Chung Ok Choi;Chung Gil Lee;Sung Man Cho;Jin Soo Na;Soo Hwan An;Joon Hun Kwon
한국가금학회지
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제15권3호
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pp.207-210
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1988
뉴켓슬병바이러스(NDV)인 LaSota 주를 SPF 발육난의 요막강내에 증식시켜 순수 정제한 것을 BALB/c 흰쥐에 면역시킨 후 추출한 비강세포와 흰쥐 골수암세포와의 융합방법에 의하여 NDV에 특이하게 작용하는 단크론성항체(MCA)를 생산하는 3주의 Hybridoma틀 작성하였다. 이 3주의 MCA는 모두 IgG형에 속하였으며 흰쥐 복강 내에 접종하여 생산된 복수항체의 항체가는 간접형광항체법으로 $10^3$-$10^6$에 달하였고 약독 및 강독 NDV에 모두 동일한 수준으로 작용하였다. 중화능은 인정되지 않았고 3주중 1주만이 별구응집 억제능을 약하게 나타냈다. 이 MCA를 이용하여 간접형광항체법으로 인공 감염시킨 닭에서 NDV항원 검출을 시도한 결과 기관점막을 비롯한 각종 장기의 도말표본에서 접종 3일 후부터 뚜렷한 검출이 가능하였다.
Sophoricoside was isolated as the inhibitor of IL-5 bioactivity from Sophora japonica (Leguminosae). It has been reported to have an anti-inflammatory effect on rat paw edema model. To develop as an anti-allergic drug, genotoxicity of sophoricoside was investigated in bacterial and mammalian cell system such as Ames bacterial test, chromosomal aberration assay, Comet assay and MOLY assay. In Ames test, sophoricoside of 5000 ∼ 313 $\mu\textrm{g}$/plate concentrations was not shown significant mutagenic effect in Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535 and TA1537 strains. The cytotoxicity (IC$\_$50/ and IC$\_$20/) of sophoricoside was determined above the concentration of 5000 $\mu\textrm{g}$/ml in Chinese hamster lung (CHL) fibroblast cell and L5178Y mouse lymphoma cell line. At concentrations of 5000, 2500 and 1250 $\mu\textrm{g}$/ml, this compound was not induced chromosomal aberration in CHL fibroblast cell in the absence and presence of S-9 metabolic activation system. Also in comet assay, DNA damage was not observed in L5178Y cell line. Also in MOLY assay, sophoricoside of 5000 ∼ 313 $\mu\textrm{g}$/ml concentrations was not shown significant mutagenic effect in absence of S-9 metabolic activation system. However, the higher concentration of 5000 and 2500 $\mu\textrm{g}$/ml of sophoricoside induced the increased mutation frequency (MF) in the presence of S-9 metabolic activation system. From these results, no genotoxic effects of sophoricoside observed in bacterial systems whereas, genotoxic effects observed in mammalian cell systems in the presence of metabolic activation system. These results suggested that the metabolite(s) of sophoricoside can cause some genotoxic effects in mammalian cells.
The viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV) has an extensive host range, and infects farmed and wild fish inhabiting both freshwater and marine ecosystems. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is highly useful in diagnosing viral hemorrhagic septicemia. However, ELISA shows high, non-specific background reaction with fish antibodies. In this study, we optimized the antigen and antibody concentrations used for detecting specific antibodies in VHSV-infected olive flounder to reduce non-specific binding, and improve the sensitivity of ELISA. The results suggested that OD (optical Density) values were valid when ELISA was performed with $0.1{\mu}g/well$ of virus, involving blocking with blocking buffer (Roth, Roti-Block), 1:300-1:600 dilution with flounder antisera, and 1:1000 dilution with anti-flounder IgM and HRP-conjugated goat anti-mouse IgG for detecting the VHSV antibody in flounder sera. Furthermore, 11 different VHSV strains isolated in Korea from 2012 to 2016 were used to infect the fish. The results showed no correlation between viral pathogenicity and antibody production. This research is a basic study on the application of antibody detection in the diagnosis of viral hemorrhagic septicemia in the olive flounder.
