Three cDNA fragments located within NS5 region of HCV were synthesized by RT using viral RNA extracted from blood sample of Korean patient as a template. The cDNAs were amplified by PCR, cloned into the T-vector, and the nucleotide sequences were determined. Comparative analysis of the nucleotide and amino acid sequence of NS5 cDNAs showed that it is closely related with HCV type 1b. The cloned NS5 cDNA showed 91-94% homology at the nucleotide sequence level and 96-98% homology at the amino acid sequence level with several strains of the HCV type 1b. The NS5 cDNAs were subcloned into E. coli expression vectors to construct pRSETA5-1, pTHAN5-1, pRSETC5-2, pRSETBB1, pRESTCB1 and pRSETB-H3. Expression of the NS5 proteins was achieved by inducing the promoter with isopropyl-thio-${\beta}$-D-galactoside (IPTG) and confirmed by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The NS5 proteins were immunoreactive against sera from Korean hepatitis C patients in Western blot analysis. Among the recombinant NS5 proteins, pRSETAS-1 plasmid derived protein, coded from aa2022 to aa2521 of HCV polyprotein, showed the strongest immunoreactivity against sera from Korean hepatitis C patients in immunoblot analysis. These results suggest that NS5 proteins would be useful as an antigen for detection of antibody against HCV in the blood samples.
The hepatitis C virus is associated with the development of liver cirrhosis and hepatocellular carcinomas. Among the 10 polyproteins produced by the virus, no function has been clearly assigned to the non-structural 5A (NS5A) protein. This study was designed to identify the hepatocellular proteins that interact with NS5A of the HCV. Yeast two-hybrid experiments were performed with a human liver cDNA prey-library, using five different NS5A derivatives as baits, the full-length NS5A (NS5A-F, amino acid (aa) 1~447) and its four different derivatives, denoted as NS5A-A (aa 1~150), -B (aa 1~300), -C (aa 300~447) and D (aa 150~447). NS5A-F, NS5A-B and NS5A-C gave two, two and 10 candidate clones, respectively, including an AHNAK-related protein, the secreted frizzled-related protein 4 (SFRP4), the N-myc downstream regulated gene 1 (NDRG1), the cellular retinoic acid binding protein 1 (CRABP-1), ferritin heavy chain (FTH1), translokin, tumor-associated calcium signal transducer 2 (TACSTD2), phosphatidylinositol 4-kinase (PI4K) and $centaurin{\delta}$ 2 ($CENT{\delta}2$). However, NS5A-A produced no candidates and NS5A-D was not suitable as bait due to transcriptional activity. Based on an in vitro binding assay, CRABP-1, PI4K, $CENT{\delta}2$ and two unknown fusion proteins with maltose binding protein (MBP), were confirmed to interact with the glutathione S-transferase (GST)/NS5A fusion protein. Furthermore, the interactions of CRABP-1, PI4K and $CENT{\delta}2$ were not related to the PXXP motif (class II), as judged by a domain analysis. While their biological relevance is under investigation, the results contribute to a better understanding of the possible role of NS5A in hepatocellular signaling pathways.
Park, Sung-Baek;Kim, Ji-Chul;Park, Kee-Sang;Lee, Taek-Hoo;Chun, Sang-Sik;Song, Hai-Bum
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2003.10a
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pp.118-118
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2003
The aim of this study was to investigate the effect of glucose on embryonic development of mouse embryos. Two cell embryos were recovered from ICR female mice(3-4weeks) at 46~50 hrs after hCG 5 IU injection (mated just after hCG injection) and cultured in 50 $\mu m$ DMEM droplets supplemented with nothing (control: n=46), glucose 0.5mM (Group A; n=46) or glucose 3.15 mM(Group B; n=46) under mineral oil. All experimental media were supplemented with 20% human follicular fluid. Total blastocyst formation rates was lower (NS) in glucose groups (group A: 52.2% : B. 47.8%) than control group (60.9%). ZiB rates was the highest (P<0.05) in control (47.8%) than those in group A (21.7%) and B (28.3%). ZeB rates were the highest (NS) in group A (30.4%) than those in control (13.0%) and group B (19.6%). Blastocysts, cultured in group B (50.5), had the highest (NS) mean cell number compared with the others (control: 39.2 ; group A: (45.6). The ICM proportion (% ICM of total cells) in blastocysts cultured in group A (20.6%) was the highest (NS) than those of other tested groups (control: 15.2 ; group B: 13.9%). This study shows that a low dose of glucose added to culture medium increases the ICM proportion of blastocysts in mice.
