Among 27 Bacillus sp. isolated from Meju, a traditional Korean soybean fermented food, a strain MJ-226 was selected due to its strong fibrinolytic activity, and it was identified to be Bacillus subtilis MJ-226 according to morphological and biochemical characterization and sugar utilization. The fibrinolytic enzyme of B. subtilis MJ-226 was maximally produced by cultivating in the Tryptic Soy Broth (TSB) for 24~26 h at $37^{\circ}C$, and the enzymes activity was promoted with adding glucose, fructose, peptone or yeast extract to TSB. The fibrinolytic enzyme was stable at the range of pH from 6.0 to 8.0, and between 35 and $40^{\circ}C$. Also, when the crude enzyme was exposed to various metal ions and chemical inhibitors for 12 h, the enzyme stability was maintained by $MnSO_4$, $CaCl_2$, KCl, and NaCl. However, the stability was destroyed by treatment with $CuSO_4$, $MgSO_4$, $ZnSO_4$, $FeSO_4$, and $BaCl_2$, and the enzyme was unstable in the presence of chemical inhibitors such as iodoacetic acid, leupeptin, phenylmethanesulphonyl fluoride (PMSF), sodium dodecyl sulfate (SDS), thiourea, trans-1,2-diaminocyclohexane-N,N,N',N'-tetraacetic acid (CDTA) and ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA).
Recently, it has been known that Hericium erinaceum is a one of the very useful functional materials with great attention in mushroom processing industry. In present study, a liquid culture which was not studied systematically until now, was conducted as a method of cultivation for H. erinaceum, and also examined the characteristics of the liquid culture and conditions of process optimization. A good basal medium was selected through the cultivation of 16 species mushroom media and the optimum condition for medium and cultivation were chosen by response surface method. From these results, the optimum condition of medium for mushroom was 3% glucose, 0.2% yeast extract/peptone(1:1) and 0.1% $KH_2PO_4/MgSO_4$(1:1) and also the optimal culture condition was obtained at inoculum of 13.42%, temperature of $22.3^{\circ}C$ and pH of 5.7. The mycelial dry weight of 9 g/I was obtained under these conditions and this amount was about 1.7 times higher than that which were cultivated in basal medium for 8 days.
Kim, Ok-Ju;Lee, Dong-Geun;Lee, Sung-Mok;Lee, Suck-June;Do, Hyung-Joo;Park, Hye-Jin;Kim, Andre;Lee, Jae-Hwa;Ha, Jong-Myung
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.38
no.2
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pp.144-150
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2010
This study was aimed to screen bacteria of high alginate-degrading activity, to select the nitrogen source and concentration of NaCl and sodium alginate for the production of alginate-degrading enzyme, and to determine reaction conditions of enzyme. A novel alginate-degrading bacterium was isolated from abalone (Haliotis discus hannai) and named Methylobacterium sp. HJM27 by 16S rDNA sequence analysis. The optimum culture conditions for the production of alginate-degrading enzyme were 1.0% sodium alginate, 0.5% peptone, 0.3% yeast extract, 1.5% NaCl, $25^{\circ}C$ and 48 hours incubation time. The raw enzyme showed the highest activity at $25^{\circ}C$ and pH 9, and produced 1.217 g - reducing sugar per liter in 0.8% (w/v) sodium alginate for 30 minutes. Methylobacterium sp. HJM27 and its alginate-degrading enzyme would be useful for the production of bioenergy and biofunctional oligosaccharides from seaweed.
