• 한국수정란이식학회지
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• 제17권3호
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• pp.195-201
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• 2002

본 실험은 원시난포의 체외배양 체계를 확립할 수 있는 가능성을 검토하기 위해 0, 5, 10, 15 및 20일령 마우스에서 분리한 난소를 20, 15, 10, 5 및 0일동안 organ culture 하여 난소의 성장률, 난자의 회수율과 성장률 및 난자의 핵성숙 단계를 조사하여, 비교 ·검토하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. Organ culture 전과 후의 각 일령에 따른 난소의 면적 차이는 0일령 35.9%, 5일령 8.7%, 10 일령 1.2% 및 15일령 14.4%로 15일령을 제외 하고는 배양일령이 증가할수록 면적 차이는 감소하였다. 2. Organ culture 후 난자의 회수율과 난자의 직경은 배양일령이 증가할수록 증대되었다. 3. GV기 이상의 핵성숙은 organ culture 후 배양 일령이 증가할수록 진행되는 단계에 있는 것으로 나타났다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제41권2호
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• pp.41-46
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• 2014

IVM refers to the maturation of immature oocytes in culture after their recovery from small antral follicles at the stage prior to selection and dominance. IVM requires little or no FSH in vivo and has been proposed as an alternative to conventional IVF, since it reduces the primary adverse effects caused by controlled ovarian stimulation, including the ovarian hyperstimulation syndrome. Moreover, IVM is a promising option for cases for which no standard protocol is suitable, such as FSH resistance, contraindications for ovarian stimulatory drugs, and the need for urgent fertility preservation. Recently, IVM has been used in women with regular cycles and normal ovaries. However, the pregnancy rate following IVM is suboptimal compared with that of conventional IVF, indicating that further studies to optimize the protocol and the culture conditions are warranted.

• 한국양식학회지
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• 제17권2호
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• pp.128-132
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• 2004

이 연구에서는 자연산 참가자미의 주 어획지역인 강원도 주문진 인근해역에서 1998년 9월부터 1999년 10월까지 연간 생식소중량지수의 변화를 조사하였으며, 조직학적 조사에 의한 생식소 발달과정과 생식주기를 밝혔다. 정소는 정소소엽 형태이며, 각각의 정소엽은 여러 개의 소낭구조를 가진다. 각 소낭내의 생식세포들은 같은 단계의 발달상태를 보인다. 난소는 원추형의 낭상으로 체강벽에서 연결되는 난소간막에 의해 부착되어 있으며, 내부는 결체성 조직인 다수의 난소박판으로 구성되며, 이곳에서 난원세포가 유래한다. 수컷의 GSI는 1월에 가장 높았으며, 암컷의 GSI는 3월에 가장 높은 값을 보였다. 생식주기는 성장기(6∼9월), 성숙기(10∼12월), 완숙 및 산란기(1∼3월)그리고 회복 및 휴지기(4∼5월)로 나눌 수 있었다. 난모세포의 발달양식은 난군동기발달형에 속하였다.

• 대한수의학회지
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• 제38권1호
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• pp.209-216
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• 1998

The purpose of present study is to improve the efficiency of fusion and the developmental rates of nuclear transplanted embryos to produce genetically identical twins from Korean native cattle. The diameter of aspirated follicles had no significant effect on the recovery rates of oocytes collected by ovum pick-up technique. The fusion rates of nuclear transplanted embryos were significantly higher in 50 and $100{\mu}s$ DC duration groups(73.3 and 72.0% ; respectively) than that in $30{\mu}s$ group(55.6% ; p<0.05). The cleavage rates of nuclear transplanted embryos appeared to be significantly higher in donor nuclei derived from in vivo (65.0%) than in those from in vitro (50.5% ; p<0.01), but the developmental rates to morulae and blastocysts were not significantly different between them(13.7 vs 10.9%, respectively).

• 한국패류학회지
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• 제22권1호
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• pp.1-11
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• 2006

The gonadosomatic index (GSI), oogenesis and reproductive cycle in female Neptunea (Barbitonia) afhritica cumingii were investigated by light and electron microscope observations. In the early vitellogenic oocyte, the Golgi complex and mitochondria were involved in the formation of glycogen, lipid droplets and yolk granules. Late in the vitellogenic oocytes, the rough endoplasmic reticulum and multivesicular bodies were involved in the formation of proteid yolk granules in cytoplasm. In particular, compared with the results of other gastropods, it showed a different result that appearances of cortical granules at the cortical layer and microvilli on the vitelline envelope, which is associated with heterosynthetic vitellogenesis, were not observed in vitellogenic oocytes during oogenesis. A mature yolk granule was composed of three components: main body (central core), superficial layer, and the limiting membrane. Monthly changes in the gonadosomatic index in females studied in 2004 and 2005 were closely associated with ovarian developmental phases. Spawning occurred between May and August in 2004 and 2005 and the main spawning occurred between June and July when the seawater temperature rose to approximately $18-23^{\circ}C$. The female reproductive cycle can be classified into five successive stages: early active stage (September to October), late active stage (November to February), ripe stage (February to June), partially spawned stage (May to August), and recovery stage (June to August).

