Chili pepper (Capsicum annuum L.) is an economically important horticultural crop in Korea; however, various diseases, including Phytophthora root rot, anthracnose, powdery mildew, Cucumber mosaic virus (CMV), Pepper mild mottle virus (PMMoV), and Pepper mottle virus (PepMoV), severely affect their productivity and quality. Therefore, pepper varieties with resistance to multiple diseases are highly desired. In this study, we developed 20 SNP type assays for three pepper populations using Fluidigm nanofluidic dynamic arrays. A total of 4,608 data points can be produced with a 192.24 dynamic array consisting of 192 samples and 24 SNP markers. The assays were converted from previously developed sequence-tagged-site (STS) markers and included markers for resistance to Phytophthora root rot (M3-2 and M3-3), anthracnose (CcR9, CA09g12180, CA09g19170, CA12g17210, and CA12g19240), powdery mildew (Ltr4.1-40344, Ltr4.2-56301, and Ltr4.2-585119), bacterial spot (Bs2), CMV (Cmr1-2), PMMoV (L4), and PepMoV (pvr1 and pvr2-123457), as well as for capsaicinoids content (qcap3.1-40134, qcap6.1-299931, qcap6.1-589160, qdhc2.1-1335057, and qdhc2.2-43829). In addition, 11 assays were validated through a comparison with the corresponding data of the STS markers. Furthermore, we successfully applied the assays to commercial $F_1$ cultivars and to our breeding lines. These 20 SNP type assays will be very useful for developing new superior pepper varieties with resistance to multiple diseases and a higher content of capsaicinoids for increased pungency.
Lee, Jang Ha;Hong, Jin Sung;Ju, Ho-Jong;Park, Duck Hwan
Korean Journal of Organic Agriculture
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v.23
no.1
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pp.123-131
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2015
In this study, viral disease samples were obtained between 2006 and 2010 from pepper fields in 11 major pepper-growing districts in Gangwon-do, and in 83 areas from other provinces, with the exception of Gyeongsangnam-do and Jeju island in Korea. In order to assess the type of infection, field surveys were conducted with regard to viral disease severity and virus type, based on typical symptoms on leaves. The means of single and mixed-virus infections were 46.6% and 48.0%, respectively, during those periods, suggesting that viruses are the agents that most severely decrease pepper production in field cultivation in Korea. In terms of single infection, Cucumber mosaic virus (CMV) was the most prevalent virus based on its disease severity ratings (34.8%). Next, Pepper mild mottle virus (PMMoV) and Pepper mottle virus (PepMoV) were shown to cause severe viral diseases in pepper, with disease severities of around 5-10%. On the other hand, Tomato spotted wilt virus (TSWV) occurs in a limited area in Chungcheongnam-do and Jeollanam-do. Thus, the viral disease caused by CMV, PMMoV, and PepMoV in pepper can be severe, and these virus types should remain considered critical reasons for decreased pepper production in field cultivation in Korea. In addition to single infection, mixed infections are frequently observed in collected pepper samples from all areas. The ratios of mixed infection were therefore studied to evaluate the disease severity of mixed infections and to define individual virus types. These data showed that different types of viruses were present, and CMV was the most abundant virus for mixed infection, as in the case of single infection. Among mixed infections, the highest disease severity was seen with CMV+Broad beam wilt virus 2 (BBWV2), followed by other types of mixed infection such as CMV+PepMoV and CMV+PMMoV. However, further work is needed to reduce the severe damage caused by viruses and to assess mixed infection types involving three or more viruses.
We immunized BALB/c mice with purified Cucumber green mottle mosaic virus isolate HY1 (CGMMV-HY1). Through the selection of positive clones that were grown on the HAT medium, four sensitive monoclonal clones (CG99-01, CG99-02, CG99-03, and CG99-04) were selected from 500 Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase positive hybridoma cells. Four sensitive clones of CGMMV-HYI were determined as IgM type of the subclass of mouse immunoglobulins Ig group. The titer of monoclonal antiserum against CGMMVHY1 was estimated 1:12,800 by the indirect ELISA. Although monoclonal antibodies (MAbs) from CG99-01 and from CG99-04 cross-reacted with Zucchini green mottle mosaic virus and Kyuri green mottle mosaic virus, MAb from the cell line CG99-03 was highly specific to CGMMV. No MAbs cross-reacted with Cucumber mosaic virus-Fny. Only CG99-04 reacted with Pepper mild mottle virus weakly and CG99-02 reacted with both CGMMV and KGMMV. CGMMV was detected from the rind of watermelon fruit by DAS-ELISA of CGMMV-HY1, but not from the flesh of watermelon. Average seed transmission rate of CGMMV in watermelon was $24\%$ from symptomatic watermelon collected from 5 regions of Gyeongnam province. CGMMV was detected by DAS-ELISA with specific MAb of CGMMVHY1 periodically from root stock, during the sequential process for nursery seedling in Haman. Necrotic spots on cotyledons of root stock seedling progressed to reveal the typical symptomatology on the primary leaves of scion upon grafting. Here, we have established MAb based ELISA system, which could accurately detect CGMMV from watermelon seeds, nursery seedlings, transplants and field samples from greenhouse or open out door field as well.
