에드워드병은 양식넙치에 있어 치료가 어렵고, 모든 성장 단계에서 지속적으로 장기간에 걸쳐 어체 내에 존재하면서 대량 폐사까지 이어지는 경우가 많다. 본 논문에서는 의사결정 나무 기법을 이용하여 발병한 양식넙치의 다양한 증상 데이터를 기반으로 전체 수온 구간 및 저수온, 저-고수온, 고수온, 고-저수온 구간으로 나누어 에드워드병의 증상 패턴을 분석하였다. 실험을 통해 분석된 의사결정 나무의 증상 패턴에는 간 결절을 비롯하여 간 출혈, 간 조직 변성 등 간의 증상이 에드워드병의 판별 기준으로 선택되었다. 선택된 증상은 에드워드병의 주요한 증상으로 알려진 것이며, 분석된 결과가 에드워드병의 증상 패턴을 성공적으로 찾아주고 있음을 수산질병전문가의 자문을 통해 확인하였다.
경북 울진 지역에서 채집된 양식 강도다리와 충남 태안 및 부산 지역 넙치 시료로부터 분리한 MABV에 대한 유전자 비교를 위해 VP2-NSPhylogenetic VP3 region (432 bp)을 phylogenetic 분석에 이용했다. Sequence 확인 결과 MABV (08-KU)는 일본 방어에서 최초 분리 보고된 YTAV와 98%의 nucleotide 유사성이 나타났으며, 이전 보고된 다 른 여러 strain들과는 76%이상 유사한 것으로 확인되었다. 그리고 MABV (06-KP)와 MABV (08-KC)도 YTAV와 97-98%의 높은 sequence 유사성을 보였다. 또한 다양한 MABV strain들과의 비교를 위해 충남태안 및 부산지역 넙치 시료에서 분리한 MABV (08-KC)와 MABV (06-KP)에 대한 phylogenetic 분석도 실시하였다. 그 결과 분석에 사용된 MABV (08-KU0, MABV (06-KP), MABV (08-KC)는 모두 일본 방어에서 분리된 MABV Y6와 동일한 genogroup VII에 포함 되었다.
Effects of medicinal herb extract on nonspecific immune responses, hematology and disease resistance against Edwardsiella tarda in olive flounder, Paralichthys olivaceus were evaluated. Wormwood, Artemisia asiatica NAKAI and barrenwort, Epimedium koreanum NAKAI were mixed at a ratio of 7 : 3 (w/w) for 2-herbs extract and wormwood, barrenwort, Korean forsythia, Forsythia koreana NAKAI, chrysanthemum, Chrysanthemum zawadskii var. latilobum KITAMURA, peppermint, Mentha arvensis L. var, piperascens MALINV., great burnet, Snaguisorba afficinalis L., Lizard tail. Saururus chinensis BAILL., mulberry, Morus alba L., and star anise, Illicium varum HOOK, f, at the same weight for 9-herbs extract. Two-herbs of 9-herbs extract were prepared by heating after adding 10㎖ of distilled water per g of the herb mixtures. Fish (10.3$\pm$2.5g) were fed the experimental diets supplemented with the 2-herbs or 9-herbs extract at the different concentrations of 0%, 0.1%, 0.5% and 1% per kg diet for 12 weeks. Lysozyme and bactericidal activities of serum, and hematological characteristics were examined during experimental period. After feeding test period, all experimental groups were challenged with E. tarda. Lysozyme activity from the fish fed the diet supplemented with 0.1% or 0.5% of 2-herbs extract was significantly higher than the control. But there was no difference both in bactericidal activity and hematology among each group. Sixty seven % of relative percent survival values (RPS) in the group fed the diet supplemented with 0.1% of 2-herbs was higher than the other group and the control. These results suggest that supplenmentation of 0.1% of 2-herbs extract to a commercial diet may enhance disease resistance in olive flounder. Although both 0.1% and 0.5% 9-herbs extract did not improve non-specific immune reponses, they could enhance disease resistance of 53% RPS, respectively.