• 한국수정란이식학회지
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• 제33권4호
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• pp.229-235
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• 2018

Polo-like kinase 1 (Plk1) has been known to be a critical element in cell division including centrosome maturation, cytokinesis and spindle formation in somatic, cancer, and mammalian embryonic cells. In particular, Plk1 is highly expressed in cancer cells. Plk1 inhibitors, such as BI2536, have been widely used to prevent cell division as an anticancer drug. In this study, the fertilized murine oocytes were treated with BI2536 for 30 min after recovery from the oviduct to investigate the effect of down-regulation of Plk1 in the in vivo-fertilized murine embryos. Then, the localization and expression of Plk1 was observed by immunofluorescence staining. The sperm which had entered into the oocyte cytoplasm did not form male pronuclei in BI2536-treated oocytes. The BI2536-treated oocytes showed significantly lower expression of Plk1 than non-treated control group. In addition, alpha-tubulin and Plk1 gathered around sperm head in non-treated oocytes, while BI2536-treated oocytes did not show this phenomenon. The present study demonstrates that the Plk1 inhibitor, BI2536, hinders fertilization by inhibiting the formation of murine male pronucleus.

• 한국임상수의학회지
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• 제31권4호
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• pp.267-271
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• 2014

개 복제는 성숙된 중기의 난자를 수술적으로 회수하여 바로 사용해야 하기 때문에 다른 번식 보조술에 비하여 체내 난자 성숙의 정확한 예측이 특히 더 중요하다. 따라서 본 연구는 개에서 체내 성숙 난자 회수 시 방사면역분석기법(RIA)과 비교하여 화학발광효소면역분석기법(CLEIA)의 신뢰성을 평가하고, 참고값을 설정하기 위해 실시되었다. 배란일(Day 0) 결정을 위하여 발정전기와 발정기의 혈청 프로게스테론 농도가 RIA와 CLEIA 방법으로 분석되었다. Day 3에 수술적인 방법으로 체내 난자를 회수하였고, bisbenzimidazole로 핵을 염색한 뒤 성숙을 현미경으로 평가하였다. 평균 호르몬 농도는 CLEIA 값 ($7.64{\pm}0.06ng/ml$)이 RIA 값 ($6.46{\pm}0.04ng/ml$, P < 0.0001)보다 유의적으로 높았다. Day 0일 때 CLEIA 값 ($10.01{\pm}0.34ng/ml$)은 RIA 값 ($7.91{\pm}0.14ng/ml$)과 다르지 않았으나, Day -1과 Day 1일 때는 CLIEA ($6.41{\pm}0.15$ and $14.25{\pm}0.44ng/ml$)가 RIA($4.95{\pm}0.10$ and $11.29{\pm}0.34ng/ml$)보다 유의적으로 더 높은 값을 나타내었다. 그러나 두 가지 방법 모두 Day -1에서 Day 2까지 프로게스테론 농도가 유의적으로 점차 증가하였다. 그러므로 CLEIA 방법으로 난자 성숙을 결정하기 위해서는 더 넓은 범위와 높은 참고 값이 고려되어야만 한다.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제34권3호
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• pp.223-227
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• 2010