Incidence of virus diseases in red pepper of open field in Yeongyang-Gun, Gyeongbuk Province was investigated by reverse transcription-polymerase chain reaction in 2012-2016. The infection rate of Cucumber mosaic virus (CMV), Broad bean wilt virus 2 (BBWV2), Pepper mottle virus, Potato virus Y, Pepper mild mottle virus and Tomato spotted wilt virus was 46.1%, 41.5%, 2.0%, 2.0%, 4.4% and 0.1% respectively. Incidence rate of single and mixed infection was 31.2% and 62.6%. Most of single infections were CMV and BBWV2. Among mixed infections, the incidence rate of CMV+BBWV2 mixed infection was the highest as 49.3% and most of mixed infections of triplex and tetraplex included CMV+BBWV2 mixed infection. CMV single infection caused mosaic, chlorosis, yellowing and vein necrosis and BBWV2 single infection induced cholosis and mosaic. CMV+BBWV2 mixed infection caused severe mosaic with chlorosis or malformation.
Kim, Joung-Soo;Kim, Jae-Hyun;Choi, Gug-Seoun;Chae, Soo-Young;Kim, Hyun-Ran;Joung, Bong-Nam;Choi, Yong-Mun
Research in Plant Disease
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v.9
no.2
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pp.89-93
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2003
An isolate of Tobacco mosaic virus (TMV) was isolated from potato cultivar ‘Chubak’ showing vein clearing and mild mosaic at Namhae in Korea. This isolate, TMV-St, was differentiated from other tobamoviruses based on biological properties, serological relationships and nucleotide sequence analyses of coat protein genes. TMV-St caused typical symptoms on four indicator plants as compared to the tobamovirus of TMV-U1, Pepper mild mottle virus (PMMoV), and Tomato mosaic virus (ToMV), which caused economic losses in Solanaceous vegetables, tomato, pepper, and eggplant. Remarkably, the TMV-St induced distinctly different symptom of systemic chlorotic spots on Chenophodium murale. On C. murale, Gomphorena globosa, and Nic-otiana rustica, the four viruses were classed by the virulence of systemic or local infections. In serological test TMV-St antiserum showed a precipitation line with each other tabamovirus. The CP gene of TMV-St contain 477 nucleotides, and the nucleotides sequence was the most similar to that of TMV-U1.
Incidence of tobamovirus diseases was 100% at late growth stage of green pepper on hydroponic systems in plastic house. Infection frequency of the diseases showed 34% of Pepper mild mottle virus (PMMoV), 41.5% of Tobacco mild green mottle virus (TMGMV), and 24.5% of the co-infected viruses. The two viruses specifically reacted in DAS-ELISA prepared with each polyclonal antibody. A total of 77 pure tobamovirus isolates obtained from the crops was tested for pathotype determination. The isolation frequency of tobamovirus pathotype $P_{0}$ and $P_{1,2}$ was 61 % and 39%, respectively. All TMGMV isolates belonged to the pathotype $P_{0}$. In restriction enzyme analysis of the cDNAs synthesized with coat protein gene of PMMoV pathotype $P_{0}$ and $P_{1,2}$, the former had two TaqI sites but the later had one.one.
This experiment was attempted to investigate a cause of the scion death in green pepper grafting system. A tobamovirus particle examined in the rootstock of the sample but not in the scion showing necrosis. The virus isolated from the rootstock was identified as Pepper mild mottle virus (PMMoV), pepper tobamovirus pathotype P1.2. (PMMoV-2), by nucleotide sequence analysis and host plant reaction. The virus isolate infected systematically in 6 commercial rootstock varieties using for green pepper grafting seedling production. Green pepper varieties 'Long green mart' and 'Daechan' represented resistance to the virus showing local lesions only on the inoculated leaves and 'Manitda' was systematically infected. In the experiment with grafting 'Long green mart' or 'Daechan' onto the those rootstocks, the upper leaves of the scions first showed vein necrosis and wilt symptoms 7 days after inoculation with PMMoV-2 on the cotyledon of the rootstock, following to the scion stem necrosis and then only the scion death. The virus was detected in the rootstock but not in the scion. However, 'Manitda' of susceptible variety in the grafting system showed mottle symptom on the leaves of the scion but not necrosis on the plant. PMMoV-3 isolate, pepper tobamovirus pathotype P1.2.3, did not cause the scion death in the grafting system. All of the varieties were susceptible to PMMoV-3. These results suggest that the scion death is caused by infecting with pepper tobamovirus pathotype P1.2. in the green pepper grafting system combined with the susceptible rootstock and the resistance scion to the virus pathotype.
