Edwardsiella tarda로 면역한 닭의 난황항체 (IgY) 정제 방법을 비교하였다. Anti-E. tarda IgY의 정제는 PEG법, chloroform-PEG법, ammonium sulfate법과 정제 kit를 사용한 4가지 다른 방법으로 실시하였다. 정제된 IgY는 64 kDa의 heavy chain과 27 kDa의 light chain을 나타내었다. E. tarda로 면역된 IgY는 면역되지 않은 대조 IgY 보다 높은 ELISA가와 응집항체가를 나타내었으며, 정제된 IgY는 western blotting에서 anti-E. tarda 토끼혈청과 유사한 E.tarda 단백질을 인식하였다. PEG법과 ammonium sulfate법에 의해 정제된 IgY는 응집항체가가 1:512, chloroform-PEG법과 정제 kit에 의해 정제된 IgY는 1:128을 나타내었으며, PEG법이 IgY를 정제하기 위한 가장 빠른 방법이었다. 이 연구의 결과로 PEG법이 IgY의 생물학적 활성을 유지함과 더불어 신속하고 효과적인 정제방법임을 알 수 있었다.
양말단에 아미노기가 결합된 일련의 bisamino-PEG($Jeffamine^{(R)}ED$)를 함유한 키토산 비드들을 알칼리 용액을 사용한 capillary extrusion method에 의해 제조하였다. 제조된 각각의 비드들에 대한 swelling kinetics를 조사한 결과, 키토산비드 내부에 PEG 사슬이 길어질수록 팽윤이 늦게 진행되었다. 또한 키토산 비드에 함유된 bisamino-PEG들의 방출현상을 정량적으로 알아 보기 위해 양말단의 1차 아민기에 fluorescamine을 결합시킨 후, UV spectra로 방출과정을 추적하였다. 실험결과 키토산 비드 내부에 있는 PEG 사슬이 길수록 방출시간은 $Jeffamine^{(R)}ED$-600 < $Jeffamine^{(R)}ED$-900 < $Jeffamine^{(R)}ED$-2001 순으로 지연되는 경향을 나타내었다. 이는 PEG 사슬이 길어질수록 키토산과의 수소결합에 의한 상호작용이 강화되고 그 결과 방출기간이 지연된 것으로 사료된다.
Lee, Won Chang;Lee, Sang Hee;Denora, Nunzio;Laquintana, Valentino;Lee, Byung Chul;Kim, Sang Eun
대한방사성의약품학회지
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제5권2호
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pp.89-100
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2019
In our previous studies, we developed a 18F-labeled TSPO-binding ligand, named [18F]CB251, which has been proved to be a promising TSPO-binding PET radiotracer for the detection and monitoring of TSPO expression in pathological diseases. (Ki = 0.27 nM for TSPO, 1.96% ID/g of tumor uptake at 1h post-injection) Based on these results, we utilized 6,8-dichloro-2-phenylimidazo[1,2-a]pyridineacetamide analogs, CB185 (1) as a targeting moiety for the selective delivery of probes and anticancer molecules to TSPO-overexpressed tissues. In this study, we designed CB185 derivatives contains different PEG chains (n = 1, 3 and 5) and fluorescence dye (Cy5) to identify the necessary space between a TSPO-binding ligand and an anticancer agent. Three CB185 derivatives (11a-c) which contains Cy5 and PEG chain, were synthesized and the effect of PEG additive on their TSPO-binding affinities were evaluated using in vitro assays. The binding affinity for compounds 11a-c was lower than that of PK11195 (Ki = 3.2 nM), but still characterized by nanomolar binding affinity for TSPO (Ki = 46.5 nM for 11a, 51.0 nM for 11b, and 388.5 nM for 11c). These results showed that the conjugates are characterized by a moderate binding affinity toward TSPO except for compound 11c, which PEG chain consist of five PEG monomers. Our finding might add useful information to decide the appropriate PET chain length for developing new TSPO-targeting drug carriers.
Park Hyung Dal;Bae Jin Woo;Park Ki Dong;Ooya Tooru;Yui Nobuhiko;Jang Jun-Hyeog;Han Dong Keun;Shin Jung-Woog
Macromolecular Research
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제14권1호
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pp.73-80
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2006
Sulfonated poly(ethylene glycol) (PEG-$SO_{3}$) grafted polyrotaxanes (PRx-PEG-$SO_{3}$) were prepared in order to utilize the unique properties of PEG-$SO_{3}$ and the supramolecular structure of PRx, in which PEG-$SO_{3}$ grafted $\alpha$-cyclodextrins ($\alpha$-CDs) were threaded onto PEG segments in a PEG-b-poly(propylene glycol) (PPG)-b-PEG triblock copolymer (Pluronic) chain capped with bulky end groups. Some of the PRx-PEG-$SO_{3}$ demonstrated a higher anticoagulant activity in case of PRx-PEG-$SO_{3}$ (P 105), and compared with the control they showed a lower fibrinogen adsorption in PRx-PEG-$SO_{3}$ (F68) and a higher binding affinity with fibroblast growth factor. The obtained results suggested that polyrotaxane incorporated with PEG-$SO_{3}$ may be applicable to the surface modification of clinically used polymers, especially for blood/cell compatible medical devices.