These study was carried out to investigate the effects of the recovery time, diameter of oocytes on in vitro fertilization or intracytoplasmic sperm injection (ICSI). The in vitro maturation rates to MII stage of oocytes recovered at the inactive, follicular and luteal stages matured for 72 h were $1.4{\pm}0.0%$, $43.4{\pm}3.2%$ and $10.8{\pm}2.7%$, respectively. The fertilization rates of in vitro cultured oocytes recovered from ovaries at the in active, follicular and luteal stages were $0.0{\pm}0.0%$, $15.7{\pm}3.4%$ and $7.6{\pm}3.5%$, respectively. The in vitro maturation rate of oocytes recovered from ovaries at the follicular stage of the reproductive cycle was significantly higher than those at the inactive and luteal stages (p<0.05). The penetration rate determined that the percentages of oocytes with diameters in the < $100\;{\mu}m$, 100 to $100\;{\mu}m$ and 110 to $120\;{\mu}m$ ranges were $17.5{\pm}4.7%$, $43.9{\pm}4.5%$, $21.3{\pm}3.4%$, respectively. The penetration rate of oocytes with diameters between 100 to $100\;{\mu}m$ was significantly higher than that of oocytes whose diameters were < $100\;{\mu}m$ and $110{\sim}120\;{\mu}m$ (p<0.05). The penetration rate of oocytes determined that the percentages of ovaries with diameters between 1 to 5 mm and 6 to 10 mm were $32.9{\pm}3.2%$ and $17.5{\pm}3.7%$, respectively. Thus, the diameters of the ovaries were significantly higher at 1 to 5 mm (p<0.05). A total of 264 oocytes were fixed and stained after co-incubation with sperm, of which 72 had identifiable nuclear material. After in vitro fertilization for 20 hrs, 27.3% of oocytes were penetrated by spermatozoas. Oocytes were fixed and stained after ICSI, of which 38 oocytes contained identifiable nuclear material. After in vitro fertilization and ICSI for 20 hrs, to 27.3% and 67.9% of oocytes were penetrated by spermatozoas. The in vitro fertilization rates by ICSI was significantly higher than that in vitro fertilization method (p<0.05).

• 한국수정란이식학회지
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• 제20권1호
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• pp.63-69
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• 2005

본 연구는 개의 미성숙난자의 낮은 성숙율을 개선하기 위하여 자연발정온 개의 생식기관에 미성숙 난자를 이식하여 체내 배양 난자를 회수하여 회수된 난자의 핵 성숙율을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 미성숙난자를 24, 48 및 72시간 동안 체외성숙을 유도하였을 때 성숙시간에 따른 체외성숙율에는 유의적 차이는 인정되지 않았다. 2. 체내 배양 기간에 따른 난자의 회수율은 배양기간이 길어질수록 유의적으로 낮은 회수율을 보였으며, 배양기간이 증가할수록 난자의 생존율은 유의적으로 (P<0.05) 저하되었고 사멸된 난자의 비율도 또한 증가하였다. 3. 회수된 난자는 4, 5, 6일간의 체내 배양기간에 관계없이 대부분 GV상태로 (20/34; 6/15; 4/7)존재하였으며, 성숙된 난자는 체내 배양 4일째 회수된 난자에서 $5.8\%(2/34)$의 난자가 M II까지 발달한 것으로 조사되어 개의 미성숙난자의 체내 배양은 개 난자의 핵성숙을 개선하지 못하였다. 이상의 결과에서와 같이 개의 미성숙난자의 체내 배양은 M II 단계까지의 발달에 기여하지 못한 것으로 판단되며, 이는 개 미성숙난자의 핵발달은 난포에서의 자극과 활성화가 요구되는 것으로 판단된다.

• 한국가축번식학회지
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• 제17권2호
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• pp.149-157
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• 1993

소 초기배의 체외생산을 위한 소 난포란 회수를 극대화할 수 있는 방법을 확립하기 위해 여러 가지 방법에 의해 채취된 난자의 발생능력을 검토하였다. 전통적인 흡입법(대조구), 개발된 회수법(slicing) 및 이들을 결합한 방법(결합법)을 비교하였다. 총 245개의 난소로부터 1,641개의 난포란을 실험에 이용하였다. 회수된 난자는 TCM199과 소 태아혈청을 기초로 한 배양액에서 24시간 체외성숙시켜 급속염색법에 의해 핵성숙을 판별하고, 7% 에탄올에 의해 활성화된 처녀발생란의 전핵형성 유무에 의해 세포질 성숙을 평가하였다. 회수된 평균 난자수는 난소당 흡입법, slicing 및 결합법이 각각 1.87, 11.05 및 7.88개를 얻어 새로 개발된 slicing에 의해 회수율을 5.9배 (11.05/1.87) 증가시킬 수 있었다. 핵 성숙은 흡입법 92.9%, slicing 79.1%와 결합법 71.7%였다. 비록 흡입법에 의해 회수된 난자의 핵 성숙율이 높았지만 난소당 얻을 수 있는 성숙 난자의 수는 slicing할 경우 5배까지 증가시킬 수 있었다. 세포질 성숙의 지표인 전핵의 형성율은 대조구 75%, slicing 67%, 그리고 결합법 62.5%였다. 이같은 결과는 개발된 slicing법에 의해 도살장 난소로부터 보다 많은 수의 난자의 회수가 가능하며 이들의 핵성숙 및 세포질 성숙도 정상적으로 일어나며 난소당 전핵 초기배 수를 증가시킬 수 있음을 보여준 것이다. 아울러 증가된 난자수로 인하여 초기배의 생화학적 분석 및 외래유전자의 미세주입을 위한 지속적으로 안정된 초기배의 공급체계가 확립되었다.