A high concentration of myo-Inositol in rat's milk was observed (61-91mg. of myo-Inositol per 100g of milk) by gas-liquid chromatographic method, using a 3% SE-52 column. Feeding experiments showed that approximately 85% of myo-Inositol in milk was from dietary origin: the rest was considered to be synthesized by 1L-myo-Inositol-1-phosphate lyase. Results suggested that the biosynthesis was not sufficiently high to permit the maintenance of its myo-Inositol level in milk. However, study $using(^{14}C)-glucose$ injection into lactating female rats confirmed biosynthesis of myo-Inositol from glucose in mammary gland. This biosynthesis reached a maximum within an hour after $(^{14}C)-glucose$ injection intraperitoneally as lactose biosynthesis did. Study using $(^3H)-myo-Inositol$ confirmed that most of the myo-Inositol in milk was transported from blood plasma myo-Inositol against a concentration gradient. About four hours after the beginning of the injection of $(^{14}C)-glucose$, the specific radioactivity of myo-Inositol in milk was 8% of that of glucose in the blood. When $(^3H)-myo-Inositol$ was injected, the specific radioactivity of myo-Inositol in milk was about 26% of that of blood six hours after injection.
Previously characterized as a backward motor, myosin VI (MYO6), which belongs to myosin family, moves toward the minus end of the actin track, a direction opposite to all other known myosin members. Recent researches have illuminated the role of MYO6 in human cancers, particularly in prostate cancer. However, the role of MYO6 in glioma has not yet been determined. In this study, to explore the role of MYO6 in human glioma, lentivirus-delivered short hairpin RNA (shRNA) targeting MYO6 was designed to stably down-regulate its endogenous expression in glioblastoma cells U251. Knockdown of MYO6 significantly inhibited viability and proliferation of U251 cells in vitro. Moreover, the cell cycle of U251 cells was arrested at G0/G1 phase with the absence of MYO6, which could contribute to the suppression of cell proliferation. In conclusion, we firstly identified the crucial involvement of MYO6 in human glioma. The inhibition of MYO6 by shRNA might be a potential therapeutic method in human glioma.
A bacterial strain capable of metabolizing myo-inositol (MI) and converting to other substances was isolated from soil of orchard. The isolate, named YB-46, was grown on minimal medium supplemented with MI as the sole carbon source and was presumed to belonging to genus Enterobacter according to the 16S rDNA sequence. Escherichia coli transformant converting MI into unknown metabolites was selected from a metagenomic library prepared with fosmid pCC1FOS vector. Plasmid was isolated from the transformant, and the inserted gene was partially sequenced. From the nucleotide sequence, an iolG gene was identified to encode myo-inositol dehydrogenase (IolG) consisting of 336 amino residues. The IolG showed amino acid sequence similarity of about 50% with IolG of Enterobacter aerogenes and Bacillus subtilis. The His-tagged IolG (HtIolG) fused with hexahistidine at C-terminus was produced and purified from cell extract of recombinant E. coli. The purified HtIolG showed maximal activity at $45^{\circ}C$ and pH 10.5 with the highest activity for MI and D-glucose, and more than 90% of maximal activity for D-chiro-inositol, D-mannitol and D-xylose. $K_m$ and $V_{max}$ values of the HtIolG for MI were 1.83 mM and $0.724{\mu}mol/min/mg$ under the optimal reaction condition, respectively. The activity of HtIolG was increased 1.7 folds by $Zn^{2+}$, but was significantly inhibited by $Co^{2+}$ and SDS.
A long-term (26 weeks) feeding experiment was conducted to examine the essentiality and requirement of inositol in diets for olive flounder because no information is available in the species. Five casein-gelatin based semi-purified diets were formulated to contain four different levels of myo-inositol (0, 0+antibiotic, 400, 800, and 1600 mg/kg, designated as M0, M0+, M400, M800, and M1600, respectively). One (M0+) of the control diets contained tetracycline hydrochloride (0.4%, wt/wt) as an antibiotic to inhibit biosynthesis of inositol by micro-organism in intestine of fish. Olive flounder at the early juvenile stage (initial body weight 1.22 g) were randomly distributed into fifteen 35 L tanks (48 fish/tank) and fed with one of the experimental diets (3 replicates per diet). At the end of the feeding trial, the weight gain, feed intake, specific growth rate, and protein efficiency ratio of fish fed diets containing higher levels of myo-inositol (M800 & M1600) were significantly higher than those of fish fed the other diets (P<0.05). Feed conversion ratio, survival, hematocrits, and hemoglobin of fish fed experimental diets were not significantly different among all the fish groups. Whole body compositions of fish were not different except for lipid content. The lipid content was significantly different between M0 and M400 diet groups. These results indicate that juvenile olive flounder requires dietary supplementation of myo-inositol in diets for normal growth and its optimum level seems to be approximately 800 mg myo-inositol/kg diet.
