. The xanthine oxidase and angiotensin converting enzyme activities were inhibited about 71.9% and 60.8% at 1 mg/ml and $100{\mu}g/ml$ of PBE, respectively. The tyrosinase inhibitory activities of PBE were slightly increased in a dose-dependent manner. The PBE showed strong antimicrobial activities on Escherichia coli (E. coli) and Vibrio paraheamolyticus. Stimulation of the macrophages RAW264.7 cells with lipopolysaccharide (LPS) resulted in increased production of nitric oxide (NO) in the medium. However, NO synthesis was reduced up to 54% by addition of PBE at $200{\mu}g/ml$. These results revealed that pine buds have a strong antioxidative and anti-inflammatory activity, and exhibit angiotensin converting enzyme and xanthine oxidase inhibitory activities. This suggests that pine buds have the greatest property as a source for natural health products.
This study was conducted to discover new phytotoxins which may be used as lead molecules for the development of new herbicides. A total of 187 endophytic fungi were isolated from 11 plant species, which were collected from 8 locations in Korea. Their herbicidal activities were screened in vivo by herbicidal and duckweed bioassays after they were cultured in potato dextrose broth and rice solid media. Both fermentation broth and solid culture extract of Gliocladium catenulatum F0006 isolated from red pine (Pinus densiflora) showed 70% herbicidal activity only against cocklebur (Xanthium strumarium) out of the 10 weeds tested. Solid culture extract of F0034 isolated from arrowroot (Pueraria thunbergiana) exhibited 20 to 100% herbicidal activities against all of the weeds. Especially, shattercane (Sorghum bicolor), barnyardgrass (Echinochloa crus-galli), large crabgrass (Digitaria sanguinalis), and fall pauicum (Panicum dichtomiflorum) were sensitive to the solid culture extract of F0034. In addition, solid culture extract of F0043 isolated from red pine displayed 20% to 70% herbicidal activities only against 5 grass species, but not against 5 broad-leaf plant species. On the other hand, as the results of duckweed assay, 8 fermentation broths showed 100% growth inhibitory activity at concentrations less than 5.0% of culture supernatants and 12 solid cultures had a potent inhibitory activity against duckweed growth. A toxic metabolite was purified from the solid cultures of G. catenulatum F0006 by repeated column chromatography and bioassay. It caused a phytotoxic syndrome only on cocklebur out of the 10 weeds tested; it completely killed cocklebur seedlings at $500\;{\mu}g/ml$ and showed 85% herbicidal activity against cocklebur at $100\;{\mu}g/ml$. The molecular weight of the toxic metabolite is 238 daltons and its structure determination is underway.
Flavonoids in pine needles are known to be effective scavengers of free radical. Especially, proanthocyanidin, a kind of flavonoids possesses cardiovascular protection and antioxidative activities. Here, we evaluated proanthocyanidin contents in total polyphenolic compounds of pine needle extracts prepared by using hot water, ethanol, hexane or sub-supercritical $CO_2$. Analyses of total polyphenolic compounds and proanthocyanidin in each extracts indicated that hot water extract contained the highest concentrations, but sub-supercritical extract contained the lowest concentrations. On the other hand, evaluation of proanthocyanidin contents in total polyphenolic compounds in each extracts showed that sub-supercritical extract possessed the highest content, but hot water extract possessed the lowest content. These results indicate that extracts containing high concentrations of both total polyphenolic compounds and proanthocyanidin could be obtained by using hot water or ethanol extractions. Furthermore, extract containing high content of proanthocyanidin out of total polyphenolic compounds could be achieved by using sub-supercritical extraction. Measurement of antioxidative activities of extracts showed that hot water extract possessed the highest activity. In this study, we prepared extracts from pine needles by four different methods and evaluated the antioxidative compounds in extracts that could be used for effective components of functional food products.
Park, Ga-Young;Li, Hongxian;Hwang, In-Deok;Cheong, Hyeon-Sook
KSBB Journal
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v.21
no.5
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pp.376-383
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2006
Pine needle(Pinus densiflora sieb, et zucc) extract has been used to improve cardiovascular disorders, detoxification of nicotine, the infirmities of age and curing diseases of unidentified symptoms. It has various useful components including amino acids, vitamin C, terpenoids and chlorophyll. In this study we have identified 8 different yeast strains that are developed spontaneously causing self fermentation in the extract. The self-fermented pine extract(SFPE) inhibited the growth of some bacterial strains like E. coli, Bacillus subtilis and Staphylococcus aureus. The SFPE($0.2{\mu}{\ell}/ml{\sim}0.3{\mu}{\ell}/ml$) showed 90% NBT superoxide scavenging activities which is similar for all tested samples of different ages. The 7 years old SFPE(0.15 mg/ml and 0.3 mg/ml) caused relaxation of spontaneous contraction and relaxation rhythm of thoracic arterial tissues from rat. Therefore, SFPE has useful effects such as antibacterial, antioxidant and improved blood circulation and could be a good source of functional food development.