The aim of this study was to elucidate the role of the integrin-linked kinase (ILK) gene in development of human bladder transitional cell carcinoma (BTCC). Expression of ILK protein and ILK mRNA in 56 cases of human BTCC tissue and in 30 cases of adjacent normal bladder tissue was detected by immunohistochemistry S-P and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), respectively. Four specific miRNA RNAi vectors targeting human ILK were synthesized and transfected into BIU-87 cells by liposome to obtain stable expression cell strains. The influence of ILK on proliferation of BTCC was detected by MTT, FCM on athymic mouse tumorigenesis. The positive rate of ILK protein in BTCC tissue (53.6%) was much higher than adjacent normal bladder tissue (10.0%) (p<0.05). Similarly, expression of ILK mRNA in BTCC tissue ($0.540{\pm}0.083$) was significantly higher than in adjacent normal bladder tissue ($0.492{\pm}0.070$) (p<0.05). MTT showed that the proliferation ability of miRNA-ILK transfected group was clearly decreased (p<0.05), the cell cycle being arrested in G0/G1-S, an tumorigenesis in vivo was also significantly reduced (p<0.05). ILK gene transcription and protein expression may be involved in the development of BTCC, so that ILK might be the new marker for early diagnosis and the new target for gene treatment.
The purpose of this study was to investigate the gene profiles that were up- or down-regulated in the livers of high-fat diet-induced obese mice and $db_-/db_-$ mice with deficient leptin receptor. C57/BL6 normal mice and $db_-/db_-$ mice, respectively, were divided into two groups and fed a standard or high-fat diet for four weeks. Liver weight was unchanged in the normal mice but the high-fat diet led to a 10% weight increase in the $db_-/db_-$mice. Adipose tissue mass increased by about 88% in the normal mice that were fed a high-fat diet and by about 17% in the $db_-/db_-$mice on the high-fat diet. In terms of serum lipids, total cholesterol significantly increased in mice on the high-fat diet. Microarray analysis was carried out using total RNA isolated from the livers of standard or high-fat diet-fed mice of the normal and $db_-/db_-$ strains. The change of gene expression was confirmed by RT-PCR. About 1.6% and 6.8% of total genes, respectively, showed different expression patterns in the normal mice fed the high-fat diet and $db_-/db_-$ mice. As a result of microarray, many genes involved in metabolism and signal pathways were shown to have different expression patterns. Expression of Mgst3 gene increased in the livers of normal and $db_-/db_-$ mice that were fed a high-fat diet. Wnt7b and Ptk9l were down-regulated in the livers of the normal mice and $db_-/db_-$ mice that were fed a high-fat diet. In conclusion, a high-fat diet induced obesity and affected gene expression involved in metabolism and signal pathway.
Hong, Yi-Fan;Kim, Hangeun;Kim, Hye Rim;Gim, Min Geun;Chung, Dae Kyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제24권12호
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pp.1629-1635
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2014
It is known that lactic acid bacteria (LAB) have many beneficial health effects, including anti-oxidative activity and immune regulation. In this study, the immune regulatory effects of Lactobacillus sakei and Lactobacillus plantarum, which are found in different types of kimchi, were evaluated. L. sakei and its lipoteichoic acid (LTA) have greater immune stimulating potential in IL-12, IFN-${\gamma}$, and TNF-${\alpha}$ production as compared with L. plantarum in an in vitro condition. On the other hand, L. plantarum is assumed to repress the Th1 immune response in murine experiments. After being injected with LPS, L. plantarum-fed mice maintained a healthier state, and the level of TNF-${\alpha}$ in their blood was lower than in other bacterial strainfed mice and in the LPS-only control mice. Additionally, IL-12 production was significantly decreased and the production of IL-4 was greatly increased in the splenocytes from L. plantarum-fed mice. Further experiments revealed that the pre-injection of purified LTA from L. plantarum (pLTA), L. sakei (sLTA), and S. aureus (aLTA) decreased TNF-${\alpha}$ and IL-4 production in LPS-injected mice. Mouse IL-12, however, was significantly increased by aLTA pre-injection. In conclusion, the L. sakei and L. plantarum strains have immune regulation effects, but the effects differ in cytokine production and the regulatory effects of the Th1/Th2 immune response.