Kim, Koi-Ho;Jeong, See-Hwa;Takashi Hirano;Park, Soo-Nam
대한화장품학회지
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제25권1호
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pp.107-119
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1999
3 Kinds of PEG-hEGF conjugate, PEG5-hEGF, PEG5-hEGF, PEG10-hEGF, were synthesized. Major fractions containing 2 chains of PEG were separated by preparative GPC. Molecular weight was estimated by GPC-MALLS, TOF-Mass and SDS-PAGE, and the data were well corresponding to calculated one. The cell proliferation effect of the conjugates was evaluated, Indicating that the conjugate bound to longer chain PEG exhibits lower activity. Selective modification of hEGF and activity preservation of PEG-hEGF conjugate are undergoing.
Park, Ki-Dong;Park, Hyung-Dal;Lee, Hee-Jung;Kim, Young-Ha;Tooru Ooya;Nobuhiko Yui
Macromolecular Research
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제12권4호
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pp.342-351
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2004
Poly(ethylene glycol) (PEG1K) and sulfonated PEG (PEG1K-SO$_3$) methacrylate (MA) copolymers have been prepared and characterized. The structures of the synthesized copolymers were confirmed by $^1$H and $^{13}$ C NMR spectroscopy and elemental analysis. The bulk characteristics of the copolymers were evaluated by viscosity and thermal analysis. The surface properties of the copolymers were investigated using dynamic contact angle measurements and electron spectroscopy for chemical analysis. The hydrophilicity of the surfaces modified with PEG1KMA or PEG1K-SO$_3$MA increased, possibly as a result of the orientation of the hydrophilic PEG1KMA/PEG1K-SO$_3$MA chains into the water phase. Platelets adhered less to the surfaces of the copolymers than they did to a polyurethane control. In addition, adhesion of platelets to the copolymer surfaces decreased upon increasing the chain density of PEG1KMA and sulfonated PEG1KMA in the copolymers. Both bacterial adhesion and protein adsorption were significantly reduced on the copolymer surfaces and their levels differ depending on the kind of surface or media.
Poly($\varepsilon$-caprolactone)-poly(ethylene glycol)-poly($\varepsilon$-caprolactone) (PCL-PEG-PCL) multiblock copolymers at various hydrophobic-hydrophilic ratios were successfully synthesized by the chain extension of triblock copolymers through isocyanate (hexamethylene diisocyanate). Biodegradable films were prepared from the resulting multiblock copolymers using the casting method. The mechanical properties of the films were improved by chain extension of the triblock copolymers, whereas the films prepared by the triblock copolymers were weak and brittle. Atomic force microscopy (AFM) of the multiblock copolymer film showed that the hydrophilic PEG had segregated on the film surface. This is consistent with the observed contact angle of the films.
이산화탄소/프로필렌 옥사이드 공중합을 통하여 고분자 사슬 내에 친수성기와 소수성기가 공존하는 저분자량의 블록 공중 합체를 합성하였다. 고활성의 촉매를 사용한 이산화탄소/프로필렌 옥사이드 공중합 반응에 단말기로 -OH기를 갖는 폴리(에틸렌 글리콜)(PEG)을 분자량 조절제로 투입하여 블록 공중합체를 합성하였다. 단말기 한쪽 끝에만 -OH기를 갖는 폴리(에틸렌 글리콜)을 투입하였을 때는 PEG-block-PPC (폴리(프로필렌 카보네이트)) 다이블록 공중합체가 얻어지고, 단말기 양쪽 끝 모두 -OH기를 갖는 폴리(에틸렌 글리콜)을 투입하였을 때는 PPC-block-PEG-block-PPC 트리블록 공중합체가 얻어진다. 제조된 블록 공중합체는 $^1H$-NMR 스펙트럼을 통하여 구조 분석을 하였고 GPC를 통하여 분자량을 측정하였다.
Poly (γ-benzyl L-glutamate) (PBLG)와 말단에 아미노기를 갖는 Polyethylene glycol (PEG)의 치환반응을 행하여 PEG-grafted PBLG (PEG-g-PBLG)를 합성하였다. 또한 PEG-g-PBLG 필름표면에 ethanolamine(EA)을 치환반응하여 표면에 히드록시그룹을 갖는 PEG-g-PBLG-EA 필름을 얻었다. 폴리펩티드중합체와 혈액성분과의 상호작용에 관한 실험결과, PEG-g-PBLG 상에서의 혈소판의 점착율 및 형태변화는 PEG-g-PBLG-EA보다 적게 나타났고, PEG-g-PBLG상에서의 혈장 단백질의 응고시간은 PEG-g-PBLG-EA 또는 PBLG의 응고시간보다 길게 나타났다. 이들 결과는 혈액응고시간 및 혈액응고량을 조사한 실험결과와 일치하였다. 따라서 폴리펩티드상의 히드록시그룹은 혈액성분과의 상호작용을 강하게 하여 혈액적합성이 저하하는 반면, PEG-g-PBLG는 비교적 좋은 혈액적합성을 나타냄을 알 수 있었다.
Polyethylene glycol(PEG)법 또는 electroporation법으로 제라니움 원형질체에 neomycin phosphotransferase II(nptII) 유전자를 옮기고, 세포내에 도입된 nptII DNA의 존재유무와 발현여부를 조사하였다. Polymerase chain reaction(PCR)을 이용하여 검토한 결과, PEG법을 사용했을 때나 electroporation법을 사용했을 때 모두 세포내에 도입된 nptII DNA가 있음이 확인되었다. 또 이들 세포의 추출물을 전기영동하여 neomycin phosphotransferase 활성을 조사한 결과, 효소활성을 보이는 band가 검출되어 marker gene 으로 도입된 notII 유전자가 세포내에서 발현된다는 것이 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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