This study was conducted to select some useful plants as functional material candidates. A total of 38 plants were preliminarily screened for the anti-inflammatory and antioxidant activities. The preliminarily selected 8 plants were further investigated to verify the in vitro inhibitory effect on inflammation and oxidative stress. Boehmeria platanifolia (root), Carpinus coreana (branch), and Eupatorium japonicum (leaf) inhibited the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) in lipopolysaccharide (LPS)-treated RAW 264.7 cells. Eupatorium japonicum (leaf) suppressed the expression of cyclooxygenase-2 (COX-2), whereas Boehmeria platanifolia (root) and Prunus yedoensis (branch) inhibited the transcription of nuclear factor-kappa B (NF-${\kappa}B$). Treatment with the extracts ($2.5{\sim}20{\mu}g/ml$) of Abutilon theophrasti (leaf, flower/seed) and Hemistepta lyrata (stem) did not show toxicity on RAW 264.7 cell proliferation, but treatment with $2.5{\mu}g/ml$ of Boehmeria platanifolia (root) exhibited cell toxicity. Carpinus coreana (branch) and Prunus yedoensis (branch) showed potent scavenging activities on peroxynitrite. Akebia quinata (flower), Carpinus coreana (branch), and Prunus yedoensis (branch) effectively inhibited reactive oxygen species (ROS). Abutilon theophrasti (leaf), Boehmeria platanifolia (root), Carpinus coreana (branch), and Eupatorium japonicum (leaf) exhibited strong inhibitory capacity with regard to nitric oxide (NO) production. The results suggested that Abutilon theophrasti (leaf) has in vitro anti-inflammatory and antioxidant activities, and that is a useful functional material candidate.
The anti-inflammatory effect of Sargassum patens C. Agardh ethanol extract (SPEE) was examined based on the lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory response in this study. SPEE treatment was not cytotoxic to macrophages compared to the control. The production of NO was suppressed by SPEE by approximately 28% at $100{\mu}g/ml$, and levels of interleukin-6, tumor necrosis $factor-{\alpha}$, and $interleukin-1{\beta}$ decreased in a dose-dependent manner. In addition, the expression of inducible nitric oxide synthase, cyclooxygenase-2, and nuclear $factor-{\kappa}B$ was suppressed by SPEE treatment. In vivo, croton oil-induced mouse ear edema was attenuated by SPEE and the infiltration of mast cells into the tissue decreased. Based on these results, SPEE inhibits the release of LPS-induced pro-inflammatory cytokines and mediators, suggesting that SPEE is a potential agent for anti-inflammatory therapies.
This study investigated the anti-inflammatory activity of barley leaf extract in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW264.7 cells and hairless mice. Pre-treatment with barley leaf extract significantly inhibited the protein expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-II (COX-II) in a dose-dependent manner in LPS-stimulated RAW264.7 cells. Barley leaf extract also significantly inhibited the secretion of inflammatory cytokines, such as tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$), and interleukin-6 (IL-6). Moreover, phosphorylation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and nuclear translocation of nuclear factor-kappa B (NF-${\kappa}B$) were strongly suppressed by barley leaf extract in LPS-stimulated cells. In hairless mice, barley extract significantly decreased the pathological phenotypes of contact dermatitis, such as erythema, edema, and scabs. These results indicate that barley leaf extract has an anti-inflammatory effect and therefore a possible role in the treatment of inflammatory diseases or in functional cosmetics.
Rebaudioside A is a natural sweetener isolated from Stevia rebaudiana Bertoni, one of the glycosides based on steviol. Recent studies have shown that rebaudioside A inhibits the inflammatory response by inhibiting cytokines secretion such as interleukin-$1{\alpha}/1{\beta}$ in activated RAW264.7 mouse macrophage cells by LPS. However, the inhibitory mechanism of inflammation by rebaudioside A in the presence of LPS has not been fully elucidated. Therefore, in this study, we tried to investigate the anti-inflammatory activity of rebaudioside A at the protein level when RAW264.7 cells were stimulated by LPS. The inducible nitric oxide synthase protein expression level was reduced in the group treated with $250{\mu}M$ rebaudioside A compared to the LPS-treated group. In addition, the mRNA expression level of $NF-{\kappa}B$, which is a representative nuclear transcription factor by inflammatory signal, was also decreased as compared with that of LPS-treated group. In addition, $NF-{\kappa}B$ and inhibitor-${\kappa}B$ ($I-{\kappa}B$) complexes that are known to be dissociated by $I-{\kappa}B$ phosphorylation and ubiquitination were less phosphorylated than LPS treated group in the presence rebaudioside A. Finally, we could find that rebaudioside A was involved in the $NF-{\kappa}B$ pathway through reducing extracellular signal-regulated kinase1/2 phosphorylation in a concentration-dependent manner. These results suggest that rebaudioside A might suppress inflammatory reaction through MAPK and $NF-{\kappa}B$ regulation in LPS-stimulated RAW264.7.
