본 연구는 피부색이 칙칙하거나 색소침착이 생성된 30~55세 여성을 대상으로 풀러린 함유 세럼을 제조하여 멜라닌 색소 및 피부톤 개선을 통한 미백 효능을 알아보고, 화장품 소재로서 그 가능성을 제시하고자 하였다. 실험방법은 대조군(B)의 플러린 미함유 세럼과 시험군(A)의 풀러린 0.1% 함유 세럼 2 그룹으로 나누어 8주간 연구를 진행하였다. 육안평가와 피부측정(피부 멜라닌 지수, 피부색 밝기)은 제품사용 전, 제품사용 4주 후, 8주 후 시점에서 시행하였으며, 설문평가와 안전성평가를 시행하였다. 분석 결과, 피부색 육안평가는 제품사용 8주 후 시점에서 최대감소율이 시험군(A)가 0.37%로 나타났으나 유의한 차이는 없었으며, 군간 비교 결과에서도 유의한 차이는 나타나지 않았다. 피부 멜라닌 지수 시점별 변화 측정과 군간 비교 결과에서는 제품사용 후 모든 시점(4주 후, 8주 후)에서 시험군(A)가 각각 유의하게 감소하였다(p<0.05, p<0.05). $L^*value$(피부색 밝기) 측정 결과는 제품사용 8주후 시점에서 시험군(A)가 유의하게 증가(개선) 하였으며(p<0.05), 군간 비교 결과에서도 시험군(A)가 모든 시점(4주 후, 8주 후)에서 유의하게 증가(개선)하였다(p<0.05). 또한 효능에 관한 설문 평가 결과 '피부색개선' 항목은 제품사용 8주 후 시점에서 시험군(A) 사용부위가 개선되었다는 긍정적 응답률이 높게 나타났으며, 안전성평가 결과에서는 이상반응이 관찰되지 않았다. 결론적으로 풀러린을 0.1% 함유한 세럼은 멜라닌 색소의 개선과 피부톤(피부색 밝기)개선 효과를 나타내어 미백 효능 및 화장품 소재로서의 가능성을 확인할 수 있었다. 따라서 향후 본 연구를 기초로 효과적인 적용방법 및 화장품제형에 대한 지속적이고 체계적인 연구가 이루어져야 할 것이다.
리소좀(lysosome)은 진핵세포에서 에너지 대사 및 세포 내 소화 작용에 관여하는 세포 소기관으로 protease, nuclease, glycosidase, lipase, phosphatase 들이 다수 존재한다. 우리는 선행 연구결과들을 통해 난백 리소좀의 멜라닌 색소 탈색능을 보고하였다[8]. 그러나 B16F10 melanocyte 세포주에서 난백 리소좀에 의한 멜라닌 함량 변화 및 피부장벽 조절 연구는 거의 보고되지 않았다. 따라서 우리는 계란 난백(egg white)으로부터 추출한 lysosome-related organelle extract (LOE)에 의한 세포 내 멜라닌 함량 변화 및 피부장벽 강화 효과를 규명하고자 하였다. 먼저 LOE의 미백 효능을 확인하기 위해 B16F10 세포주를 이용하여 세포독성 평가를 진행하였다. B16F10 세포주에서 LOE에 의한 세포독성은 0에서 20 mg/mL 농도에서 관찰되지 않았으나, 40 mg/mL 부터 세포독성이 관찰되어 이후 모든 실험에서 최대 농도값을 20 mg/mL로 설정하였다. 먼저 LOE를 이용한 melanin contents assay 결과, 음성 대조군인 α-MSH 처리군 대비 LOE 처리군 5, 10, 20 mg/mL 농도에서 61.5 ± 4.0%, 61.4 ± 7.3%, 58.3 ± 8.3%로 세포 내 멜라닌 함량이 감소되는 것을 확인하였고, 20 mg/mL 농도 조건에서 MITF 발현 억제도 관찰하였다. LOE의 피부 장벽에 미치는 영향을 관찰하기 위해 각질형성세포주(HaCaT)를 이용하여 TEER (trans-epithelial electrical resistance) assay를 수행한 결과, LOE에 의해 농도 의존적으로 TEER 저항값이 증가하여 LOE가 피부장벽 강화에도 효과가 있음을 알 수 있었다. 또한 피부 염증 유발을 위한 TNF-α 처리조건에서도 LOE는 TEER 저항값을 증가시켜 염증 유발 조건에서도 LOE에 의해 피부장벽이 정상적으로 회복되었음을 알 수 있었다. 마지막으로 cell migration assay를 통해 LOE에 의한 세포이동 촉진 효과를 관찰한 결과, LOE는 세포분열 및 세포이동을 촉진시켰다. 위 결과들을 통해 LOE는 미백 기능 뿐 아니라 피부재생 및 피부장벽 강화에도 효과를 나타내는 소재이며, 효소안정화 및 제형화 기술이 접목된다면 향후 새로운 미백 기능성 화장품 소재로도 개발될 수 있을 것이다.