A rapid assay to determine respiration inhibition of Saccharomyces cerevisiae by chemicals was developed. S. cerevisiae was harvested with two different liquid media, yeast extract-peptone-dextrose (YPD) medium capable of occurring both glucose fermentation and mitochondrial respiration, and non-fermentable carbon-yeast extract (NFY) medium capable of occurring respiration only Wells in 96-well plate were loaded with each cell suspension and various concentrations of 46 fungicides with various modes of action. n NFY medium, the non-fermentable carbon source, ethanol (NFY-E medium), glycerol (NFY-G medium) or lactate (NFY-L medium), was used. After incubation for $1{\sim}3$ days, minimum inhibitory concentrations (MICs) of the chemicals were recorded in the media. Of the 46 inhibitors employed in this study, four inhibitors of fungal respiration by blockage of electron flux in the mitochondrial respiratory chain, azoxystrobin, kresoxim-methyl, metominostrobin, and trifloxystrobin, exhibited strong antifungal activity in all of NFY media, but no activity in YPD medium. In contrast to this, five N-trihalomethylthio fungicides showed much stronger antifungal activities in YPD medium than three NFY media. Eleven fungicides inhibited growth of S. cerevisiae in all media and the other 26 fungicides showed no antifungal activity in all media. Thus, our rapid and efficient in vitro method can be considered as an alternative assay system for respiration inhibitor.
The optimum production condition for the antibiotic from Bacillus thuringiensis BK4 was determined, and the suppression rate of Fusarium-wilt by the butanol-extracted antibiotic was verified by employing tomatoes in vitro and in vivo pot tests. Cell growth and antifungal activity were the best when 0.5% xylose and 0.2% peptone No.3 were given as carbon and nitrogen sources, respectively, in the presence of 5mM $CaCl_2$. The partially purified antibiotic successfully prevented Fusarium oxysporum pathogen in pot experiments. When the pots were treated with both live cells and the partially purified antibiotic, an additive-effect was seen in the suppression of Fusarium-wilt, but synergistic effect was not detected. The antibiotic, denoted BK4, purified by Sephadex LH-20 column chromatography was eluted with a single peak at a retention time of 38 min. on prep-HPLC; Minimum inhibition concentration of the homogenous antibiotic was determined to be 50${\mu}$g/ml.
Park, Seok-Kyu;Cho, Young-Su;Shon, Mi-Yae;Gal, Sang-Wan;Lee, Sang-Won
Food Science and Preservation
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v.14
no.2
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pp.194-200
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2007
In order to enhance the functionality and storage period of traditional fermented foods, the strain CH-14, which To enhance the quality of traditional fermented foods, and to lengthen acceptable storage periods, a bacterial strain, CH-14, showing potent enzyme activities and antibacterial capabilities, was isolated and characterize4 The bacterium wn Gram-positive, catalase-positive, oxidase-negative, formed endospores, expressed flagella, was rod-shaped, and had dimensions of 0.5 0.7m and 3.5 4.2m. The bacterium CH-14 was identified as Bacillus subtilis using Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, Bergey's Manual of Determinative Bacteriology, and an API 50 CHL Carbohydrate Test Kit. An optimum growth medium contained 2% (w/v) cellobiose as a carbon source, a mixture of 0.5% (w/v) yeast extract and 0.5% (w/v) peptone as nitrogen sources, and 0.05% (w/v) $MgSO_4{\cdot}7H_2O$. The optimal culture temperature and the optimal initial pH were in the ranges of 30 $45^{\circ}C$ and 4.5 10.0, respectively. Maximum production of the antibacterial substance occurred after 24h of culture. The minimum inhibitory concentrations of the antibacterial substance were 5mg bacterial dry weight/mL against E. coli and P. mirabilis, and 10 mg/mL against S. aureus, S. enteritidis and V. parahaemolyticus.
The goal of this study was to characterize unrecorded wild yeasts from soils of spices plants fields and further, to elucidate its anti-demential activities and tyrosinase inhibitory activity. Piskurozyma taiwanensis R4-1 (NIBRFGC000502619), Nadsonia starkeyi-henricii R6-2 (NIBRFGC000502618), and Canadida friedrichii M12-6 (NIBRFGC000502615) isolated from soil of garlic field represented newly recorded yeast strains in Korea. Vishniacozyma peneaus I2-9 (NIBRFGC000502617) and Cryptococcus aspenensis I21-1 (NIBRFGC000502616) from soil of ginger field represented also newly recorded yeast strains, and microbiological characteristics of its fifteen yeast strains were investigated. All of these unrecorded yeasts exhibited oval-global shape and have ascospores except Canadida friedrichii M12-6. Piskurozyma taiwanensis R4-1 and Canadida friedrichii M12-6 grew well in vitamin-free medium, and Piskurozyma taiwanensis R4-1 was halotolent growing in 10% NaCl-containing yeast extract peptone dextrose (YPD) broth. After prepared cell-free of the unrecorded wild yeasts, acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BChE) inhibitory activities as anti-dementia activity and tyrosinase inhibitory activity as whitening activity were determined. Cell-free extract from Canadida friedrichii M12-6 had the highest tyrosinase inhibitory activity of 14.4%.