복합 생약재 열수추출물(6종 혼합)을 농도별 기간별로 사료에 흡습시켜 12주 동안 넙치에 급여 후 비특이적 면역 및 질병저항성에 대한 효과를 조사하였다. 복합 생약재 열수추출물의 첨가는 어류 성장에는 아무런 영향을 미치지 않았으며 혈액생화학적인, 결과도 넙치의 생리에는 아무런 영향을 미치지 않았다. 라이소자임 활성은 0.01%의 복합 생약재 열수추출물 농도로 흡습시킨 사료 그룹에서 라이소자임 활성이 증가됨을 알 수 있었다. 복합 생약재 열수추출물의 투여에 따른 넙치 장기의 병리조직에 영향이 없음을 알 수 있었다. 에드와드균의 인위감염에 의한 질병저항성은 0.01% 복합 생약재 열수추출물 농도에서 상대생존율이 높게 나타났다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 넙치에 복합 생약재 열수추출물을 투여시에는 어류의 비특이적 면역력 증강 및 질병 저항성 증강을 나타내는 것으로 사료되었다.
Kim, Seung Min;Jun, Lyu Jin;Lee, Da Won;Park, Hyun Kyung;Jeong, Hyun Do;Kim, Jong Sung;Jeong, Joon Bum
Fisheries and Aquatic Sciences
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제21권6호
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pp.17.1-17.7
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2018
This study investigated the trend in emaciation infection outbreak in olive flounder (Paralichthys olivaceus) of Jeju island, South Korea, during 2014-2015. A total of 900 fish were systematically examined by PCR method using the EM-F/EM-R primer set in April, May, September, November, and December 2014, and the infection rate was recorded. In 2015, the same examination was conducted in March, May, July, and October but with 660 fish. It was found that the infection rate was 18.3~71.6% in 2014, which increased to 16.3~90.3% in 2015. Furthermore, September and December in 2014 and March, July, and October in 2015 showed a relatively higher infection rate. According to the infection trend analysis, which depended on the sample size, the infection occurred in all of fish sizes in this study and 11~30 cm fish group showed the highest infection rate. Histological examination confirmed that the kidney areas of the emaciating infected olive flounder contained several spores of $4{\sim}9{\mu}m$, and in severe cases, the elimination and destruction of tissue were confirmed by PCR. Thus, an important portion of farmed olive flounders in the Jeju region suffers from emaciation disease. This epidemiological survey serves as a useful reference on the emaciation disease of cultured olive flounders in Jeju
This is the first report describing acute mass mortality occurred in juvenile olive flounder (Paralichthys olivaceus) caused by gas bubble disease (GBD). A total of 610 fish (average weight = 35 g), which were more than half of the fish acclimated at 17℃ in an aquarium, were killed within two days of acclimation. The dead and moribund fish showed excessively opened opercula and mouths, and occasionally, severe exophthalmia. Through microscopic observation, numerous gas emboli were found in the gills of the dead and live fish, while the fish were not infected with any microbial pathogens. The dissolved oxygen (DO) saturation level of the rearing water and seawater nearby the facility reached 145% and 286%, respectively, whereas other water quality parameters (such as salinity, pH, and chemical oxygen demand) were normal. The extreme saturation rate of seawater in the shore nearby seemed to be due to an enormous algal bloom that occurred there. Through molecular identification based on 18S rDNA sequences, the most dominant algal species was most closely related to Ulva californica (99.87% sequence identity) followed by U. prolifera, U. linza, and U. curvata (99.81%). Therefore, it can be concluded that supersaturated seawater due to mass algal bloom caused gas bubble disease in the olive flounder, leading to mass mortality. After technical adjustment, such as increased aeration, lowered water circulation rate, and inlet water filtration using micro-pore carbon filters, the DO level became normal, no further mortality occurred and the status of the fish was stabilized.
The purpose of this research was to investigate the bacterial flora of healthy olive flounder larvae (Paralichthys olivaceus) and live feeds (Rotifer spp. and Artemia spp.). The total bacteria counts were $9.2{\times}10^7$ and $1.2{\times}10^{10}cfu/g$ and Vibrio sp.(82.8%) was dominant in rotifers. The total bacteria counts were $3.8{\times}10^6$ and $9.2{\times}10^6cfu/g$ and Vibrio sp.(73.3%) was dominant in artemia. In olive flounder larvae, the total bacteria counts were $1.4{\times}10^6{\sim}8.3{\times}10^7cfu/g$ and V. harveyi (38.5%) was dominant. It might be potential marker of disease outbreak in olive flounder larvae.