In this study, we present evidence that cotreatment of aloesin and arbutin inhibits tyrosinase activity in a synergistic manner by acting through a different action mechanism. Aloesin or arbutin similarly inhibited enzyme activity of human- and mushroom-tyrosinases with an IC50 value of 0.1 or 0.04 mM, respectively. Lineweaver-Burk plots of the enzyme kinetics data showed that aloesin inhibited tyrosinase activity noncompetitively with a Ki value of 5.3 mM, whereas arbutin did it competitively (Maeda, 1996). We then examined whether cotreatment of these agents inhibits the tyrosinase activity in a synergistic manner. The results showed that 0.01 mM aloesin in the presence of 0.03 mM arbutin inhibited activity of mushroom by 80% of the control value and the reverse was also true. The inhibitory effects were calculated to be synergistic according to the B rgi method. Taken together, we suggest that aloesin along with arbutin inhibits in synergy melanin production by combined mechanisms of noncompetitive and competitive inhibitions of tyrosinase activity.
The primary objective of this study was to assess the in vitro melanogenesis inhibitory effects of methanolic extracts of the edible and medicinal lichens, Umbilicaria (Gyrophora) esculenta and Usnea longissima. The quantities of the total phenolic compounds of methanolic extract of the two lichen extracts were determined to be 1.46% and 2.62%, respectively. In order to evaluate the antioxidative effects of the extracts, we also measured electron donating abilities (EDA) and lipid peroxidation rates. The EDA values measured by the reduction of 1.1'-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) were 72.8% and 80.7% for the extracts, with $SC_{50}$ (median scavenging concentration) values of $1.29{\pm}0.05\;mg/ml$ and $1.03{\pm}0.06\;mg/ml$, respectively. The rates of inhibition of lipid peroxidation using linoleic acid were 92.1% and 97.3% for the extracts, with $IC_{50}$ (median inhibitory concentration) values of $0.57{\pm}0.05\;mg/ml$ and $0.53{\pm}0.06\;mg/ml$, respectively. The inhibitory rates of the extracts against tyrosinase were 67.4% and 84.8%, respectively. The extracts were shown to reduce melanin formation in human melanoma cells. Melanin contents in the samples treated with 0.01% and 0.1% U. esculenta were 47.1% and 31.2%, respectively, and those treated with 0.01% and 0.1% Usnea longissima were 51.1% and 34.9%, respectively, whereas a value of 54.0% was registered when ascorbic acid was utilized as a positive control. In addition to direct tyrosinase inhibition, it was determined that the lichen extracts affected the activity of tyrosinase via the inhibition of tyrosinase glycosylation. As a result, the methanolic extracts of U. esculenta and Usnea longissima evidenced melanogenesis inhibitory effects, which occurred via multiple routes.
The aim of this study was to measure the hair melanins of various colors and to find the relationship between the quantity of melanins and hair color phenotypes in alpacas. According to the Munsell color system, 3 healthy alpacas were selected for each of the 22 different hair color phenotypes (66 alpacas altogether). Alpaca hair was taken from the lateral thoracic region and then dissolved with different solutions to obtain melanins. The values of alkali-soluble melanins (ASM), eumelanin (EM) and pheomelanin (PM) were measured by spectrophotometric assay, and labeled as Sp.ASM, Sp.EM and Sp.PM, respectively. Data were analyzed using SPSS11.5 software. Results showed that average Sp.ASM and Sp.PM were increased as the color deepened from white to black, ranging from 0.500 to 4.543 for Sp.ASM and from 0.268 to 1.457 for Sp.EM. However, average Sp.PM had no such apparent relationship with color. Based on the value of Sp.ASM and EM, 7 hues were produced and gray was a single hue. Most of the data were in a normal distribution (p>0.10). ANOVA analysis showed that mean values of Sp.ASM, Sp.EM and Sp.PM were significantly different (p<0.05). The results also showed that Sp.ASM was positively correlated with Sp.EM but the correlation between Sp.ASM and Sp.PM was not significantly different from 0. It is concluded that EM is the major constituent of alpaca hair melanin; there is a significant correlation among ASM, EM and alpaca hair colors, and EM is the most reliable parameter for distinguishing these groups.
The EtOAc fraction of Lespedeza cyrtobotrya showed mushroom tyrosinase inhibitory and radical scavenging activities. Four active compounds were isolated based on Sephadex LH-20 chromatography and HPLC, and the structures were elucidated, on the basis of their LC-MS and NMR spectral data, as 2-(2,4-dihydroxyphenyl)-6-hydroxybenzofuran (1), eriodictyol-7-O-glucopyranoside (2), haginin A (3), and dalbergioidin (4), respectively. Compound (1) showed mushroom tyrosinase inhibitory activity with an $IC_{50}$ value of $5.2\;{\mu}M$ and acted as a competitive inhibitor. Furthermore, $37.3\;{\mu}M$ of compound 1 reduced 50% of the melanin content on human melanoma (MNT-1) cells. The radical scavenging activities of compounds 1, 2, 3, and 4 were shown to have $IC_{50}$ values of 11.0, 24.5, 9.0, and $36.5\;{\mu}M$, respectively, in an ABTS system and $IC_{50}$ values of 42.7, 36.0, 37.7, and $61.7\;{\mu}M$, respectively, in a DPPH system. The mushroom tyrosinase inhibitory activity of the EtOAc fraction of Lespedeza cyrtobotrya was contributed by compounds 1, 3, and 4, and its radical scavenging activity was contributed by compounds 1-4.
