We investigated the effect of nutritional and environmental factors on Ophiocordyceps longissima mycelial growth. The longest colony diameter was observed on Schizophyllum (mushroom) genetics complete medium plus yeast extract, Schizophyllum (mushroom) genetics minimal medium, and Sabouraud dextrose agar (SDA); however, malt-extract yeast-extract agar, SDA plus yeast extract, yeast-extract malt-extract peptone dextrose agar, SDA, oatmeal agar, and potato dextrose agar showed higher mycelia density. A temperature of $25^{\circ}C$ was optimum and 7.0 was the optimum pH for mycelial growth. Colony diameter was similar under light and dark conditions. Maltose and yeast extract showed the highest mycelial growth among carbon and nitrogen sources respectively. The effect of mineral salts was less obvious; however, $K_3PO_4$ showed slightly better growth than that of the other mineral salts tested. Among all nutrition sources tested, complex organic nitrogen sources such as yeast extract, peptone, and tryptone were best for mycelial growth of O. longissima. Ophiocordyceps longissima composite medium, formulated by adding maltose (2% w/v), yeast extract (1% w/v), and $K_3PO_4$ (0.05% w/v) resulted in slightly longer colony diameter. In vitro mycelial O. longissima growth was sustainable and the production of fruiting bodies could be used for commercial purposes in the future.
This study was carried out to get the basic data for the mycelial growth of Lentinus lepideus in liquid culture. The optimal temperature and initial pH of mycelial growth of Lentinus lepideus were $25^{\circ}C$ and pH 5.5, respectively. The optimal medium was YMG medium. Among the carbon sources tested, glucose was effected to the mycelial growth and optimal glucose concentration was 4% (w/v). As nitrogen sources, malt extract and yeast extract appeared to be favorable and optimal malt extract and yeast extract [ratio (w/w) of 1:1] concentration was 1.5% (w/v).
For effective exopolysaccharide production and mycelial growth by a liquid culture of Fomitopsis pinicola in an air-lift bioreactor, the culture temperature, pH, carbon source, nitrogen source, and mineral source were initially investigated in a flask. The optimal temperature and pH for mycelial growth and exopolysaccharide production were $25^{\circ}C$ and 6.0, respectively. Among the various carbon sources tested, glucose was found to be the most suitable carbon source. In particular, the maximum mycelial growth and exopolysaccharide production were achieved in 4% glucose. The best nitrogen sources were yeast extract and malt extract. The optimal concentrations of yeast extract and malt extract were 0.5 and 0.1%, respectively. $K_2HPO_4\;and\;MgSO_4{\cdot}7H_2O$ were found to be the best mineral sources for mycelial growth and exopolysaccharide production. In order to investigate the effect of aeration on mycelial growth and exopolysaccharide production in an air-lift bioreactor, various aerations were tested for 8 days. The maximum mycelial growth and exopolysaccharide production were 7.9 g/l and 2.6 g/l, respectively, at 1.5 vvm of aeration. In addition, a batch culture in an air-lift bioreactor was carried out for 11 days under the optimal conditions. The maximum mycelial growth was 10.4 g/l, which was approximately 1.7-fold higher than that of basal medium. The exopolysaccharide production was increased with increased culture time. The maximum concentration of exopolysaccharide was 4.4 g/l, which was about 3.3-fold higher than that of basal medium. These results indicate that exopolysaccharide production increased in parallel with the growth of mycelium, and also show that product formation is associated with mycelial growth. The developed model in an air-lift bioreactor showed good agreement with experimental data and simulated results on mycelial growth and exopolysaccharide production in the culture of F. pinicola.
Joo, Myoung Ho;Yeo, Yu Mi;Choi, Pil Son;Lee, Jae Hyeok;Yang, Kwang-Yeol;Lee, Young Jin
Korean Journal of Plant Resources
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v.31
no.6
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pp.695-703
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2018
Previously, we have reported a plant extract isolated from Lysimachia foenum gracum Herba as a new environment friendly biopesticide that has the mycelial growth inhibition effect on Magnaporthe oryzae, the pathogenic fungus of the rice blast disease. For the finding of additional biopesticide candidate, we tested the mycelial growth inhibitory effects about 700 species of plant extracts on PDA media. Among them, the extract of Anemarrhena asphodeloides showed prominent inhibitory effect of which $IC_{50}$ was $139.7{\mu}g/ml$. Mycelial radii of M. oryzae were measured on PDA medium containing the four organic solvent fractions isolated from total extract from A. asphodeloides. Ethyl acetate fraction showed the impressive inhibitory effect of $IC_{50}$, $54.12{\mu}g/ml$. In the subsequent rice field test for the total extract of A. asphodeloides, we obtained encouraging 62.0% control rate of rice blast disease without any phytotoxicity. It is almost equivalent to that of chemical pesticides implying the applicability of the extract as a new biopesticide. In further study, the analysis of active ingredients of the extract would be necessary for the development of a new biopesticide and for the verification of cellular mechanism by which the mycelial growth of M. oryzae inhibited.
In a previous study, an extract of Clavicorona pyxidata DGUM 29005 mycelia demonstrated an inhibitory effect against enzyme-associated perceptual disorders. We have attempted to determine whether this mycelial extract is also capable of inhibiting the activities of acetylcholinesterase (AChE) and ${\beta}$-secretase (BACE) activity. Butanol, ethanol, and water extracts of C. pyxidata DGUM 29005 mycelia were shown to inhibit AChE activity by 99.3%, 93.7%, and 91.7%, respectively. The inhibitory value of the butanol extract was more profound than that of tacrine (95.4%). The ethanol extract also exerted an inhibitory effect against BACE activity; this fraction may harbor the potential for development into a pharmocotherapeutic modality for the treatment of Alzheimer's disease (AD) patients. Rat pheochromocytoma PC12 cells in culture were not determined to be susceptible to the cytotoxic activity evidenced by the mycelial extract. The ethanol extract inhibited endogenous AChE activity in PC12 cellular homogenates, with an $IC_{50}\;of\;67.5{\mu}g/ml$, after incubation with intact cells, and also inhibited BACE activity in a dose-dependent fashion. These results suggest that the C. pyxidata mycelial extract has the potential to enhance cholinergic function and, therefore, may perform a function in the amelioration of the cholinergic deficit observed in cases of AD, as well as other types of age-associated memory impairment.
