Brain, heart, liver, lung, kidney and thymus etc. 12 organs were removed and homogenized from Dawley-Sprague rats after suffocation. After fractionation of the tissue cytosols, enzymatic activities of the key enzymes in metabolic inositol phosphates cycle, PLC, IPSK and Ins(1,4,5) P35-phosphatase, were measured respectively. Hybridoma monoclones producing anti-lP3K murine monoclonal antibodies were obtained by the fusion of SP2/Ag 0-14 and spleen cells of mouse immunized with purified 53KDa IPSK, screening and cloning procedures. 18 cloned hybridoma cells were obtained, background due to nonspecific binding was very low with 10 clones. These Abs were purified from ascitic fluids by using affi-gel 15, and determined subtype of Abs. When immunoreactivities for rat tissues IP3K were exercised by adding the mixed Abs of 19Gl and 19G2b, they showed an overall similarity with noncompetitive inhibition. Brain tissue has high sensitivity for anti-lP3K Ab, whereas heart tissue has very low activity. In kinetic parameters Km value was 1.58 mM and Vmx value was 5.41umol/min/ml, respectively Only one form of 40 KDa IPSK was detected in heart tissues, however rat brain contains at least three immunologically distinct IP3K (53, 51 and 40 KDa) in western blot analysis. Of them 53 KDa protein was major enzyme in enzymatic activity. Northern blot analysis with 32P-labeled CDNA probe which encodes 1.8 Kb IPSK gene was performed. These results suggest that IPSK are regulated at transcriptional level during rat tissue development.
Kim, Kyoung-Shin;Moon, Sung-Sikm;Kim, Byoung-Soo;Kang, Jung-Soo
Journal of Haehwa Medicine
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v.20
no.1
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pp.11-23
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2011
Systemic Lupus Erythematosus(SLE) is an autoimmune disease invading the skin, joint, kidney, intestinal membrane, neurosystem and other organs. SLE is an autoimmune disease characterized by immune dysregulation resulting in the production of antinuclear antibodies(ANA), generation of circulating immune complexes, and activation of the complement system. In Korean medicine, lupus can be classified as acute arthritis, reddish butterfly erythema, asthenic disease, edema and so on. The cause and procedure of the diseases are flourishing noxious heat, excessive fire due to deficiency of yin, blood stasis due to stagnation of qi, internal movement of the liver-wind, congenital deficiency, exhausted vital-qi, which are treated by clearing away heat and cooling the blood, nourshing yin and extinguishing fire, treating flatulence and activating blood circulation, nourishing the blood to expel wind, invigorating the liver and kidney, invigorating qi and replenishing the blood. To experimentally examine the influence of Insam-Buja-Tang (Ginseng & Aconiti Extract, IBT) on the outbreak and development of lupus, lupus induce MRL/MpJ-Faslpr lupus-prone mice model was used. As IBT was orally administrated to a lupus model mouse, various tests such as the weight, urine protein, renal function, Lymph cell test of the spleen, Cytokine expression, histopathological analysis of kideny were performed to see the influence on the kidney and whether it work effectively on the immune function. The main purpose of this study is to evaluate the effect of IBT on MRL/MpJ-Faslpr lupus-prone mice model. The effect of IBT on MRL/MpJ-Faslpr lupus-prone mice that can have autoimmune disease similar to SLE in human was evaluated after IBT per oral in the present study.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.25
no.6
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pp.1024-1030
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1996
Capsaicin (8-methyl-N-vanillyl-6-nonenamide: CAP) is a mai or ingredient of hot pepper that has been used as a spicy food additive, preservative, and medicine. In this study, we evaluated the effect of dietary CAP on the selected proto-oncogene(c-jun, c-myc, H-ras, erbB, p53) expressions in various tissues of mice. Male ICR mice were divided into four groups and fed the experimental diets containing CAP at the levels of 0, 5, 20 and 100ppm for four weeks. Steady state RNA levels in various tissues were measured by slot blot hybridization assay. C-jun expression level was enhanced in stomach tissue from mice fed 20ppm CAP and significantly reduced from mice fed 100ppm CAP. The c-jun expression levels were differentially altered in organ-specific manner, Tumor suppressor gene p53 expression level appeared to be slightly increased in the liver from mice fed 20ppm CAP. These results suggested that dietary CAP differentially modulates c-jun and p53 expression in various organs.