Park, Da Min;Bae, Jae-Han;Kim, Min Soo;Kim, Hyeontae;Kang, Shin Dal;Shim, Sangmin;Lee, Deukbuhm;Seo, Jin-Ho;Kang, Hee;Han, Nam Soo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제29권11호
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pp.1729-1738
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2019
In sourdough fermentation, lactic acid bacteria perform important roles in the production of volatile and antimicrobial compounds, and exerting health-promoting effects. In this study, we report the probiotic properties and baking characteristics of Lactobacillus plantarum SPC-SNU 72-2 isolated from kimchi. This strain is safe to use in food fermentation as it does not carry genes for biogenic amine production (i.e., hdc, tdc, and ldc) and shows no β-hemolytic activity against red blood cells. The strain is also stable under simulated human gastrointestinal conditions, showing tolerance to gastric acid and bile salt, and adheres well to colonic epithelial cells. Additionally, this strain prevents pathogen growth and activates mouse peritoneal macrophages by inducing cytokines such as tumor necrosis factor-α, interleukin (IL)-6, and IL-12. Furthermore, the strain possesses good baking properties, providing rich aroma during dough fermentation and contributing to the enhancement of bread texture. Taken together, L. plantarum SPC-SNU 72-2 has the properties of a good starter strain based on the observation that it improves bread flavor and texture while also providing probiotic effects comparable with commercial strains.
Salmonella Enteritidis (SE) has been a major causative agent of food-borne human disease due to consumption of contaminated eggs and poultry meat. To prevent SE infection in poultry, and therefore minimize human infections, vaccination with either killed or live SE vaccine is suggested. We evaluated a newly developed killed bacterin using a representative SE isolate in Korea. Among pool of SE isolates, two highly virulent isolates (the one isolate from chicken, the other from human) were selected by measuring mortality in mouse and chickens administered. The chickens were injected intramuscularly with killed vaccine and were challenged with highly virulent SE strain 3 week after vaccination. The recovered colony count (cfu/g) of spleen and cecal content in the vaccinated groups was reduced compared with those of the unvaccinated control group. The antibody level in the vaccinated groups was higher at 3 week post vaccination. These results indicate that vaccination with killed vaccine was effective in preventing the infection of virulent SE. Further study for a large number of layers should be needed for the effect of egg production, SE shedding in feces, persistence of antibody level.
Cryptosporidium parvum oocysts were isolated from a child suffering from acute gastroenteritis and successfully passaged in a calf and mice (designated hereafter SNU-H1) in the Republic of Korea; its molecular genotype has been analyzed. The GAG microsatellite region was amplified by a polymerase chain reaction (PCR), with a 238 base pair product, which is commonly displayed in C. parvum. The isolate was shown to be a mixture of the genotypes 1 (anthroponotic) and 2 (zoonotic). To study its infectivity in animals, 2 calves and 3 strains of mice were infected with the SNU-H1; in these animals, the propagation of both genotypes was successful. In immunosup-pressed (ImSP) BALB/c and C57BU6 mice the number of oocysts decreased after day 10 post-infection (PI); but in ImSP ICR mice, they remained constant until day 27 PI. The results show that both the C. parvum genotypes 1 and 2 can be propagated in calves and ImSP mice.
Various related factors and tissue changes in vitro and in vivo were observed to investigate the efficacy of HYBH on atopic dermatitis. The results are described below. HYBH improved the atopic dermatitis symptoms by naked eye examination, and significantly decreased dermatitis clinical index at 14 weeks. HYBH significantly decreased CD4+/CD45+, CD4+, CD8+, CD3+/CD69+ immune cell ratios in PBMC by 28%, 16%, 30%, 26% and 22% respectively. HYBH significantly decreased CD11b+/Gr-1+, CD3 immune cell ratios in dorsal skin by 35.3% and 67.5% respectively. HYBH significantly decreased the expression of IL-4 and IFN-${\gamma}$ in spleen by 23% and 15% respectively. HYBH significantly decreased the production rate of IL-5, IL-13 and histamine in serum by 17%, 23%, and 8.8% respectively and increased IL-17 production by 17%. HYBH significantly decreased immunoglubulins IgG1 and IgE production in serum. The results above indicated that treatment of HYBH improved atopic dermatitis symptoms by anti-oxidant activity and immune modulation activity as a clinical evidence. Also, different fermentation conditions using various microbial strains should be accumulated as the clinical evidence for broad application in the future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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