A genomic library of Streptococcus vestibularis ATCC49124 was constructed in an E. coli plasmid vector, and the urease-positive transformants harboring the urease gene cluster were isolated on Christensen-urea agar plates. The minimal DNA region required for urease activity was located in a 5.6 kb DNA fragment, and a DNA sequence analysis revealed the presence of a partial ureI gene and seven complete open reading frames, corresponding to ureA, B, C, E, F, G, and D, respectively. The nucleotide sequence over the entire ure gene cluster and 3'-end flanking region of S. vestibularis was up to 95% identical to that of S. salivarius, another closely related oral bacterium, and S. thermophilus, isolated from dairy products. The predicted amino acid sequences for the structural peptides were 98-100% identical to the corresponding peptides in S. salivarius and S. thermophilus, respectively, whereas those for the accessory proteins were 96-100% identical. The recombinant E. coli strain containing the S. vestibularis ure gene cluster expressed a high level of the functional urease holoenzyme when grown in a medium supplemented with 1 mM nickel chloride. The enzyme was purified over 49-fold by using DEAE-Sepharose FF, Superdex HR 200, and Mono-Q HR 5/5 column chromatography. The specific activity of the purified enzyme was 2,019 U/mg, and the Michaelis constant ($K_{m}$) of the enzyme was estimated to be 1.4 mM urea. A Superose 6HR gel filtration chromatography study demonstrated that the native molecular weight was about 196 kDa.
발효시켜서 만드는 감식초에서 시료를 채취하여 배양하고, pellicle을 형성하는 single colony를 cellulose 생합성균으로 분리하였다. 분리된 균주는 형태적 특성, 알콜의 재산화 등의 생리, 생화학적 특성 등에 의하여 Acetobacter속으로 분류되었으며, Acetobacter CBI-2라고 명명하였다. Acetobacter CBI-2는 정치배양 시에 기존의 생합성 균주로 알려진 Acetobacter xylinum과 대등한 cellulose 생합성 능력을 나타내었다. Acetobacter CBI-2이 생성한 고분자물질의 분해산물을 TLC법으로 확인한 결과 기존 cellulose의 것과 일치하였다. Acetobacter CBI-2에서 genomic DNA를 분리 정제하여 cel A 영역을 probe로하여 hybridization 시킨 결과, 상동성을 나타내어 분리 균주에는 cellulose 생합성 관련 유전자가 존재함을 나타내었다.
In this study, we have attempted to characterize the functions of YlaC and YlaD encoded by ylaC and ylaD genes in Bacillus subtilis. The GUS reporter gene, driven by the yla operon promoter, was expressed primarily during the late exponential and early stationary phase, and its expression increased as the result of hydrogen peroxide treatment. Northern and Western blot analyses revealed that the level of ylaC transcripts and YlaC increased as the result of challenge with hydrogen peroxide. A YlaC-overexpressing strain evidenced hydrogen peroxide resistance and a three-fold higher peroxidase activity as compared with a deletion mutant. YlaC-overexpressing and YlaD-disrupted strains evidenced higher sporulation rates than were observed in the YlaC-disrupted and YlaD-overexpressing strains. Analyses of the results of native polyacrylamide gel electrophoresis of recombinant YlaC and YlaD indicated that interaction between YlaC and YlaD was regulated by the redox state of YlaD in vitro. Collectively, the results of this study appear to suggest that YlaC regulated by the YlaD redox state, contribute to oxidative stress resistance in B. subtilis.
병아리의 성 감별 방법으로 깃털 감별법이 상업적으로 가장 널리 이용되고 있다. 그러나 깃털 감별법이 산업적으로 실용화되기 위해서는 종계의 기초 계군 내 조우성과 만우성 유전자가 존재하고, 깃털 감별이 될 수 있는 종계 계통을 조성하여야 하고, 깃털 감별로서 병아리의 성 판별율이 정확하여야 한다. 따라서 본 연구에서는 상업용 토종닭의 깃털 감별을 위한 자가 성감별 종계 계통 조성 방법과 조성된 종계로써 생산한 상업용 병아리들의 깃털 성 판별의 유효성을 소개하고자 하였다. 깃털 감별용 종계 조성을 위한 기초 계군은 조우성 개체와 만우성 개체가 혼재되어 있었으며, 만우성유전자의 빈도가 0~0.205 정도로 추정되었다. 병아리의 깃털 자가 성감별을 위한 계통 조성으로 원종계의 부 계통은 암수 공히 조우성(kk)으로 고정하고, 모 계통의 부는 만우성 동형접합체(ZKZK)를 가진 계군으로, 모는 조우성(ZkW)을 가진 계군으로 조성하였다. 따라서 부계 종계는 조우성(ZkZk), 모계 종계는 만우성(ZKW)으로 되어 이들 간 교잡으로 생산된 병아리들은 수컷은 만우성(ZKZk), 암컷은 조우성(ZkW)을 가지므로 병아리의 깃털 형태로써 암수를 감별할 수 있었다. 또한 생산된 실용 병아리에 대한 깃털 감별의 유효성을 살펴보고자 생산 병아리 중 1,000수를 표본으로 항문 감별과 깃털 감별 간의 감별 일치도를 조사한 결과 일치율은 93.1%로 나타났다.
