Cryptococcus neoformans is a basidiomycete human fungal pathogen that causes meningoencephalitis in both immunocompromised and immunocompetent individuals. The ability to sense and respond to diverse extracellular signals is essential for the pathogen to infect and cause disease in the host. Four major stress-activated signaling (SAS) pathways have been characterized in C. neoformans, including the HOG (high osmolarity glycerol response), PKC/Mpk1 MAPK (mitogen-activated protein kinase), calcium-dependent calcineurin, and RAS signaling pathways. The HOG pathway in C. neoformans not only controls responses to diverse environmental stresses, including osmotic shock, UV irradiation, oxidative stress, heavy metal stress, antifungal drugs, toxic metabolites, and high temperature, but also regulates ergosterol biosynthesis. The PKC(protein kinase C)/Mpk1 pathway in C. neoformans is involved in a variety of stress responses, including osmotic, oxidative, and nitrosative stresses and breaches of cell wall integrity. The $Ca^{2+}$/calmodulin- and Ras-signaling pathways also play critical roles in adaptation to certain environmental stresses, such as high temperature and sexual differentiation. Perturbation of the SAS pathways not only impairs the ability of C. neoformans to resist a variety of environmental stresses during host infection, but also affects production of virulence factors, such as capsule and melanin. A drug(s) capable of targeting signaling components of the SAS pathway will be effective for treatment of cryptococcosis.
이 논문은 한발저항성이 다른 6개 보리 품종의 한발에 따른 생장, 잎의 수분포텐셜(leaf water potential, LWP), 상대함수량(leaf relative water content, RWC), 삼투압(leaf osmotic potential, OP), 삼투조정(osmotic adjustment, OA), 팽압(leaf turgor pressure, LTP), 순광합섬, 기공전도도, 엽육전도도, 엽록소형광 등의 변화를 조사하여 비교한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1 한발 처리시 토양수분포텐셜은 -0.05㎫이었고. 종료시에는 -0.29㎫로 저하하였다. Dicktoo-S 동보리 1호, Dicktoo-L, Dicktoo-T, 수원쌀보리 365호, 탑골보리 품종의 한발처리구 건물중은 각각 대조구(처리기간종 -0.05㎫ 유지)에 비하여 68%, 69%, 70%, 86%, 55%, 37%를 나타내어 Dicktoo 계통과 동보리1호의 한발저항성이 강하였고, 수원쌀보리 365호와 탑골보리는 한발저항성이 약하였다. 2. 한발저항성이 강한 품종은 삼투조정능력이 커서 한발처리에 따른 RWC와 LWP의 저하가 작았고 팽압유지능력이 컸다. 3. 한발처리에 따라 순광합성이 저하하였고 그 저하정도는 한발저항성이 큰 품종이 작았는데, 이는 한발저항성이 큰 품종이 기공전도도, 엽육전도도 및 PSII 최대양자수율(Fv/Fm)의 저하가 적었기 때문이었다. 4. 결론적으로 저항성이 큰 품종은 삼투조정에 의한 수분유지능력이 크고 이에 따라 광합성저하가 적어 상대적으로 생장의 감소가 적은 것으로 판단되었다.
알팔파의 최적 조직배양 조건을 확립하기 위하여 자엽으로부터 배발생 캘러스 유도 및 캘러스로부터 식물체 재분화에 미치는 배지첨가물질과 삼투압 스트레스 처리의 영향을 조사하였다. 배발생 캘러스 유도시에 첨가되는 식물생장조절물질로는 5mg/L 2,4-D와 0.2mg/L kinetin이 혼용 첨가된 SH 배지에서 배발생 캘러스가 가장 높은 빈도로 유도되었다. 배발생 캘러스를 1mg/L 2,4-D와 2mg/L BA가 첨가된 SH 배지에서 배양했을 때 체세포 배가 형성되었다. 재분화 배지에 첨가되는 질소원으로 5mM L-proline과 1g/L casein hydrolysate를 동시에 첨가해주었을 때, 식물체 재분화율이 증가되었다. 배발생 캘러스를 0.7M 농도의 삼투압 스트레스 조건에서 12 ${\sim}$ 18시간 처리한 후, 재분화 배지에서 배양한 결과 재분화율이 현저히 증가되었다. 가장 높은 식물체 재분화율은 0.7M sucrose가 첨가된 배지에서 18시간 처리한 후, 재분화 배지에서 배양했을 때 30.7%의 효율을 나타내었다. 본 연구를 통하여 확립된 알팔파의 효율적인 배발생 캘러스의 유도 및 식물체 재분화체계는 분자육종을 통한 신품종 알팔파의 개발에 유용하게 이용되어질 수 있을 것이다.