Recently, the controversy continues as to whether maximum intercuspation of teeth should occur at the terminal hinge position(the condylar theory) or at the myo-co(the neuromuscular theory). There is also much controversy regarding the antero-posterior position of myo-co. The object of this study was to measure and compare with the positional relations of centric relation, centric occlusion and myo-co, and free-way space using Mandibular Kinesiograph and Myo-monitor in the 40 subjects without stomatognathic problems. Mandibular Kinesiograph(M.K.G.) was originally conceived as a research instrument to track mandibular movement and position. As its use in research progressed, its great diagnostic value became apparent in case by case. And Myo-monitor was developed as a means of applying the neuromuscular approach to occlusion. Thus the Myo-monitor technique is an intra-systemic approach to occlusal positioning using patient's own musculature, and Myo-monitor is used to relax the musculature by a light myopulse induced electronically. From this experiment, the following results were obtained. 1. The adaptive free-way space before muscle relaxation was an average of $1.6{\pm}60mm$, and the true free-way space after muscle relaxation using Myo-monitor was an average of $2.4{\pm}0.74mm$. 2. It took an average of $25{\pm}3.11$ minutes to relax the mandibular musculature by Myo-monitor and administration of 5mg. Diazepam and an average of $38{\pm}4.73$ minutes by Myo-monitor without administration of Diazepam. 3. Myo-co existed anterior to centric occlusion, with an average of $0.53{\pm}0.31$ mm, and centric relation existed posterior to centric occlusion, with an average of $0.57{\pm}0.58mm$ before muscle relaxation and with an average of $0.57{\pm}0.43mm$ after muscle relaxation. 4. Centric relation coincided with centric occlusion in 5 of 40 subjects(12.5%), and posterior to centric occlusion in the rest of cases (87.5%). 5. Myo-co existed anterior to centric occlusion in 38 of 40 subjects(95%), except 1 subject that coincided with centric occlusion and 1 subject that existed posterior to centric occlusion. 6. Myo-co and centric relation existed inferior to centric occlusion and the lateral displacement was various with individual difference. 7. The total displacement from centric occlusion to centric relation was an average of $0.74{\pm}0.64mm$ before muscle relaxation, and an average of $0.68{\pm}0.53mm$ after muscle relaxation, and the total displacement from centric occlusion to myo-co was an average of $1.07{\pm}0.58mm$.
Patel, A.;Ditiatkovski, M.;Kennedy, L.;Oglobline, A.;Choi, N.;Richardson, G.
Mass Spectrometry Letters
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v.7
no.1
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pp.12-15
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2016
Results of free and bound myo-inositol in infant formula (IF) are presented. Inositol was analyzed by HILIC ultra-performance liquid chromatography coupled with mass spectrometer. The levels of free myo-inositol in 27 Australian and 4 EU originated IF samples were 300-600 mg/kg of powder or 1.6-3.1 mg/100 kJ. The amount of bound inositol in lipid fraction of IF was, on average, 10% of free myo-inositol.
We aimed to determine the dietary myo-inositol (MI) requirements of Pacific white shrimp Litopenaeus vannamei. A basal diet was formulated without myo-inositol (M0) and a negative control diet (M0-) was prepared by adding tetracycline hydrochloride to the basal diet to prevent intestinal inositol synthesis. Five MI diets were prepared by adding MI at 300, 600, 900, 1,200 and 1,500 mg/kg to the basal diet (designated as, M300, M600, M900, M1200 and M1500, respectively). Triplicate groups of shrimp (initial body weight, 0.55±0.01 g) were fed one of the experimental diets for 42 days. The growth performance of shrimp in M0- group was significantly lower when compared to that of shrimp in M0, M1200 and M1500 groups. Feed efficiency was significantly improved in M1200 and M1500 groups when compared to the M0 and M0- groups. GPx activity was significantly higher in M1200 and M1500 groups compared to that in M0 and M0- groups. Therefore, a practical diet (over 240 mg/kg) meets the minimum MI requirements of Pacific white shrimp. However, the optimum dietary MI level would be potentially above 1,200 mg/kg for better feed utilization efficiency and antioxidant capacity of Pacific white shrimp.