현재 probiotics로 상업화되어 있는 B. coagulans IDCC 1201(상업용 명칭 : Lactobacillus sporogenes)이 acid phytase 및 $Co^{2+}$를 cofactor로 갖는 metalloenzyme 특성을 가진 phytase를 생산하고, cofactor로 사용되는 $Co^{2+}$ ion이 B. coagulans IDCC 1201 유래 phytase의 열 안정성에 기여하였다. 또한 B. coagulans IDCC 1201의 phytase 유전자 서열을 분석한 결과 B. subtilis 168 유래의 enzyme 서열과 높은 상동성을 나타내었다. 본 연구결과를 토대로 B. coagulans IDCC 1201 장내 균총의 정상화를 가져와, 질병 예방과 면역력 향상을 구현함과 동시에 가축이 곡물에 함유된 phytic acid의 섭취로 인한 항영양인자, 환경오염등의 문제점을 해결할 수 있는 사료 첨가제로써의 산업적 효용가치가 풍부할 것으로 전망된다.
환경친화적으로 항균성이 부여된 상처치료용 BC 드레싱을 개발하기 위한 기초연구로서, 은 이온에 대해 내성이 있으면서 은 나노입자를 생합성할 수 있는 초산균을 분리 및 동정하였다. 나아가 실험균주에 의한 BC 생산 조건을 조사하였다. 부패된 포도껍질로부터 분리된 G7 균주는 0.1 mM $AgNO_3$ 존재 하에서 생육할 수 있었으며, 16S rRNA 유전자의 염기서열 분석에 의거하여 Acetobacter intermdius로 동정되었다. 탄소원으로 2% glucose, 질소원으로 2% yeast extract, 보조탄소원으로 0.115% acetic acid가 함유된 배지에서 BC 생산량이 최대였다. 최적배지에서 생성된 BC의 구조적 특성을 FT-IR 및 XRD를 사용하여 조사한 결과, 생성된 BC는 전형적인 천연 cellulose와 동일한 cellulose I인 것으로 확인되었다. G7 균주를 0.1 mM $AgNO_3$ 가 함유된 최적 배지에서 배양한 결과, 배양액의 색깔이 적갈색으로 변하였으며, 이것은 은 나노입자가 생성되었음을 의미한다. 은 나노입자의 합성유무를 UV-Vis 스펙트럼 분석에 의하여 확인한 바, 425 nm에서 은 나노입자의 고유한 흡수스펙트럼이 관찰되었다. 또한, 생성된 BC를 주사전자현미경으로 관찰한 결과, 표면과 기공에 은 나노입자가 생성되어 있음을 재확인하였다.
Kucukyilmaz, Kamil;Bozkurt, Mehmet;Herken, Emine Nur;Cinar, Mustafa;Catli, Abdullah Ugur;Bintas, Erol;Coven, Fethiye
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제25권4호
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pp.559-568
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2012
White (Lohmann LSL) and Brown (ATAK-S) laying hens, were reared under organic and conventional cage rearing systems, and the effects of the rearing system on performance parameters, egg production, egg characteristics, and immune response were investigated. For this purpose, a total of 832 laying hens of two commercial hybrids, i.e., 416 white (Lohmann LSL) and 416 Brown (ATAK-S) layers, were used. The experiment lasted between 23 and 70 wk of age. In this study, the white layers yielded more eggs as compared to the brown layers in both organic and conventional production systems. Egg weight exhibited a similar pattern to that of laying performance. However, the total hen-housed egg number for the white birds in the organic system was fewer than that of white birds in the conventional cage facility; conversely, a contradictory tendency was observed for the brown birds. Livability of the white layers in the organic system was remarkably lower (14%) than that of the brown line, whereas the white line survived better (3.42%) than their brown counterparts in conventional cages. The feed conversion ratio of the white hens was markedly inferior in the organic system as compared to that of the white hens in the conventional system, whereas relatively lower deterioration was reported in brown layers when reared in an organic system. The organic production system increased egg albumen height and the Haugh unit in eggs of the brown layers. The yolk color score of organic eggs was lower than that of conventional eggs for both brown and white hens. The egg yolk ratio of eggs from white layers was found to be higher in organic eggs as compared to those obtained in the conventional system. All organic eggs had heavier shells than those produced in the conventional system. Eggs from brown layers had more protein content than eggs from white layers. Neither housing systems nor genotype influenced egg yolk cholesterol concentration. When compared to conventional eggs, n-3 fatty acid content was lower in organic eggs, and the n-6:n-3 ratio was higher in organic eggs. In conclusion, two hen genotypes showed different responses in terms of performance and egg quality to two different rearing systems. A commercial white strain produced more eggs with higher egg quality as compared to a native brown strain. The brown strain was found to have adapted well to organic production conditions when survival and total egg number was taken into consideration.