Jo, Woo-Sik;Park, Ju-Ri;Oh, So-Ra;Kang, Min-Gu;Kim, Woo-Hyun;Park, Seung-Chun
Journal of Mushroom
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v.14
no.1
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pp.6-13
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2016
This study was carried out to determine the basic mycelial culture conditions for Poria cocos growth. According to colony diameter and mycelial density, suitable media for mycelial growth were Malt yeast extract, Potato dextrose agar, Yeast extract agar, and Yeast malt agar. The optimum temperature for mycelial growth was between 25 and $35^{\circ}C$, and the optimum pH value was between 4 and 7. Carbon and nitrogen sources were fructose and yeast extract. The optimum C/N ratio was about 10 to 1 with 2% glucose. Other minor components for optimal growth were thiamine-HCl and nicotinamide as vitamins, acetic and lactic acid as organic acids, and $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ and $FeSO_4{\cdot}7H_2O$ as mineral salts.
Among the organic sources of nitrogen tested, yeast extract and soytone were excellent for the mycelial growth of Tricholoma matsutake DGUM 26001. The mycelial growth was enhanced, when yeast extract at the concentration up to 1.0% was added to the starchpyridoxine medium. After 30-day cultivation of the mycelia at $24^{\circ}C$ in the medium supplemented with yeast extract, 518 mg/50 ml of dry mycelia could be harvested.
Amyloid $\beta$-peptide (A$\beta$), which is a product of the proteolytic effect of $\beta$-secretase (BACE) on an amyloid precursor protein, is closely associated with Alzheimer's disease (AD) pathogenesis. There is sufficient evidence to suggest that a BACE inhibitor may reduce A$\beta$ levels, thus decreasing the risk of AD. In a previous study, an extract of Clavicorona pyxidata DGUM 29005 mycelia was found to inhibit the production of a soluble $\beta$-amyloid precursor protein (s$\beta$APP), A$\beta$, and BACE in neuronal cell lines. We sought to determine whether this mycelial extract exerts the same effect in human rhabdomyosarcoma A-204 and rat pheochromocytoma PC-12 cells. We found that the production of A$\beta$ decreased in a dose-dependent manner in the presence of the mycelial extract and that the concentration of A$\beta$ never exceeded $50{\mu}g/ml$. The presence of sAPP was detected in every culture medium to which the mycelial extract had been added and its concentration remained the same, regardless of the concentration of the extract used. Endogenous $\beta$-secretase activity in A-204 and PC-12 cellular homogenates also decreased in the presence of this extract. These cells, in culture, were not susceptible to the cytotoxic activity of the mycelial extract.
A new synthetic medium was developed for the submerged mycelial cultures of Phellinus linteus. The medium for maximum mycelial growth of Phellinus linteus (3 days incubation, 28$^{\circ}C$, pH 5) consisted of (per 1 L): glucose, 90 g peptone, 10 g soluble starch, 10 g yeast extract, 3 g KH2PO4, 1 g MgSO4.7H2O, 1 g and CaCl2, 0.1 g. The concentrations of glucose, peptone, yeast extract, KH2PO4, MgSO4.7H2O, and CaCl2 were examined in the ranges of 10~90 g/L, 0~10 g/L, 0~15 g/L, 0~2 g/L, 0~1 g/L, and 0~0.5 g/L, respectively. The dry weight of mycelium in 3 days increased to 16.79 mg/mL using the new synthetic medium. The optimum temperature for mycelial growth of Phellinus linteus was 28$^{\circ}C$. The concentrations of KH2OP4, CaCl2, and yeast extract, which gave the maximum mycelial growth of Phellinus linteus, existed in the concentration ranges examined in this study. But, in the cases of other compositions (MgSO4.7H2O, peptone, and glucose), the mycelial growth of Phellinus linteus increased with the concentration in the ranges.
Hong, Seong-Cheol;Choi, Myung-Suk;Lim, Bu-Kug;Lee, Jong-Yoon;Rinker, Danny L.;Yang, Jae-Kyung
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.12
no.5
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pp.349-354
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2004
The extracts of Pinus densiflora sawdust by n hexane, ethyl acetate and methanol solvent were investigated to identify their mycelial growth inhibition against Lentinus edodes. The yields of n hexane soluble fraction, ethyl acetate-soluble fraction, and methanol soluble fraction from P. densiflora sawdust were obtained 1.36%, 2.21% and 4.03% using organic solvent, respectively. The mycelial growth inhibition of L. edodes was the greatest for n hexane extract, ranging from 36.5% to 47.6% at concentrations of 125 ppm to 1,000 ppm, with the values for all concentrations significantly different from one another. After direct extraction of P. densiflora sawdust using n hexane, ethyl acetate and methanol, each extract was separated into three fractions by silica gel column chromatography and then the fractions were isolated on the values of $R_f$ by thin layer chromatography. The mycelial growth inhibition against L. edodes was recognized in the fractions II (33.5%) and III (37.6%) of n hexane extract, the fraction II (21.4%) of ethyl acetate extract and the fraction II (26.4%) of methanol extract. The fractions III of n-hexane extract showed the highest growth inhibition among the nine fractions of the organic solvent extract.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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