Osteoporosis is a disease involving a decrease in bone mineral density and an increased risk of fractures. The MC3T3-E1 pre-osteoblastic cell line is a well-accepted model of osteogenesis in vitro. Pine needles have long been used as a traditional health-promoting medicinal food in Korea. In this study, MTT assay, the alkaline phosphatase (ALP) activity and collagen synthesis of osteoblast cells were investigated to determine the effects of pine needle extracts on cell proliferation and differentiation. Pine needle extracts were prepared using hexane, ethanol and water. The effects of the pine needle extracts were examined by comparing the results with those of commercial agents, such as proanthocyanidin. The MC3T3-E1 cells exposed to proanthocyanidin showed increased proliferation in a concentration-dependent manner. The cells exposed to the hexane extract showed a similar increase in proliferation to that observed with proanthocyanidin. The hexane extract showed the highest ALP activity. Moreover, a supplement of pine needle extracts induced collagen synthesis in MC3T3-E1 cells. The pine needle extract produced the highest level of collagen synthesis at concentrations of $10{\sim}50\;{\mu}g/ml$. These results indicate that pine needle extracts have an anabolic effect on bone by promoting osteoblastic differentiation, and may be used in the treatment of common metabolic bone diseases.
PineXol, extracted from Korean red pine bark, has beneficial effects, such as antioxidant, antiinflammatory, and antilipogenic activities in vitro. We tested the hypothesis that PineXol supplementation could have anti-obesity effects on mice fed a high-fat diet (HFD). Four-week-old male C57BL/6 mice were fed normal chow (18% kcal from fat) or a HFD (60% kcal from fat). HFD-fed animals were also subjected to PineXol treatment at a dose of 10 or 50 mg/kg body weight (BW) (PX10 or PX50, respectively) body weight. The body weight and body fat mass in the PX50 group were statistically lower than those in the HFD group (p < 0.05 and p < 0.001, respectively). The concentration of hepatic triglycerides, total cholesterol, and low-density lipoprotein cholesterol were reduced in the PX50 group compared with the HFD group (p < 0.01). Acetyl CoA carboxylase (p < 0.01), elongase of very long chain fatty acids 6 (p < 0.01), stearoyl CoA desaturase 1 (p < 0.05), microsomal triglyceride transfer protein (p < 0.01), and sterol regulatory element-binding protein 1 (p < 0.05) were significantly decreased in the PX50 group compared with that in the HFD group. In white adipose tissue, CCAAT-enhancer-binding protein alpha (p < 0.05), peroxisome proliferator-activated receptor gamma (p < 0.001), and perilipin (p < 0.01) were decreased in the PX50 group compared with those in the HFD group. Therefore, the current study implies the potential of PineXol for the prevention and/or amelioration of obesity, in part by inhibition of both hepatic lipid synthesis and adipogenesis in white adipose tissue.
Based on DPPH radical scavenging activity and lipid peroxidation inhibitory activity, the MeOH extracts of 139 crude drugs were screened in order to search for antioxidants. Among tested samples, the extracts from the seed of Nelumbo nucifera, the fruit of Terminalia chebula var. gangetia, the root of Salvia miltiorhiza, the fruit of Ziziphus jujuba var. innermis, the root bark of Paeonia moutan, the fruit of Rubus coreanus, the fruit of Zanthoxylum schinifolium, the lignum of Caesalpinia sappan, the leaf of Pinus densiflora, the rhizome of Alpinia officinarum, the fruit of Syzygium aromaticum, the ramulus and uncus of Uncaria rhynchophylla, the root bark of Lycium chinense, and the fruit of Alpinia katsumadai showed a relatively strong antioxidative activity. Furthermore, the BuOH fraction from the extract of N. nucifera showed a potent activity in each assay. The isolation of bioactive compounds has been carried out and will be reported in the next paper.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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