The Journal of the Institute of Internet, Broadcasting and Communication
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v.12
no.2
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pp.167-174
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2012
The circuits including with Optical transceiver and clock data recovery, in this paper, SERDES (SERializer-DESerializer) are implemented to construct a GE-PON burst-mode transceiver supporting IEEE 802.3ah and a jig for measuring the burst-mode characteristics, that is to say, PON upstream optical transmission environment are manufactured to evaluate the performance of transceiver. we verified that the limiting amplifier compensated the gap of max. 26dB optical power by experiments. The startup acquisition lock time is 670ns in case of using VSC7123 and 2300ns in case of S2060 and the data acquisition lock time were measured to be 400ns and 600ns, respectively, in the upstream channel transmission in this work. While on the other, VSC7123 is satisfied with IEEE802.3ah recommendations.
This study was done to observe the effect on the local thermal changes of herbal acupuncture on D.I.T.I.. The objects of this study are as follows; If there are remarkable local thermal changes between pre and post herbal acupuncture therapy on D.I.T.I.or not. If there are those, We examine how long that changes are maintained, what the adequate interval is on herbal acupuncture therapy, and what the reaction in a .local or whole body are on that therapy Materials and Methods : To study the local thermal changes in herbal acupuncture therapy, D.I.T.I. was used. Determination of this analysis periods are pre and post-therapy(1 hour, 24hours, 48hours and 7days later). The study group was divided into three groups(comprised 23 students in oriental medical college, Woosuk University). One was NS(Normal Saline) group, another was CF(CARTHAMI SEMEN) group and the other was BU(FEL URSI + BENZOAR BOVIS) group. The Herbal Acupunture solution was injected 0.2ml divide into 0.05ml at tile P'ungmun(B12), P'yesu(B13), Pubun(B41), Paek'o(B42) 4 points. Then, in order to analyze the clinical form, we have observed response of 23 students whenever we checked the thermal changes of their after perfoming Results : The results were obtained as follows ; 1. There is no significant dermatothermal changes at NS group and CF group, but BU group have remarkable changes in 24, 48, 72 hours. 2. From post-therapy 1 hour to 48 hours, there is a significant change (P<0.01) at NS-BU group and CF-BU group, But there is none 7 days later. 3. In the analysis of whole or local body reaction, local pain appears at NS group(22%), CF group(11%), BU group(91%), discomfort reaction appears at CF group(14%), BU group(30%). BU groilp has feel vertigo(13%), drowsy (70%) and pain in action(52%). 4. In the analysis of the duration of physic진 reaction, BU group is most lately maintained. Conclusions : These results suggest that in the physical reaction of herbal acupuncture solutions, BU solution is more sensitive than CF solution or NS.
Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers B
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v.37
no.4
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pp.415-421
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2013
This study describes the aerodynamic design procedure for the axial turbines of a small heavy-duty gas turbine engine being developed by Doosan Heavy Industries. The design procedure mainly consists of three parts: namely, flowpath design, airfoil design, and 3D performance calculation. To design the optimized flowpath, through-flow calculations as well as the loss estimation are widely used to evaluate the effect of geometric variables, for example, shape of meridional plane, mean radius, blades axial gap, and hade angle. During the airfoil design procedure, the optimum number of blades is calculated by empirical correlations based on the in/outlet flow angles, and then 2D airfoil planar sections are designed carefully, followed by 2D B2B NS calculations. The designed planar sections are stacked along the spanwise direction, leading to a 3D surfaced airfoil shape. To consider the 3D effect on turbine performance, 3D multistage Euler calculation, single row, and multistage NS calculations are performed.
