Species belonging to the genus Fusarium are widely distributed and cause diseases in many plants. Isolation of fungal strains from air or cereals is necessary for disease forecasting, disease diagnosis, and population genetics [1]. Previously we showed that Fusarium species are resistant to toxoflavin produced by the bacterial rice pathogen Burkholderia glumae while other fungal genera are sensitive to the toxin, resulting in the development of a selective medium for Fusarium species using toxoflavin [2]. In this study, we have tried to elucidate the resistant mechanism of F. graminearum against toxoflavin and interaction between the two pathogens in nature. To test whether B. glumae affects the development of F. graminearum, the wild-type F. graminearum strains were incubated with either the bacterial strain or supernatant of the bacterial culture. Both conditions increased the conidial production five times more than when the fungus was incubated alone. While co-incubation resulted in dramatic increase of conidial production, conidia germination delayed by either the bacterial strain or supernatant. These results suggest that certain factors produced by B. glumae induce conidial production and delay conidial germination in F. graminearum. To identify genes related to toxoflavin resistance in F. graminearum, we screened the transcriptional factor mutant library previously generated in F. graminearum [3] and identified one mutant that is sensitive to toxoflavin. We analyzed transcriptomes of the wild-type strain and the mutant strain under either absence or presence of toxoflavin through RNAseq. Expression level of total genes of 13,820 was measured by reads per kilobase per million mapped reads (RPKM). Under the criteria with more than two-fold changes, 1,440 genes were upregulated and 1,267 genes were down-regulated in wild-type strain than mutant strain in response to toxoflavin treatment. A comparison of gene expression profiling between the wild type and mutant through gene ontology analysis showed that genes related to metabolic process and oxidation-reduction process were highly enriched in the mutant strain. The data analyses will focus on elucidating the resistance mechanism of F. graminearum against toxoflavin and the interaction between the two pathogens in rice. Further evolutionary history will be traced through figuring out the gene function in populations and in other filamentous fungi.
Journal of The Korean Society of Inherited Metabolic disease
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v.15
no.3
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pp.127-137
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2015
Purpose: The main aim of this study was to compare and analyze expression profiles of microRNAs (miRNAs) to establish miRNA signature of Fabry nephropathy related epithelial mesenchymal transition (EMT). Methods: Expression profiles of miRNAs in kidney tissue samples and cell lines from normal and Fabry disease mouse model were examined by miRNA expression microarray analysis followed by quantitative real-time polymerase chain reaction analysis (qRT-PCR). Results: In the miRNA expression microarray analysis of Fabry mouse kidney tissues compared to wild type mouse, 5 and 3 miRNAs among 1,247 miRNAs examined were up- and down-regulated, respectively. Among them, miR-149-5p was down-regulated about 2-fold in Fabry kidney samples. The down-regulations of miR-149-5p were observed in kidney tissues of under 35 week-old-Fabry mice. However, this down-regulation was not observed in kidney tissues of 42 week-old Fabry mice. In SV40 MES 13 cells, mouse mesangial cells, treated with globotriaosylsphingosine (lyso-Gb3), miR-149-5p was also downregulated. The down-regulation of miR-149-5p induced up-regulation of its target genes related to EMT. Conclusion: The miRNA expression array and qRT-PCR results show that miR-149-5p expression was decreased in kidney tissues of Fabry mice compared to wild type mice under 35 weeks of age. Along with the observation of miR-149-5p expression in Fabry disease cell models, these results indicate that the down-regulated miR-149-5p were related to the biological response of mesangial cells to lyso-Gb3 and also have influence to the transcriptional up-regulation of its target genes. These results suggest miR-149-5p might play important roles in the Fabry nephropathy.