Jang, Y. S.;Yoon, D. H.;Kim, T. H.;Cheong, I. C.;Jo, J. K.
Journal of Animal Science and Technology
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v.45
no.2
/
pp.169-182
/
2003
To understand the structure and regulation of bovine ADRP (Adipocyte Differentiation Related Protein) gene, we have isolated the genomic clone of bovine ADRP and determined its sequence. A genomic Southern blot analysis confirmed that ADRP gene is present as a single copy in bovine genome and the ADRP gene spans 12 kb. Bovine ADRP genomic clone, HwADRPg-1, had 8 exons and 7 introns, and all splicing sites conformed to the GT/AG rule with the exon-intron boundaries located exactly. Analysis of the upstream 649 bp of the sequence of HwADRPg-1 showed that it does not contain any canonical TATAA boxes; however Sp1 binding sites and CAAT boxes are found. The promoter contained potential binding sites for AP-1, AP-2 and several putative transcription factor binding sites. The 5'-flanking region of HwADRPg-1 contained muscle specific transcription activator Myo G and C/EBP (CCAAT/ enhancer binding protein) recognizing site. These results suppose that the Myo G transcription activator regulate the transcription of bovine ADRP gene in muscular tissue and its transcriptional activity was triggered by degree of muscular development. Our results provide the necessary analysis for other flanking sequences are needed in addition to the proximal cis elements of this promoter to confer adipocyte differentiation-dependent or growth-dependent transcriptional control.
The objective of this study was to examine the effect of vitamin B (pantothenic acid, folic acid, and myo-inositol) that was supplemented to embryo culture medium on in vitro development of parthenogenetically activated (PA) pig embryos. Cumulus-oocyte complexes derived from slaughtered ovaries were matured in TCM-199 supplemented with porcine follicular fluid, cysteine, pyruvate, EGF, insulin, and hormones (hCG and eCG) for the first 22 h and then further cultured in hormone-free medium for an additional 22 h. After maturation culture, metaphase II oocytes that extruded 1st polar body were electrically activated and treated with $5.0\;{\mu}g/ml$ cytochalasin B for 4 h. Then, PA embryos were cultured for 7 days in a modified NCSU-23 that was supplemented with pantothenic acid, myo-inositol, or folic acid at different concentrations ($3{\sim}300\;{\mu}M$) according to the experimental design. Myo-inositol added to culture medium did not show any beneficial or inhibitory effects on embryo cleavage and blastocyst formation. However, $300\;{\mu}M$ pantothenic acid significantly inhibited blastocyst formation compared to control (no addition) (24% vs. 36%, p<0.05). Folic acid ($300\;{\mu}M$) significantly (p<0.05) increased blastocyst formation (56%) compared to control (41%). Our results demonstrated that in vitro development of PA embryos was significantly influenced by vitamin B and addition of $300\;{\mu}M$ folic acid to culture medium improved in vitro development of pig PA embryos.
Skeletal myogenesis is a complex process that is finely regulated by myogenic transcription factors. Recent studies have shown that saturated fatty acids (SFA) can suppress the activation of myogenic transcription factors and impair the myogenic differentiation of progenitor cells. Despite the increasing evidence of the roles of miRNAs in myogenesis, the targets and myogenic regulatory mechanisms of miRNAs are largely unknown, particularly when myogenesis is dysregulated by SFA deposition. This study examined the implications of SFA-induced miR-183-5p on the myogenic differentiation in C2C12 myoblasts. Long-chain SFA palmitic acid (PA) drastically reduced myogenic transcription factors, such as myoblast determination protein (MyoD), myogenin (MyoG), and myocyte enhancer factor 2C (MEF2C), and inhibited FHL1 expression and myogenic differentiation of C2C12 myoblasts, accompanied by the induction of miR-183-5p. The knockdown of FHL1 by siRNA inhibited myogenic differentiation of myoblasts. Interestingly, miR-183-5p inversely regulated the expression of FHL1, a crucial regulator of skeletal myogenesis, by targeting the 3'UTR of FHL1 mRNA. Furthermore, the transfection of miR-183-5p mimic suppressed the expression of MyoD, MyoG, MEF2C, and MyHC, and impaired the differentiation and myotube formation of myoblasts. Overall, this study highlights the role of miR-183-5p in myogenic differentiation through FHL1 repression and suggests a novel miRNA-mediated mechanism for myogenesis in a background of obesity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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