This study was examined the microbiological adequacy of fish feed treated with high-dose irradiation (5 kGy). 125 flounder (Paralichthys olivaceus) were grouped into 5 and then the fishes were fed the following feeds for 28 days: (1)standard feed; (2)standard feed, inoculated with Edwardsiella tarda ($1{\times}10^8-1{\times}10^9CFU/g$ of feed); (3)standard feed, inoculated with Vibrio anguilarum ($1{\times}10^8-1{\times}10^9CFIT/g$ of feed); (4)standard feed, inoculated with Streptococcus faecalis ($1{\times}10^8-1{\times}10^9CFU/g$ of feed); (5)standard feed, inoculated with Edwardsiella tarda, Vibrio anguillarum and Streptococcus faecalis, and then irradiated the mixed feed to 5 kGy. The flounders feed the mixed diet with Edwardsiella tarda, Wbrio anguillarum or Streptococcus faecalis inoculated feed were showed severe cumulative mortalities of 60, 48 and 52% respectively. The gross and histological changes were observed on the fishes. However, fishs fed with the feed of bacteria inoculation before irradiation demonstrated excellent protection against the bacteria-related disease. The results from experiments with bacteria inoculated feed indicated that the irradiation methods employed were capable of preventing contamination of the fishs with pathogenic bacteria.
실험실에서 순환여과시스템으로 5-6개월 사육하던 넙치 치어에서 아가미의 심한 빈혈을 나타내는 질병이 발생하였다. 현미경관찰에서 아가미에서는 유충이, 입천정에서는 성숙한 성충이 관찰되었다. 성충의 체장은 5.60-9.32 mm이며 방추형 몸의 길이는 3.83-6.32 mm, 부착기는 방추형 몸에서 부터 연결된 isthmus의 끝부분에 꽃자루 모양으로 존재하였고 부착기의 끝에는 8개의 파악기가 있었다. 충의 형태학적 관찰로부터 단생류에 속하는 Neoheterobothirum hirame로 동정하였다. 감염어의 적혈구용적는 평균 10.3±2.8%로 정상 넙치의 31.4±4.2%보다 현저히 낮았다. 병리조직학적으로 N. hirame에 감염 된 넙치는 아가미 새판과 새엽을 흐르는 혈관내의 적혈구가 감소하고 비장의 적수(red pulp) 영역이 감소되고 간세포는 위축이 관찰되었다. 이상의 결과로부터 넙치에 심한 빈혈을 일으킨 원인은 N. hirame인 것을 밝혔다. 이 연구는 순환여과식 사육시스템에서는 사육수의 교환이 적으므로 소독장치가 충분하지 못할 경우 병원체의 증식이 문제가 될 수 있는 예를 보이고 있다.
Tenacibaculum maritimum (formerly Flexibacter maritimus)은 tenacibaculosis라 불리며, 해산어에서 궤양 및 괴사성 증상을 나타내는 질병원인체 이다. Tenacibaculosis는 다양한 양식 어종에서 있어서 경제적 측면에서도 중요한 질병 중 하나이며, 피부, 입, 지느러미, 꼬리 등과 같은 어체 표면에 심각한 궤양과 괴사로 인한 손상을 유발시 킨다. 본 연구에서는 tenacibaculosis의 증상을 나타내는 넙치 병어로부터 A-7 균주를 분리하였고, 형태학적 특성, 생화학적 성상 및 유전자 분석 결과를 바탕으로 T. maritimum으로 동정하였으며, 침지법을 통하여 넙치에 인위적으로 감염되는 것을 확인하였다. Tenacibaculosis를 제어하기 위해 약욕에 의한 항생제 투여가 많이 이루어지며, 그 중 oxytetracycline이 주로 사용되고있다. 그러나, 대부분의 양식어민과 소비자들은항생제 잔류와 환경오염 등의 문제를 우려하고있으며, 비싼 항생제의 사용으로 인하여 양식어의 생산 비용도 높아지고 있다. 이러한 문제점들을 극복하기 위하여 본 연구에서는 천연 자생식물 추출물을 항생제 대체제로 사용하기 위한 연구를 수행하였다. 총 35 종류의 천연식물의 항균 활성을 검색하였고, 많은 천연식물 추출물이 T. maritimum에 대하여 높은 항균 효과를 나타낸다는 것을 밝혔다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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