This study was conducted to evaluate roughage to concentrate ratio on the changes of productivity and metabolic profiling in milk. Six lactating Holstein cows were divided into two groups, T1 group was fed low-concentrate diet (Italian ryegrass to concentrate ratio = 8:2) and T2 group was fed high-concentrate diet (Italian ryegrass to concentrate ratio = 2:8). Milk samples were collected and its components and metabolites were analyzed by 1H-NMR (Nuclear magnetic resonance). The result of milk components such as milk fat, milk protein, solids-not-fat, lactose and somatic cell count were not significantly different between two groups. In carbohydrate metabolites, trehalose and xylose were significantly higher (P<0.05) in T1 group, however lactose was not significantly different between two groups. In amino acid metabolites, glycine was the highest concentration however, there was no significant difference observed between two groups. Urea and methionine were significantly higher (P<0.05) in the T2 group. In lipid metabolites, carnitine, choline and O-acetylcarnitine there were no significant difference observed between the two groups. In benzoic acid metabolites, tartrate was significantly higher (P<0.05) in T2 group. In organic acid metabolites, acetate was significantly higher (P<0.05) in T1 group and fumarate was significantly higher (P<0.05) in T2 group. In the other metabolites, 3-methylxanthine was only significantly higher (P<0.05) in T2 group and riboflavin was only significantly higher (P<0.05) in T1 group. As a result, milk components were not significantly different between two groups. However, metabolites concentration in the milk was significantly different depends on roughage to concentrate ratio.
Chicken eggs undergo various physiological changes during egg maturation. To study genes associated with the egg maturation in pre-ovulation (immature) and post-ovulation (mature), we compared gene expression patterns between in the immature egg and mature egg using RNA sequencing data. Mature and immature eggs were obtained from a Heuksaek Jaerae-jong of Korean native chicken. Total RNAs obtained from the eggs were sequenced by Illumina HiSeq 2000 platform, and the generated sequence reads were mapped to Galgal4 reference sequence assembly using Tuxedo Protocol. From the comparison of the RNA sequencing data, 315 genes were differentially expressed between mature and immature eggs, and 46 genes were only detected in immature egg. Further gene ontology (GO) analysis was performed for the differentially expressed genes using DAVID, showing that 29 and 28 GO terms were independently clustered from mature and immature, respectively. From those clustered GO terms, genes related to germ cell development, sex differentiation and defense response to bacterium were mainly expressed in the immature egg, while genes related to regulation of apoptosis, steroid metabolic process and lipid homeostasis were mainly detected in the mature egg. Our results could contribute to understand egg maturation before and after ovulation, and develop genetic markers for improving egg quality and productivity.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.29
no.1
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pp.71-80
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2012
Vinca alkaloids produced from Catharanthus roseus are one of the most important natural product drugs in treatments of human cancers. These anticancer drugs are derived from coupling of the two monomeric indole alkaloids, catharanthine and vindoline. In order to investigate vindoline biosynthesis, tabersonine-$CD_3$ 1a is synthesized to use as a deuterium labeled precursor, which is distinguished clearly from the natural counterpart. We show that these deuterium labeled tabersonine 1a are successfully incorporated into the vindoline biosynthetic pathway to yield three deuterated vindoline intermediates. 16-Hydroxytabersonine-$CD_3$ (m/z 356) 2a, 16-Methoxytabersonine-$CD_3$ (m/z 370) 3a, 16-Methoxy-2,3-dihydro-3-hydroxytabersonine-$CD_3$ (m/z 388) 4a are produced from the cell suspension culture measured by UPLC/MS at 5 and 13 days after feeding tabersonine. The conversion rates from 1a to 2a and 2a to 3a are fast, whereas that from 3a to 4a is much slower. This indicates that the rate determining step among the first three vindoline biosynthesis is the last step. As a result of the slow conversion rate from 3a to 4a, the accumulation level of 16-Methoxytabersonine-$CD_3$ 3a is significantly increased up to 13 days. The accumulation ratio among 2a, 3a and 4a is 1, 2 and 0.1 at 5 days. However, the peaks of desacetoxyvindoline-$CD_3$ 5a, deacetylvindoline-$CD_3$ 6a and vindoline-$CD_3$ 7a are not found from the cell extracts even after 13 days of incubation which may indicate no presence of their corresponding enzymes.
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