We have recently discovered that mycelium of Phellinus linteus, popular medical mushrooms in Korea, possess alcohol dehydrogenase and produce alcohol. In the present study, it was examined that the effect of fermented rice wine made by using mycelium of P. linteus (FLMP) on the expression of in-flammation-related proteins in both $HepG_2$ cells and rats. To examine the effect of FLMP on the morphology and expression of inflammatory proteins in $HepG_2$ cells, the cells were incubated with ethanol, and FLMP for 24 hours, and then analyzed by microscopic observation and Western blot and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). While ethanol induced the morphological change accompanied with cell debris formation and scattering on $HepG_2$ cells, FLMP had no effect. The results of Western blot and RT-PCR analyses showed that the level of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase (COX)-1 and COX-2 was induced by ethanol, however, FLMP inhibited the expression of these proteins and its mRNAs. In the animal model, the value of flutamate oxaloacetate transaminase and glutamate pyruvate transaminase was significantly increased by administration with ethanol. But the group administrated with FLMP showed lower levels on the changes of these markers compared with ethanol-administrated group. Besides, the results of Western blot and RT-PCR analyses showed that the expression of inflammatory proteins such as iNOS, COX-1 and COX-2 was not affected by FLMP administration in rat liver. About histopathological and immunohistochemical observations, inflammatory loci were markedly decreased in the FLMP-administrated rat compared to ethanol-administrated rats and showed weaker COX-2 and iNOS jmmunoreactions. These results suggested that FLMP showed slight changes on the inflammatory proteins expression compared to ethanol and FLMP may be used as a functional alcoholic beverage.
Kim, Tae Woo;Kim, Kyoung Kon;Kang, Yun Hwan;Kim, Dae Jung;Choe, Myeon
Journal of Nutrition and Health
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v.47
no.4
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pp.221-228
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2014
Purpose: Citron seed oil (CSO) has been reported to have high antioxidant activity. However, the composition and other biologically activities of CSO have not been reported. In this study, we confirmed the fatty acid composition of CSO, which may be beneficial to vascular disease and obesity. Methods: We investigated the oil composition of CSO using gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC-MS) analysis, and cytotoxicity was confirmed by Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay. Nitric oxide (NO) production in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) was measured using Griess reagent, and lipid accumulation and leptin secretion in 3T3-L1 cells were measured by Oil-Red O staining and commercial ELISA kit, respectively. Results: GC-MS analysis indicated that CSO contains several components, including linoleic acid, oleic acid, palmitic acid, stearic acid, linolenic acid, palmitoleic acid, and arachidic acid. In physiological activity analysis, CSO did not induce cytotoxic effects in HUVECs and 3T3-L1 cells. Further, CSO significantly induced nitric oxide and leptin secretion as well as inhibited lipid accumulation. Conclusion: CSO increased NO release, inhibited lipid accumulation, and induced leptin secretion, suggesting it may be useful for the management of vessels and weight gain. Although further studies are required to investigate the safety and mechanism of action of CSO, our results show that the composition and physiological activity of CSO are sufficient for its use as functional edible oil.
Kim, Ye Ji;Kim, Ohn Soon;Seo, Chang Seob;Lim, Hye Sun;Yoo, Sae Rom;Jeon, Woo Young;Jin, Seong Eun;Shin, In Sik;Kim, Jung Hoon;Shin, Na Ra;Kim, Seong Sil;Lee, Mee Young;Jeong, Soo Jin;Ha, Hye Kyung;Shin, Hyeun Kyoo
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.26
no.6
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pp.908-914
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2012
To investigate the difference and change of ingredient and efficacy of Galgeun-tang (GGT) according to extraction solvent, water and 70% EtOH, the quantities of index components and the several in vitro activities of two kinds of GGT extract were compared. The contents of extracts were analyzed with HPLC. The biological activities such as anti-inflammatory and anti-obesity effects were measured through cell line-based in vitro assay. The cytotoxicity was measured by CCK-8 assay in RAW 264.7 cell, BEAS-2B cell, HaCaT cell and 3T3-L1 cell. We compared effects of two kinds of extract by measuring NO, PGE2, IL-6 and TNF-${\alpha}$ in RAW264.7 cell, RANTES in BEAS-2B cell, MDC and RANTES in HaCaT cell and GPDH activity and leptin level in differentiated 3T3-L1. 70% EtOH extract of GGT contained more compositions than water extract. The inhibitory effect of water extract of GGT on NO in RAW 264.7 cell and GPDH activity in 3T3-L1 was stronger than that of 70% EtOH. 70% EtOH has a stronger inhibitory effect on PGE2 in RAW264.7 cell, RANTES in BEAS-2B cell, MDC, RANTES in HaCaT cell, leptin in 3T3-L1 cell than water extraction. These results suggest that the ingredient and efficacy from 70% EtOH extract of GGT are more effective than water extract.