Lim, Won-Suk;Kim, Chang-Hyun;Kim, Ji-Young;Do, Byung-Rok;Kim, Eo Jin;Lee, Ai-Young
Biomolecules & Therapeutics
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v.22
no.4
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pp.328-333
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2014
Vitiligo is a pigmentary disorder induced by a loss of melanocytes. In addition to replacement of pure melanocytes, cocultures of melanocytes with keratinocytes have been used to improve the repigmentation outcome in vitiligo treatment. We previously identified by in vitro studies, that adipose-derived stem cells (ADSCs) could be a potential substitute for keratinocytes in cocultures with melanocytes. In this study, the efficacy of pigmentation including durability of grafted melanocytes and short-term safety was examined in the nude mouse and Sprague-Dawley rat after grafting of primary cultured human melanocytes, with or without different ratios of primary cultured human ADSCs. Simultaneous grafting of melanocytes and ADSCs, which were separately cultured and mixed on grafting at the ratios of 1:1, 1:2, or 1:3, showed better efficacy than that of pure melanocytes. Grafting of melanocytes cocultured with ADSCs resulted in a similar outcome as the grafting of cell mixtures. Skin pigmentation by melanocytes : ADSCs at the ratios of 1:1 and 1:2 was better than at 1:3. No significant difference was observed between the 1-week and 2-week durations in coculturing. Time-course microscopic examination showed that the grafted melanocytes remained a little longer than 6-week post-grafting. No inflammatory cell infiltration was observed in the grafted skin and no melanocytes were detectable in other organs. Collectively, grafting of melanocytes and ADSCs was equally safe and more effective than grafting of melanocytes alone. Despite the absence of significant differences in efficacy between the group of 1:1 and that of 1:2 ratio, 1:2 ratio for 1-week coculturing may be better for clinical use from the cost-benefit viewpoint.
Kim, Sung-Ho;Oh, Heon;Lee, Song-Eun;Kim, Soon-Tae;Jo, Sung-Kee;Hyun, Byung-Hwa;Ryu, Si-Yun;Daynes, Raymond A.
Korean Journal of Veterinary Pathology
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v.1
no.1
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pp.1-6
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1997
The cellularity and composition of the spleen lymph node thymus and peripheral blood and tempo of regeneration were studied at various time points after syngeneic bone marrow transplantation(BMT) in C3H/Hen mice. Significant depression of absolute lymphocyte count was noted on week 1 after lethal whole-body irradiation and BMT. In comparison to the lymph node thymus and spleen had an rapid regeneration of cellularity. The distinct cell populations($CD4^+,\;CD8^+,\;CD28^+,\;B220^+) have determined in the lymphoid tissue of mice subjected to irradiation. The relative representation of these subpopulations was significantly different from that in nonirradiated control. $CD4^+\;and\;CD8^+$ cells were present in very low numbers whereas the $B220^+$ cells reached more than normal range at 2 weeks after BMT. The number of $CD4^+$ cells returned to normal relatively soon than $CD8^+$ cell. At week 4 after BMT, the cellularity and composition of spleen lymph node and peripheral blood lymphocyte reached about 50% of the normal range therefore we can choose this time point for the other tests of immune function after BMT.
The subacute toxicity of xylooligosaccharide (XO) was evaluated in SD rats. Groups of 60 male and 60 female rats were orally administered with 0, 333, 1000 or 3000 mg/kg of XO for 13 weeks. The changes of body weight, food and water consumption were investigated for 17 weeks, while heamatological values and histopathological findings were investigated at the end of the 13 weeks and 17 weeks including 4 weeks of recovery periods. No death and toxic effects were observed during the test periods. There were statistically significant changes in several parameters, but these change had no direct relationship to dosage. Clinical changes were general occurrence and no specific toxicity was related to XO. Gross necropsy and histopathology revealed that no target organs were found in the treated mouse with XO. According to the results, no-observed effect level of XO is estimated to be above 3000 mg/kg.
This study was conducted to detect the toxoplasma specific-DNA in circulating blood and organs collected from slaughtered pigs at slaughtering house and experimentally infected pigs with Toxoplasma gondii tachyzoites by polymerase chain reaction(PCR), and also PCR was applied to diagnose for acute phase of swine toxoplasmosis as a newly developed diagnostic test. The sensitivity of oligonucleotide primer, T-1 & T-2, designed from toxoplasma B1 gene amplification method was compared with Tp parasite detection by mouse inoculation(MI). On the other hand, latex agglutination test(LAT) was conducted to detect the serum antibodies comparing with the detection of toxoplasma by PCR and MI. The results obtained were summarized as follows. PCR was able to determine at the lowest level of $10^0/ml$ T. gondii in blood samples which were blended with a serial diluted T gondii in vitro. On the other hand, $10^2/5g$ of T gondii could detect from a variety of tissues including lung, diaphragm, liver, heart, spleen and brain in vitro. The primer was proved to specifically determine T gondii in blood and tissues in vitro but it did not detect Neospora caninum used as a negative control. DNA of T. gondii was effectively extracted by freezing, thawing and grinding twice both tissues mixed with T gondii in vitro and in experimentally infected pig's tissues. PCR detected specific DNA in the blood of experimentally infected pigs at 108 hrs and 120 hrs post-infection, it was the same time that the pigs showed fever and parasitaemia. In case of tissue, specific DNA was, however, detected only lung from experimentally infected pigs. Even though the duration of acute phase was from 3 to 7 days post-infection, but the latex agglutination test (LAT) results appeared from 8 days post-infection. A comparison of sensitivity in determining T gondii in blood samples between PCR and MI, PCR positive rate ranged from 25 to 33.3%, but that of MI covered from 75 to 100%.