$Calotropis$$procera$ L. is a perennial shrub distributed in saline areas of deserts of South Asia. Salt stress is a very challenging subject in arid and semi-arid areas. Germination stage is very sensitive and many plants do not germinate in saline soil. The objective of this study was identifying the salinity effect on seed germination of $Calotropis$$procera$ L. The experimental design was a complete randomized block design with NaCl and $CaCl_2$ at five levels of isobar concentrations: 0.0, -0.01, -0.05, -0.1, and -0.15 MPa. Osmotic potential had significant effects ($P$ < 0.01) on germination percentage, germination rate, shoot length, root length, and seedling dry weight. All seedling characteristics decreased with decrease in osmotic potential. Shoot length and root length decreased more than the seedling characteristics. Germination was completely inhibited in -0.1 Mpa. Priming with NaCl and $CaCl_2$ (-0.1 MPa) for four days had significant effects ($P$ < 0.01) on the germination percentages. Priming improved the seedling characteristics in all samples, especially in -0.05 Mpa, but a decrease with decrease in osmotic potential.
To understand the molecular mechanism underlying proline accumulation in Brassica napus, cDNAs encoding ${\Delta}^1$-pyrroline-5-carboxylate synthetase (BnP5CS), ornithine $\delta$-aminotransferase (BnOAT) and proline dehydrogenase (BnPDH) were isolated and characterized. Southern blot analysis of BnP5CSs in B. napus and its diploid ancestors suggested a gene loss may have occurred during evolution. The expression of BnP5CS1 and BnP5CS2 was induced, while the expression of BnPDH was inhibited under salt stress, ABA treatment and dehydration, prior to proline accumulation. The upregulation of BnOAT expression was only detected during prolonged severe osmotic stress. Our results indicate that stress-induced proline accumulation in B. napus results from the reciprocal action of activated biosynthesis and inhibited proline degradation. Whether the ornithine pathway is activated depends on the severity of stress. During development, proline content was high in reproductive organs and was accompanied by markedly high expression of BnP5CS and BnPDH, suggesting possible roles of proline during flower development.
이 연구는 염분 변화가 둥근전복(Haliotis discus discus)의 유리아미노산(FAA)조성에 미치는 영향을 조사하고자 염분 15, 20, 25, 30, 35, 40 psu에 각각 24 h, 48 h, 120 h 노출 시킨 후 총 13가지 FAA의 함량 변화를 HPLC를 이용하여 분석하였다. 시료 중 15 psu에 노출된 전복 전량이 24 h 이내 폐 사하였고, 20 psu에 노출된 시료의 경우 전체 20개체 중 8개체가 48 h이내 사망하였다. FAA 중 Taurine, Glycine, Alaninr치 함량이 가장 높았으며, 이중 Taurin리 함량은 $114\;{\mu}mol/g$ dry tissue weight로써 전체 FAA의 77%를 점유하였다. 저염 및 고염 환경에 노출된 시료의 FAA함량은 분석 기간동안 감소하는 경향을 나타냈다. 그러나 Taurine의 농도는 노출 후 24 h이 경과하였을때까지 대조구 보다 낮았으나 노출 48 h 후부터는 저염 환경인 20 psu및 25 psu에서 증가하여 분석 종료 시점인 노출 120 h이 되었을 때까지 급격히 증가하였다. 반면 필수아미노산인 Methionine은 노출 48 h부터 20, 25, 40 psu에서 검출되지 않았고 노출 120 h 후에는 대조구를 제외한 전 실험 구에서 측정되지 않았다. Taurine 과 Glycine 비율(T:G ratio)은 저염환경에 노출된 시료에서 높게 나타났으며, 저염에 노출된 기간이 길어질수록 더욱 뚜렷한 경향이 관찰되었다. 이 같은 현상은 염분이 높은 환경에서도 나타났고 노출 시간이 지속 될수록 그 비율은 상승하였다. 이상의 결과는 FAA특히 Taurine, Glycine, Methionine 등이 둥근 전복의 삼투조절에 중요한 기능을 담당하는 것을 의미하며, FAA 분석은 염분 변화에 따른 둥근전복의 삼투조절 및 생리 특성을 이해하는데 유용한 방법임을 제시하였다.