Kim, Dae-Ho;Park, Jin-Hong;Kim, Jung-Hwa;Kim, Cheol-Hee;You, Jin-Hyun;Kwon, Min-Chul;Lee, Hyeon-Yong
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.13
no.3
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pp.81-86
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2005
The immune activities of the extracts from Ephedrae Herba and Rubi Frutus extraction with ultrasonification at $60^{\circ}C$ were compared with the extracts though water extraction at $100^{\circ}C$. The growth of human T cells was increased up to $13{\times}10^4\;viable\;cells/m{\ell}$ in adding $1.0\;g/{\ell}$ of the ultrasonification extracts of R. Fructus at $60^{\circ}C$, compared to adding the extracts at $100^{\circ}C$. The secretion of $TNF-{\alpha}$ for human T cells were also increased up to $13.9{\times}10^{-4}$ pg/cell by adding extracts at $60^{\circ}C$, compared to extracts at $100^{\circ}C$. The extracts of R. Fructus at $60^{\circ}C$ increased NK cell activities up to 50% and the secretion of $NO^{-1}$ from macrophage to $31\;{\mu}M$ for ultrasonification extracts at $60^{\circ}C$.
Purpose: The effects of water extract and distillate from the mixture of black goat meat and medicinal herb on MG-63 osteoblast proliferation and mouse bone marrow derived osteoclast formation were investigated. Methods: Proximate composition, volatile basic nitrogen (VBN), mineral content, free amino acid composition and free fatty acid composition in black goat meat were determined. Water extract and distillate were prepared with three groups; goat meat only (BG-E, BG-D), six herbs added group (BG-E6, BG-D6), and eight herbs added group (BG-E8, BG-D8). Osteoblast proliferation, mineralization and calcium uptake activity of MG-63 cells were measured and tartrate resistant acid phosphatase activity of osteoclasts was analyzed. Results: Black goat meat had remarkably low fat and high level of calcium. Glutamic acid was the most abundant amino acid. Herbs added extract groups (BG-E6 and BG-E8) showed increased MG-63 cell proliferation in a concentration dependent manner, while all the distillates did not show the effect. All extracts and distillates showed significantly increased osteoblast mineralization depending on the concentration. In particular, herb added extract, BG-E6, increased 170.3% of control and the distillate of BG-D and BG-D6 increased up to 168.5% and 159.8%, respectively. Calcium uptake activities of all water extracts showed remarkable increase of BG-E6 and BG-E8 up to 615.5% and 628.1% of control, respectively. Ditillates had no effect except BG-D6. All water extracts significantly reduced the activity of tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) in osteoclasts derived from mouse bone marrow. Conclusion: Combination of black goat meat and medicinal herb increased the MG-63 cell proliferation and effectively inhibited osteoclast differentiation in both water extracts and distillate of them, which implies that they could be used as potent functional food materials for bone health.
Background : Though mononuclear phagocytes serve as the final effectors in killing intracellular Mycobacterium tuberculosis, the bacilli readily survive in the intracellular environment of resting cells. The mechanisms through which cellular activation results in the intracellular killing is unclear. In this study, we sought to explore an in vitro model of a low-level infection of human mononuclear phagocytes with MAC and $H_{37}Ra$ and determine the extent of the lymphocyte dependent cytotoxicity of human monocytes and alveolar macrophages. Materials and Methods : The peripheral monocytes were prepared using the Ficoll gradient method from PPD positive healthy people and tuberculosis patients. The alveolar macrophages were prepared from PPD positive healthy people via a bronchoalveolar lavage. The human mononuclear phagocytes were infected at a low infection rate (bacilli:phagocyte 1:10) with MAC(Mycobacterium avium) and Mycobacterium tuberculosis $H_{37}Ra$. Non-adherent cells(lymphocyte) were added at a 10:1 ratio. After 1,4, and 7 days culture in $37^{\circ}C$, 5% CO2 incubator, the cells were harvested and inoculated in a 7H10/OADC agar plate for the CFU assay. The bacilli were calculated with the CFU/$1{\times}10^6$ of the cells and the cytotoxicity was expressed as the log killing ratio. Results : The intracellular killing of MAC and $H_{37}Ra$ within the monocyte was greater in patients with tuberculosis compared to the PPD positive controls (p<0.05). Intracellular killing of MAC and $H_{37}Ra$ within the alveolar macrophage appeared to be greater than that within the monocytes of the PPD positive controls. There was significant lymphocyte dependent inhibition of intracellular growth of the mycobacteria within the monocytes in both the controls and tuberculosis patients and within the macrophages in the controls(p<0.05). There was no specific difference in the virulence between the MAC and the $H_{37}Ra$. Conclusion : This study is an in vitro model of a low-level infection with MAC and $H_{37}Ra$ of human mononuclear phagocytes. The intracellular cytotoxicity of the mycobacteria within the phagocytic cells was significantly lymphocyte dependent. During the 7 days culture after the intracellular phagocytosis, the actual confinement of the mycobacteria was observed within the monocytes of tuberculosis patients and the alveolar macrophages of the controls as in the case of adding lymphocytes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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