Chikungunya virus (CHIKV) was first identified in 1952 as a causative agent of outbreaks. CHIKV is transmitted by two mosquito species, Aedes aegypti and A. albopictus. Symptoms after CHIKV infection in human are typically fever and joint pain, but can also include headache, muscle pain, joint swelling, polyarthralgia, and rash. CHIKV is an enveloped single-stranded, positive-sense RNA virus with a diameter of approximately 70 nm. The pathogenesis of CHIKV infection and the mechanism by which the virus evades the innate immune system remain poorly understood. Moreover, little is known about the roles of CHIKV-encoded genes in the viral evasion of host immune responses, especially type I interferon (IFN) responses. Therefore, in the present study, we screened CHIKV-encoded genes for their regulatory effect on the activation of nuclear factor kappa B (NF-κB), a critical transcription factor for the optimal activation of IFN-β. Among others, non-structural protein 2 (nsP2) strongly inhibited melanoma differentiation-associated protein 5 (MDA5)-mediated induction of the NF-κB pathway in a dose-dependent manner. Elucidation of the detailed mechanisms of nsP2-mediated inhibition of the MDA5/RIG-I signaling pathway is anticipated to contribute to the development of virus-specific therapeutics against CHIKV infection.
Journal of the Institute of Electronics Engineers of Korea SD
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v.43
no.9
s.351
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pp.64-68
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2006
Novel system-on-package (SOP) - D technology to improve the mechanical and thermal properties of a MCM-D substrate was suggested. Based on this investigation, the two types of band pass filters for the V-band application with unique structure were designed and implemented using 2-metals, 3-BCB layers. The first type using distributed resonator had the insertion loss below 2.6 dB at 55 GHz and group delay was below 0.06 ns. For the second type with edge coupled structure, the insertion loss and group delay were 3 dB and 0.1 ns, respectively. Suggested MCM-D substrate with band pass filter can be used to evaluate mm-Wave system including flip-chip bonded MMIC.
This study examined the relationship between NaCl sensitivity and stress response of Listeria monocytogenes. Nine strains of L. monocytogenes (NCCP10805, NCCP10806, NCCP10807, NCCP10808, NCCP10809, NCCP10810, NCCP10811, NCCP10920 and NCCP 10943) were exposed to 0%, 1%, 2% and 4% NaCl, and then incubated at 60℃ for 60 min to select strains that were heat-sensitized (HS) and non-sensitized (NS) by NaCl exposure. After heat challenge, L. monocytogenes strains were categorized as HS (NCCP 10805, NCCP10806, NCCP10807, NCCP10810, NCCP10811 and NCCP10920) or NS (NCCP10808, NCCP10809 and NCCP10943). Total mRNA was extracted from a HS strain (NCCP10811) and two NS strains (NCCP10808 and NCCP10809), and then cDNA was prepared to analyze the expression of genes (inlA, inlB, opuC, betL, gbuB, osmC and ctc) that may be altered in response to NaCl stress, by qRT-PCR. The expression levels of two invasion-related genes (inlA and inlB) and two stress response genes (opuC and ctc) were increased (p<0.05) in NS strains after NaCl exposure in an NaCl concentration-dependent manner. However, only betL expression was increased (p<0.05) in the HS strains. These results indicate that the effect of NaCl on heat sensitization of L. monocytogenes is strain dependent and that opuC and ctc may prevent NS L. monocytogenes strains from being heat sensitized by NaCl. Moreover, NaCl also increases the expression of invasion-related genes (inlA and inlB).
While the incidence of nephrotic syndrome (NS) is decreasing in Korea, the morbidity of difficult-to-treat NS is significant. Efforts to minimize treatment toxicity showed that prolonged treatment after an initial treatment for 2-3 months with glucocorticosteroids was not effective in reducing frequent relapses. For steroid-dependent NS, rituximab, a monoclonal antibody against the CD20 antigen on B cells, was proven to be as effective, and short-term daily low-dose steroids during upper respiratory infections reduced relapses. Steroid resistance or congenital NS are indications for genetic study and renal biopsy, since the list of genes involved in NS is lengthening.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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