Ochratoxin A was produced from Aspergillus ochraceus ATCC 18472 which was then orally administered into the experimental mice to study the toxic levels of ochratoxin A. AELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) method which is more rapid and safe than conventional analytical method, was developed by using ochratoxin A antibody. This method was successfully used to measure the levels of ochratoxin Ain blood, liver and kidney of mice. In order to produce a large amount of ochratoxin A to study toxicity in the mice, Aspergillus ochraceus ATCC 18412 was incubated in the rice medium and as a result 0.5 g of ochratoxin A form rice medium (kg) was produced after extraction and purification Feed consumption and gain in body weight of mice with ochratoxin A at a level of $10 \mu\textrm{g}/g$ body weight was significantly (p<0.05) reduced as compared with control during period of 3 weeks. Ochratoxin A-BSA conjugate was made by putting 13 mole of ochratoxin A on I mole of BSA. This conjugate was used to develop ELISA method. The minmum detection level of ochratoxin A by established ELISA method was 0.5 ppb. After oral adminstraton of ochratoxin A dose of $10\;\mu\textrm{g}/g$ every two day for 3 weeks, concentration of ochratoxin A was measured in the blood, liver and kidney by ELISA method. The level of ochratoxin A was $11\;\mu\textrm{g}/dl,\;0.9 \mu\textrm{g}/g\;and\;3.7\;\mu\textrm{g}/g$ in the blood, liver and kidney, respectively.
Pivotal roles of steroid hormones in uterine endometrial function are well established from the mouse models carrying the null mutation of their receptors. Literally androgen belongs to male but interestingly it also detected in female. The fluctuations of androgen levels are observed during reproductive cycle and pregnancy, and the functional androgen receptor is expressed in reproductive organs including uterus. Using high throughput methodology, the downstream genes of androgen have been isolated and revealed correlations between other steroid hormones. In androgen-deficient mice, uterine responses to exogenous gonadotropins are impaired and the number of pups per litter is reduced dramatically. As expected androgen has important role in decidual differentiation through AR. It regulates specific gene network during those cellular responses. Recently we examined the effects of steroid hormonal complex containing high level of androgen. Interestingly, on the contrary to the androgen-alone administration, the hormonal complex did not disturb the decidual reaction and the pubs did not show any morphological abnormality. It is suspected that the complexity of communication between other steroid hormone and their receptors are the reasons. In summary, androgen exists in female blood and it suggests the importance of androgen in female reproduction. However, the complex interactions with other hormones are not fully understood compared with estrogen and progesterone. The further studies to evaluate the possible role of androgen are needed and important to provide the in vivo rational for the prevention of associated pregnancy complications and help human's health.
PARK JONG-HWAN;LEE YEONHEE;MOON ENPYO;SEOK SEUNG-HYEOK;BAEK MIN-WON;LEE HUI-YOUNG;KIM DONG-JAE;KIM CHANG-HWAN;PARK JAE-HAK
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.3
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pp.603-608
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2005
We recently isolated a novel probiotic strain, Lactobacillus fermentum PL9005 (KCCM-10250), from infant feces and showed that it had a potential immunoenhancing effect. In the present study, a safety assessment of the bacteria was performed using a BALB/c mouse model. Mice were administered with L. fermentum PL9005 daily for 28 days. There were no detectable changes in body weight, feed intake, or clinical signs, and no significant difference in hematological parameters or blood biochemistry between the L. fermentum PL9005-fed and control groups. Bacterial translocation was detected in the mesenteric lymph nodes, liver, and spleen of some mice with and without L. fermentum PL9005 feeding, however, the organisms were not related to ingestion of L. fermentum PL9005; this was confirmed by PCR using a species-specific primer. No gross lesions were detected in the liver, spleen, or intestine of L. fermentum PL9005-fed or control mice. Mucosal thickness in the ileum, cecum, and colon of L. fermentum PL9005-fed mice was not significantly different from that of corresponding organs in control mice. No inflammation or epithelial cell degeneration in the intestines was observed in any mice. These results indicate that ingestion of L. fermentum PL9005 is safe in mice and can be applied in the functional food market.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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