본 시험은 대두 종자의 수분흡수 및 삼투압이 발아에 미치는 영향을 구명코저 수행되었다. Essex, Pickett, Bonus와 Wayne 4개품종이 공시되었고, 이들 품종들의 종자를 각각 소입 및 대입으로 분류하여 수분흡수를 측정하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 모든 수분조건에서 대두 종자의 수분흡수 능력은 종자의 크기 및 품종간의 유의적인 차를 보였다. Essex와 Pickett은 Bonus와 Wayne에 비해, 동일품종내에서 소입은 대입에 비해 수분흡수 능력이 우월하였다. 2. $25^{\circ}C$의 온도에서 대두 종자의 발아기간은 적당한 수분조건 및 -6bars의 토양수분 상태에서 2일, -15bars의 토양수분 조건에서는 5일로 지연되있고, Essex나 Pickett은 Wayne이나 Bonus에 비해, 그리고 소입종은 대입종에 비해 발아기간이 단축되었다. 3. 적당한 수분조건에서 발아초기에 대두 종자의 수분함량은 60.8%이였으며, 발아에 필요한 최소 종자의 수분함량은 -6bars에서 50.2%, -15bars에서 50.9% 이었다. 4. 발아기에 있어서 대두 종자의삼투압품종 및 침종시기에 따라 유의적인 변이를 보였으며, 4시간과 8시간 침종사이에서 급수한 증가를 보였다. 평균 삼투압은 4시간에 침종에서 -32.0bars, 발아초기에서 11.2bars의 범위를 나타냈다. 5. 초기 침종으로부터 발아초기 동안의 품종별 전체평균 삼투압을 보면 Bonus가 -19.4bars, Wayne이 -18.3bars, Essex가 -15.1bars, 그러고 pickett이 -13.2 bars 이었다. 6. 침종시간에 따른 초장의 길이와 삼투압간의 상관계수는 유의성이 없었으며, 이 결과는 대두 종자의 삼투압은 초기초장의 생장과 직접적인 관련이 없는 것으로 추정된다. 그러나 수분흡수와 삼투압간의 상관계수는 고도의 정의 유의성을 보였다(r=.98). Bonus나 Wayne에 비해 Pickett과 Essex는 높은삼투압을 보였으며, 이것은 수분흡수 시험결과와 일치하고 있다. 따라서 대두 종자의 삼투압은 건조상태에서 발아능력을 추정하는 하나의 지표가 되리라 생각한다.
수분 장애시 목초 발아 특성을 검토하기 위하여, 삼투압 0, -5 bar 두 수준에서 tall fescue, orchardgrass, Kentucky bluegrass 및 alfalfa의 총 발아율, 발아속도계수를 구하였으며, 누적 발아율의 경시적인 변화를 logistic 및 Weibull 함수를 이용하여 비선형회귀 잔차에 의하여 함수간 비교를 하였고, 각 함수로부터 추정된 계수를 조사 하였던바 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 삼투압 수준 -5 bar에서 대조구 대비 총발아율은 감소, 발아속도계수는 감소하였으며, alfalfa는 다른 초종에 비하여 그 변화정도가 적었다. 2.비총형회귀잔차 분석에 의하면 tall fescue, Kentucky bluegrass 및 orchardgrass는 삼투압 조건에 관계없이 logistic과 Weibull 함수간에 차이가 없었으나, Weibull 함수에 의한 alfalfa의 누적 발아율 곡선추정시 분석잔차가 logistic 함수보다 적었다. 3. 각 함수로 부터 20% 발아율 도달 일수를 추정한바, 수분장애에 의한 발아지연을 감지할 수 있었으며 함수들간의 유의적인 차이가 인정되었다. 4. logistic 함수로부터 추정된 비율계수는 alfalfa를 제외한 전 초종에서 수분장애에 의해 감소되었고, Weibull 함수로 부터 추정된 규모 및 형상 계수는 일반적으로 증가하는 경향이었다.
In order to understand the influence of ferroxidase center on the protein assembly and solubility of tadpole ferrin, three mutant plasmids, pTH58K, pTH61G, and pTHKG were constructed with the aid of site-directed mutagenesis and mutant proteins were produced in Eshcerichia coli. Mutant ferritin H-subunits produced by the cells carrying plasmids pTH58K and pTHKG were active soluble proteins, whereas the mutant obtained from the plasmid pTH61G was soluble only under osmotic stress in the presence obtained from the plasmid pTH61G was soluble only under osmotic stress in the presence of sorbitol and betaine. Especially, the cells carrying pTH61G together with the plasmid pGroESL harboring the molecular chaperone genes produced soluble ferritin. The mutant ferritin H-subunits were all assembled into ferritin-like holoproteins. These mutant ferritns were capable of forming stable iron cores, which means the mutants are able to accumulate iron with such modified ferroxidase sites. Further functional analysis was also made on the individual amino acid residues of ferroxidase center.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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