우유중에 상당량 존재하는 myo-Inositol의 생성을 알아보기 위하여 3% SE-52를 충진시킨 gas-liquid chromatography에 의해 myo-Inositol의 정량을 행하고 이 myo-Inositol의 유래를 feeding 실험과 $(^{14}C)-glucose$와 (3H)-myo-Inositol을 쥐에 주사한 실험으로 알아 븐 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 쥐우유를 G.L.C. 방법으로 분석하여 우유 100gm.당 61-91mg.의 myo-Inositol (free)을 얻었다. 2. Feeding 실험 결과 우유 myo-Inositol의 85%는 diet에서 흡수되었고 나머지는 mammary gland에서 합성된 것으로 나타났다. 3. $(^{14}C)-glucose$에서 $(^{14}C)-myo-Inositol$ 생성은 lactose의 생성과 비슷하게 한시간이내에 최고에 달하였다. 4. $(^3H)-myo-Inositol$을 lactating rat에 주사하여 실험한 결과 우유 myo-Inositol의 대부분은 혈액 myo-Inositol에서 유래되었다. $(^{14}C)-glucose$를 주사한 후 우유중에 나타난 myo-Inositol의 비방사능(比放射能)은 4시간 후에 혈액 glucose의 8%였다.
Previously characterized as a backward motor, myosin VI (MYO6), which belongs to myosin family, moves toward the minus end of the actin track, a direction opposite to all other known myosin members. Recent researches have illuminated the role of MYO6 in human cancers, particularly in prostate cancer. However, the role of MYO6 in glioma has not yet been determined. In this study, to explore the role of MYO6 in human glioma, lentivirus-delivered short hairpin RNA (shRNA) targeting MYO6 was designed to stably down-regulate its endogenous expression in glioblastoma cells U251. Knockdown of MYO6 significantly inhibited viability and proliferation of U251 cells in vitro. Moreover, the cell cycle of U251 cells was arrested at G0/G1 phase with the absence of MYO6, which could contribute to the suppression of cell proliferation. In conclusion, we firstly identified the crucial involvement of MYO6 in human glioma. The inhibition of MYO6 by shRNA might be a potential therapeutic method in human glioma.
myo-Inositol (MI)을 대사하여 다른 물질로 전환하는 미생물을 과수원 토양으로부터 분리하였다. 분리균 YB-46은 유일한 탄소원으로 MI이 첨가된 배지에서 성장하였고 16S rDNA 염기서열에 따라 Enterobacter 속의 균주로 추정되었다. Fosmid pCC1FOS 벡터를 사용하여 제조된 거대 유전체 은행으로부터 MI을 미지의 대사 물질로 전환하는 Escherichia coli 형질전환주를 선발하였다. 이로부터 플라스미드를 분리하고 삽입된 유전자의 일부 염기서열을 결정한 결과 336 아미노 잔기로 구성된 myo-inositol dehytrogenase (IolG)를 암호화하는 iolG 유전자가 발견되었다. 분리균 YB-46의 IolG는 E. aerogenes와 Bacillus subtilis의 IolG와 약 50% 수준의 상동성을 보였다. 카르복실 말단에 hexahistidine이 연결되도록 제조한 His-tagged IoG (HtIolG)의 유전자를 재조합 대장균에서 발현하여 균체 파쇄액으로부터 HtIolG를 정제하였다. 정제된 HtIolG는 $45^{\circ}C$와 pH 10.5에서 최대 활성을 보였고 MI과 D-glucose에 대한 활성이 가장 높았으며 D-chiro-inositol, D-mannitol 및 D-xylose에도 90% 이상의 활성을 보였다. 최적 반응조건에서 MI을 기질로 하여 반응 동력학적 계수를 측정한 결과 $K_m$과 $V_{max}$가 1.83 mM과 $0.724{\mu}mol/min/mg$로 확인되었다. HtIolG의 활성은 $Zn^{2+}$에 의해 1.7배 증가하였으며, $Co^{2+}$와 SDS에 의해서는 크게 감소하였다.
본 연구는 넙치 치어에 있어서 수용성 비타민인 myo-inositol의 사료 내 적정 요구량을 평가하고, 결핍 시 어류에 미치게 되는 생리적 영향을 조사하고자 수행 되었다. 실험에 사용된 어류는 평균무게가 1.22 g인 넙치 초기치어를 사용하였으며, 총 15개의 35 L 원형수조에 각 수조당 48 마리씩(3반복구) 무작위 배치하였다. 반 정제 사료원을 기초로한 총 5개의 실험사료는 52%의 조단백질과 18.3 MJ/kg diet의 에너지함량을 갖도록 조성되었고 myo-inositol 함량을 각각 0, 0, 400, 800, 1600 mg/kg diet으로 기초사료에 첨가하였다(M0, M0+, M400, M800, M1600). 실험사료 중 M0+ 사료는 항생제인 tetracycline hydrochloride 및 (SIGMA, USA)를 실험사료에 0.4%로 첨가함으로써, myo-inositol이 넙치의 장내 미생물들에 의하여 합성되는지를 알아보기 위해 설계되었다. 26주간의 사료공급 실험결과, 사료 내 myo-inositol 첨가에 의한 어류의 성장률 결과들에서 유의적인 차이가 나타났으며, myo-inositol 결핍사료를 섭취한 실험어류에서 성장지연과 같은 결핍증상을 보였다. Hematocrit과 Hemoglobin을 측정한 혈액분석과 간 지방함량 분석에서는 실험구 사이에서 차이가 나타나지 않았으나, 전어체 지방분석 결과에서는 단지 M0와 M400 사이에서 유의적인 차이를 나타내었다. 초기 넙치 치어의 myo-inositol 요구량은 성장률을 기초로 한 broken-line regression model (Robbins, 1986)에서 반 정제사료를 기초로 하였을 때 800 mg/kg로 결정되었다.