독도에 자생하는 번행초의 뿌리로부터 순수 분리하여 형태적으로 상이한 17개의 내생균류를 선별하였다. 또한 분리된 균류들에 대하여 각각의 염농도와 pH 농도 구배에 따라 생장 시험을 확인하였다. 내생균류에 대해 각각 난장이벼의 유묘에 식물생장활성시험을 진행하였고, 그 결과 YH103 균주가 가장 높은 활성을 나타내었다. 계통분석은 Maximum likelihood 방법을 활용하여 결합된 ITS영역, beta-tubulin 및 calmodulin 유전자 염기서열을 분석하여 분리된 균주의 유연관계를 분석하였다. YH103 균주의 배양여과액을 HPLC와 GC/MS SIM을 이용하여 분석한 결과 식물호르몬인 지베렐린 $GA_4$, $GA_7$, $GA_8$ 및 $GA_{19}$가 확인되었다. 최종적으로 YH103 균주의 형태학적 관찰 및 결합된 유전자 염기서열의 분자적 분석을 통해 GA를 생산하는 새로운 Aspergillus tubingensis로 동정되었다.
주걱쑥부쟁이(Heteropappus arenarius Kitam.)는 들국화에 속하는 가을 개화성 이년초로 한국의 남동부 해안지대와 제주도에서 자생한다. 본 식물은 대규모 조경지역 특히, 척박한 토양이나 비탈면 언덕에 유용한 지피식물로서 개발 가능성이 높다. 본 연구는 주걱쑥부쟁이 종자의 지역계통과 수확시기에 따른 최적 발아온도를 선정하기 위해 최초로 수행하였다. 지역별 온도에 따른 종자발아 반응은 다음과 같다. 최종발아율(FG)은 구룡포산(産)(89.7%)이 4개 지역계통 중에 가장 높았고, 다음으로 구좌산(産)(87.3%), 감포산(産)(87.3%), HKNU-I (71.5%) 순이었다. 지역별 평균 $T_{50}$은 구좌산(産)(3.6 일)과 구룡포산(産) (4.0일)이 타 지역에 비해 짧았다. 온도별 평균 FG와 $T_{50}$은 $20^{\circ}C$에서 각각 76.2%와 3.6일로 가장 우수하였다. 그 다음으로 $30^{\circ}C$, $25^{\circ}C$, $15^{\circ}C$순이었다. 그러나 구좌산(産)의 경우, FG과 $T_{50}$이 $20^{\circ}C$와 $15^{\circ}C$에서 우수하였다. 수확단계 및 온도관계에서 수확단계별 평균 FG는 Stage III (90.7%)와 Stage IV (88.6%)가 Stage II(35.7%)와 Stage I(26.0%)에 비해 월등히 높았다. 수확단계별 평균 $T_{50}$은 Stage IV (3.7일)과 Stage III (4.3일)로 FG값이 50%이하를 보여준 타 수확단계에 비해 짧았다. 그럼에도 불구하고 주걱쑥부쟁이 종자는 모든 단계에서 발아할 수 있었기에 종자 수확 가능범위는 Stage I 에서 IV까지였다. 결론적으로 주걱쑥부쟁이 종자발아의 최적 온도와 적정 수확단계는 $20^{\circ}C$ 조건에 Stage III에서 IV 까지이었다.
영광 토종국에서 분리된 곰팡이중, amylase 생산성이 우수한 Asp. awamori의 ${\alpha}-amylase$, glucoamylase의 생산 및 활성에 대해 밀기울을 기본배지로 하여 배양조건을 검토한 결과, 본 균주에 대한 두 효소의 생산성은 $30^{\circ}C$에서 72시간 배양했을 때 최대에 달하였고 기본배지에 maltose, urea, $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, $K_2HPO_4$, $CaCl_2{\cdot}2H_2O$를 첨가했을 때 현저히 증대되었다. 최대효소활성은 pH 5.0 및 $50^{\circ}C$에서 나타났고, $pH\;5.0{\sim}6.0$에서 안정하였으며 $CaCl_2{\cdot}2H_2O$를 첨가하면 pH 안정성이 증가하였다. 열안정성은 $50^{\circ}C$애서 ${\alpha}-amylase$는 20분, glucoamylase는 40분간 열처리 후에도 유지되었고, ${\alpha}-amylase$는 $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, $K_2HPO_4$를 glucoamylase는 $CaCl_2{\cdot}2H_2O$를 첨가했을 때 열에 대한 안정성이 증대되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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