In this study we investigated antioxidant activity of against several free radicals and skin whitening effect of 70% ethanol extract (leaf extracts and branch/stem mixed) of Lindera obtusiloba BL. Antioxidant activity was assessed by DPPH, superoxide radical and hydroxyl radical assays. The Lindera obtusiloba BL. extract had antioxidant activity dose dependently with an ${IC}_{50}$ value of 243.14 and 181.10 ${\mu}g$/ml for DPPH, 165.77 and >1500 ${\mu}g$/ml for non-enzymatic system of superoxide radical assay, 35.47 and >100 ${\mu}g$/ml for enzymatic system of superoxide radical assay, 1.21 mg/ml for hydroxyl radical assay. In addition we tested tyrosinase inhibition activity and melanin contents on B16 melanoma F10. B16 melanoma cell was treated by such sample as 1, 5, 10 and 50 ${\mu}g$/ml for 72 hr and tyrosinase inhibition was tested. Melanogenesis was inhibited to 22% at the dose of 50 ${\mu}g$/ml and tyrosinase was inhibited to 45.2% at the same dose. In conclusion Lindera obtusiloba BL had potent antioxidant activity and inhibitory activity of tyrosinase and melanin formation. It could be developed as the health functional food and functional cosmetic resources.
The objective of this study was to assess the effect of preventing pigmentation caused by external stimuli, promoting skin regeneration and whitening of the skin composition containing complex extract of Dendrobii Caulis and Centella asiatica (CE). We evaluated cell viability, tyrosinase and melanin inhibition activity, skin irritation test, and skin moisturizing and regenerative effects using CE. As a result of the tyrosinase inhibitory activity, 100 ㎍/mL CE (35.31%) showed higher value than kojic acid (21.32%). The results of melanin synthesis inhibition in B16F10 melanoma cells after treatment with α-melanocyte stimulating hormone showed a similar level of activity to that of arbutin, indicating an excellent whitening effect. In clinical test of the skin composition containing CE, we confirmed that CE is non-irritated in human skin primary irritation test as well as have a high skin moisturizing and regenerative effect. From these results, we suggested the CE not only prevents skin damage and pigmentation caused by external stimuli but has remarkable skin brightening activity and skin regeneration effect.
In this study we tried to find the skin color of Koreans according to the change of seasons, and to the degree of make-up used by men and women. in order to furnish foundation data that could be used in the cosmetics and clothes industries. The skin color was measured with Minolta's Chrome Meter CR-200 in seven parts of the body with Munsell's hue, value, chroma. The difference in skin color in men and women's groups, and the difference in skin color of each group in March and in September were treated with SPSS's Anova and t-test. 1. In both seasons. March and September, a big difference could be observed between the two groups (men and women's). The body was more yellowish than the face. The men's group had a reddish skin color than the women's groups. In all groups we could observe a big difference in color between seasons, and in March, the skin was more reddish whereas in September, it became more yellowish. 2. As for the value, both in March and in September, the hairline was darkest, and the lightest areas were the jaw and the inner arm which showed a similar value. The group of women who put on make-up had the highest value, whereas the men's group showed the lowest result in value. We suppose it to be due to the fact that Putting on make-up prevented the melanin pigmentation by blocking the UV rays. 3. We could observe the highest value in chrome in the chin area both in March and in September, and there was no significant change. There was a difference in men and women's groups, but not a significant one within the women's groups.
본 연구에서는 락툴로스(lactulose) 51.67%와 갈락토올리고당(galactooligo saccharides) 15.8%로 이루어진 듀올리고(DuOligo)의 섭취를 통하여 피부개선 효능을 조사하였다. 40~60 대의 건강한 여성 37명을 대상으로 대조군(덱스트린)과 실험군(듀올리고군)으로 나누어 각각 8주 동안 섭취 후, 수분보유량, 경표피수 분손실량, 멜라닌지수, 홍반지수와 주름지수를 측정하였다. 그 결과, 듀올리고 섭취 8주 후의 수분 보유량은 대조군에 비하여 수분 보유량이 38.22% 유의적으로 증가하였다(p < 0.01). 대조군의 경피수분손실량은 8주후 $3.39g/h/m^2$로 감소한데 비하여 듀올리고군의 경피수분손실량은 8주후 $5.32g/h/m^2$ 감소하였다. 대조군의 멜라닌 지수는 시간에 따라 그 값이 유의적으로 증가하였으나, 듀올리고군의 멜라닌 지수는 시간에 따른 유의적 차이가 나타나지 않았다. 또한, 듀올리고군은 대조군에 비하여 주름의 총 넓이, 총 주름의 길이, 주름의 수 및 주름의 깊이가 확연하게 감소하였다(p < 0.05). 듀올리고의 피부개선 기능성 소재로서의 응용 가능성을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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