Recently, the controversy continues as to whether maximum intercuspation of teeth should occur at the terminal hinge position(the condylar theory) or at the myo-co(the neuromuscular theory). There is also much controversy regarding the antero-posterior position of myo-co. The object of this study was to measure and compare with the positional relations of centric relation, centric occlusion and myo-co, and free-way space using Mandibular Kinesiograph and Myo-monitor in the 40 subjects without stomatognathic problems. Mandibular Kinesiograph(M.K.G.) was originally conceived as a research instrument to track mandibular movement and position. As its use in research progressed, its great diagnostic value became apparent in case by case. And Myo-monitor was developed as a means of applying the neuromuscular approach to occlusion. Thus the Myo-monitor technique is an intra-systemic approach to occlusal positioning using patient's own musculature, and Myo-monitor is used to relax the musculature by a light myopulse induced electronically. From this experiment, the following results were obtained. 1. The adaptive free-way space before muscle relaxation was an average of $1.6{\pm}60mm$, and the true free-way space after muscle relaxation using Myo-monitor was an average of $2.4{\pm}0.74mm$. 2. It took an average of $25{\pm}3.11$ minutes to relax the mandibular musculature by Myo-monitor and administration of 5mg. Diazepam and an average of $38{\pm}4.73$ minutes by Myo-monitor without administration of Diazepam. 3. Myo-co existed anterior to centric occlusion, with an average of $0.53{\pm}0.31$ mm, and centric relation existed posterior to centric occlusion, with an average of $0.57{\pm}0.58mm$ before muscle relaxation and with an average of $0.57{\pm}0.43mm$ after muscle relaxation. 4. Centric relation coincided with centric occlusion in 5 of 40 subjects(12.5%), and posterior to centric occlusion in the rest of cases (87.5%). 5. Myo-co existed anterior to centric occlusion in 38 of 40 subjects(95%), except 1 subject that coincided with centric occlusion and 1 subject that existed posterior to centric occlusion. 6. Myo-co and centric relation existed inferior to centric occlusion and the lateral displacement was various with individual difference. 7. The total displacement from centric occlusion to centric relation was an average of $0.74{\pm}0.64mm$ before muscle relaxation, and an average of $0.68{\pm}0.53mm$ after muscle relaxation, and the total displacement from centric occlusion to myo-co was an average of $1.07{\pm}0.58mm$.
Patel, A.;Ditiatkovski, M.;Kennedy, L.;Oglobline, A.;Choi, N.;Richardson, G.
Mass Spectrometry Letters
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제7권1호
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pp.12-15
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2016
Results of free and bound myo-inositol in infant formula (IF) are presented. Inositol was analyzed by HILIC ultra-performance liquid chromatography coupled with mass spectrometer. The levels of free myo-inositol in 27 Australian and 4 EU originated IF samples were 300-600 mg/kg of powder or 1.6-3.1 mg/100 kJ. The amount of bound inositol in lipid fraction of IF was, on average, 10% of free myo-inositol.
We aimed to determine the dietary myo-inositol (MI) requirements of Pacific white shrimp Litopenaeus vannamei. A basal diet was formulated without myo-inositol (M0) and a negative control diet (M0-) was prepared by adding tetracycline hydrochloride to the basal diet to prevent intestinal inositol synthesis. Five MI diets were prepared by adding MI at 300, 600, 900, 1,200 and 1,500 mg/kg to the basal diet (designated as, M300, M600, M900, M1200 and M1500, respectively). Triplicate groups of shrimp (initial body weight, 0.55±0.01 g) were fed one of the experimental diets for 42 days. The growth performance of shrimp in M0- group was significantly lower when compared to that of shrimp in M0, M1200 and M1500 groups. Feed efficiency was significantly improved in M1200 and M1500 groups when compared to the M0 and M0- groups. GPx activity was significantly higher in M1200 and M1500 groups compared to that in M0 and M0- groups. Therefore, a practical diet (over 240 mg/kg) meets the minimum MI requirements of Pacific white shrimp. However, the optimum dietary MI level would be potentially above 1,200 mg/kg for better feed utilization efficiency and antioxidant capacity of Pacific white shrimp.