Zaliha Raja Noor;Rahman Raja Abdul;Baharum Syarul Nataqain;Salleh Abu Bakar;Basri Mahiran
Journal of Microbiology
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v.44
no.6
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pp.583-590
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2006
In this study, an organic solvent tolerant bacterial strain was isolated. This strain was identified as Pseudomonas sp. strain S5, and was shown to degrade BTEX (Benzene, Toluene, Ethyl-Benzene, and Xylene). Strain S5 generates an organic solvent-tolerant lipase in the late logarithmic phase of growth. Maximum lipase production was exhibited when peptone was utilized as the sole nitrogen source. Addition of any of the selected carbon sources to the medium resulted in a significant reduction of enzyme production. Lower lipase generation was noted when an inorganic nitrogen source was used as the sole nitrogen source. This bacterium hydrolyzed all tested triglycerides and the highest levels of pro-duction were observed when olive oil was used as a natural triglyceride. Basal medium containing Tween 60 enhanced lipase production to the most significant degree. The absence of magnesium ions ($Mg^{2+}$) in the basal medium was also shown to stimulate lipase production. Meanwhile, an alkaline earth metal ion, $Na^+$, was found to stimulate the production of S5 lipase.
Vegetative growth of four different strains of Hericium erinaceus was observed. The temperature suitable for optimal mycelial growth was determined to be $25^{\circ}C$, with growth observed in the extend temperature range of $20{\sim}30^{\circ}C$. The different strains of this mushroom showed distinct pH requirements for their optimum vegetative growth, with the most favorable growth observed at pH 6. Considering vegetative mycelial growth, PDA, YM, Hennerberg, Hamada, and Glucose peptone were the most favorable media, and Czapek Dox, Hoppkins, Glucose tryptone, and Lilly were the most unfavorable media for these mushroom strains. With the exception of lactose, most of the carbon sources assayed demonstrated favorable vegetative growth of H. erinaceus. For mycelial growth, the most suitable nitrogen source was alanine and the most unsuitable was histidine. Oak sawdust medium supplemented with $10{\sim}20%$ rice bran was the best for mycelial growth of the mushroom.
An antagonistic bacterium Pseudomonas stutzeri YPL-1 liberated extracellular chitinase and $\beta$-1,3-glucanase which are key enzymes in the decomposition of fungal hyphal walls. The lytic enzymes caused abnormal swelling and retreating at the hyphal tips of plant pathogenic fungus Fusarium solani in a dual culture. Scanning electron microscopy revealed the hyphal degradation of F. solani in the regions interacting with P. stutzeri YPL-1. The production of chitinase and properties of a crude preparation of the enzyme from P. stutzeri YPL-1 were investigated. Peak of the chitinase activity was detected after 4 hr of cultivation. The enzyme had optimum temperature and pH of 50$^{\circ}C$ and pH 5.3, respectively. The enzyme was stable in the pH range of 3.5 to 6.0 up to 50$^{\circ}C$. The enzyme was significantly inhibited by metal compounds such as $HgCl_2$, but was stimulated by $CoCl_2$. P. stutzeri YPL-1 produced high levels of the enzyme after 84 hr of incubation. Among the tested carbon sources, chitin was the most effective for the enzyme production, at the concentration level of 3%. As a source of nitrogen, peptone was the best for the enzyme production, at the concentration level of 4%. The maximum amount of enzyme was produced by cultivating the bacterium at a medium of initial pH 6.8.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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