Kil, HyungBae;Kang, Minji;Choi, Won-Seok;Kim, Joong-Il;Phan, Mi Sa Vo;Im, JiHui;Kim, MeeKyoung;Park, Mi-Ri
Research in Plant Disease
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v.24
no.2
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pp.145-152
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2018
During 2015-2017, we surveyed the incidence of viral infections of tomato and paprika growing in greenhouses in Cherwon province, Korea. In 2015 and 2016, we collected leaves and fruits from tomato and paprika plants growing in greenhouses. We detected viruses in the samples collected using specific primer sets for Broad bean wilt virus 2 (BBWV2), Cucumber mosaic virus (CMV), Pepper mild mottle virus (PMMoV), Pepper mottle mosaic virus (PepMoV), and Tomato spotted wilt virus (TSWV). We detected PMMoV, CMV, and TSWV in the samples, and CMV and TSWV were the most prevalent. For the prevention of future viral diseases, we then surveyed the routes of infection by these viruses in tomato and paprika plants growing in greenhouses in Cherwon province in 2017. Leaf and fruit samples were collected from seedlings and crops two and four months after transplanting into greenhouses. As a result, we found that TSWV was transferred from seedlings to plants, and outbreaks of the virus occurred at the early stage of cultivation. On the other hand, we found that CMV was a virus indigenous to the soil of some towns in Cherwon province, and thus outbreaks of this virus occurred at the middle stage of cultivation.
Field surveys to investigate the incidence and occurrence pattern of viruses in red pepper were conducted during 2015-2016 in Korea. A total of 424 samples in 2015 and 368 samples in 2016 were collected based on selection of plants showing symptoms from farmer's field from every June to September. Reverse transcription-Polymerase chain reaction was used to test all samples for the presence of one or more of following viruses: Cucumber mosaic virus (CMV), Broad bean wilt virus 2 (BBWV2), Tomato spotted wilt virus (TSWV), Beet western yellows virus (BWYV), Pepper mottle virus (PepMoV), Potato virus Y (PVY) and Pepper mild mottle virus (PMMoV). The average disease incidence was 91.7% in 2015 and 98% in 2016 and the all seven viruses were found although there were different kinds of regions. The percent virus incidence in collected samples during 2015 was as follows: CMV, 73.8%; BBWV2, 68.3%; BWYV, 46.9%; PMMoV, 14.6%; TSWV, 12.7%; PepMoV, 6.6% and PVY, 3.3%. For 2016, incidence was as follows: CMV, 73.3%; BBWV2, 71.4%; BWYV, 34.7%; TSWV, 27.9%, PMMoV, 19.2%; PepMoV, 13.5% and PVY, 3.5%. Mixed infections were prevalent over single infections and infection rate was 83% and 86.7% in 2015 and 2016, respectively.
Among the plant specimens requested from agricultural actual places of farmers, Agency of agricultural extension services and so forth for the diagnosis of plant virus diseases in 2009, the rate of crop types was 87.5% for vegetables, 4.0% for upland crops and 3.5% for orchids. In vegetables, the crops damaged severely by viral diseases were red pepper and tomato by the infection rate of 51.6% and 26.5%, orderly. Virus species occurring vegetables were 19 and the economically important viruses were Cucumber mosaic virus (CMV), Tomato spotted wilt virus (TSWV), Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV), Pepper mild mottle virus (PMMoV) with the infection rate of 33.2%, 16.9%, 16.1% and 7.4%, respectively. Rice stripe virus (RSV) occurred at the whole areas of west coast in Korea in 2009, and its incidence was 14.2% mainly on the susceptible cultivars and yield loss was estimated up to 50%. TYLCV was spread at 34 areas of Si and/or Gun, 22 areas in 2009 and 12 in 2008. Distribution of TSWV was expanded newly in 6 areas of Si and/or Gun including Gangryung, Gangwondo in 2009, and its occurrence areas were 23 Si and/or Gun after first incidence at Anyang area in 2004. Tomato bushy stunt virus (TBSV) was incited newly at Gimcheon area in 2009 with the infection rate of 65.2%, and its soil transmission rate was 55.0% in average.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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