ADRP 유전자가 24개월령 한우 등심조직에서 발현량이 급격히 증가하여 30개월령 등심조직에서는 발현량이 다소 감소하는 발현양상 분석결과로부터 이전 연구에서는 ADRP 유전자를 한우 성장단계 특이발현 유전자로 선정하였다. 본 연구에서는 ADRP 유전자의 발현조절 기작을 분석하기 위하여 promoter 영역을 포함하는 ADRP 유전자 전체영역을 cloning하였으며, 구조를 분석하고 promoter의 특성을 조사하였다. 한우 ADRP cDNA 단편을 probe로 합성하여 Southern blot 분석을 실시한 결과로부터 ADRP 유전자가 한우 genome 상에서 single copy로 존재하고 크기는 대략 12 kb에 해당하는 것을 확인하였다. Genomic DNA library screening을 실시하여 promoter 영역을 포함하는 ADRP 전체 유전자에 해당하는 clone을 확보하고 HwADRPg-1으로 명명한 후, 염기서열을 결정하고 분석하였다. 한우 ADRP 유전자, HwADRPg-1은 8개의 exon과 7개의 intron으로 구성되어 있으며 모든 exon-intron 경계는 GT/AG 원칙을 따르고 있었고, coding 영역은 7,633 bp로서 6개의 intron에 의해 7개의 exon으로 나누어져 있었다. HwADRPg-1의 promoter 영역에서는 TATAA box는 발견되지 않았으며, -70 위치에 근육 특이적 transcription activator인 Myo G 서열이 존재하였고, -629 위치에는 지방세포의 분화를 유도하는 것으로 알려진 C/EBP (CCAAT/enhancer binding protein) 서열이 존재하였다. HwADRPg-1의 조절영역에 있는 Myo G factor가 근육조직에서 ADRP 유전자가 발현될 수 있도록 하며, 근육의 발달정도를 신호로써 감지하여 근육조직에서 성장단계에 따른 ADRP 유전자의 발현량을 조절할 것으로 추정되고, 다른 종류의 지방세포 특이적인 전사인자 및 지방세포의 분화정도를 신호로 인식하는 전사단계 조절인자를 조사하기 위하여 promoter 영역의 추가분석이 이루어져야 할 것으로 사료된다.
The objective of this study was to examine the effect of vitamin B (pantothenic acid, folic acid, and myo-inositol) that was supplemented to embryo culture medium on in vitro development of parthenogenetically activated (PA) pig embryos. Cumulus-oocyte complexes derived from slaughtered ovaries were matured in TCM-199 supplemented with porcine follicular fluid, cysteine, pyruvate, EGF, insulin, and hormones (hCG and eCG) for the first 22 h and then further cultured in hormone-free medium for an additional 22 h. After maturation culture, metaphase II oocytes that extruded 1st polar body were electrically activated and treated with $5.0\;{\mu}g/ml$ cytochalasin B for 4 h. Then, PA embryos were cultured for 7 days in a modified NCSU-23 that was supplemented with pantothenic acid, myo-inositol, or folic acid at different concentrations ($3{\sim}300\;{\mu}M$) according to the experimental design. Myo-inositol added to culture medium did not show any beneficial or inhibitory effects on embryo cleavage and blastocyst formation. However, $300\;{\mu}M$ pantothenic acid significantly inhibited blastocyst formation compared to control (no addition) (24% vs. 36%, p<0.05). Folic acid ($300\;{\mu}M$) significantly (p<0.05) increased blastocyst formation (56%) compared to control (41%). Our results demonstrated that in vitro development of PA embryos was significantly influenced by vitamin B and addition of $300\;{\mu}M$ folic acid to culture medium improved in vitro development of pig PA embryos.
Skeletal myogenesis is a complex process that is finely regulated by myogenic transcription factors. Recent studies have shown that saturated fatty acids (SFA) can suppress the activation of myogenic transcription factors and impair the myogenic differentiation of progenitor cells. Despite the increasing evidence of the roles of miRNAs in myogenesis, the targets and myogenic regulatory mechanisms of miRNAs are largely unknown, particularly when myogenesis is dysregulated by SFA deposition. This study examined the implications of SFA-induced miR-183-5p on the myogenic differentiation in C2C12 myoblasts. Long-chain SFA palmitic acid (PA) drastically reduced myogenic transcription factors, such as myoblast determination protein (MyoD), myogenin (MyoG), and myocyte enhancer factor 2C (MEF2C), and inhibited FHL1 expression and myogenic differentiation of C2C12 myoblasts, accompanied by the induction of miR-183-5p. The knockdown of FHL1 by siRNA inhibited myogenic differentiation of myoblasts. Interestingly, miR-183-5p inversely regulated the expression of FHL1, a crucial regulator of skeletal myogenesis, by targeting the 3'UTR of FHL1 mRNA. Furthermore, the transfection of miR-183-5p mimic suppressed the expression of MyoD, MyoG, MEF2C, and MyHC, and impaired the differentiation and myotube formation of myoblasts. Overall, this study highlights the role of miR-183-5p in myogenic differentiation through FHL1 repression and suggests a novel miRNA-mediated mechanism for myogenesis in a background of obesity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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