To examine the fate of the injected peritoneal mast cells (PMCs), we injected PMCs (500 or $10^5$) derived from WBB6F1-green fluorescent protein(GFP) mice into stomach wall of $WBB6F1-W/W^v$ mice. When 500 PMCs were injected, the proportion of alcian blue $(AB)^+$ mast cells to $GFP^+$ mast cells in the muscle was 25.0% on day 1, but decreased to 0.9% on day 7. Then, it increased to 98.2% on day 35. In contrast,$GFP^+$ mast cells in the mucosa were not detectable on day 1, 3, and 7 after injection. On day 35, the proportion of $AB^+$ mast cells to $GFP^+$ mast cells in the mucosa was 97.0%. When $10^5$ PMCs were injected, the proportion of $AB^+$ mast cells to $GFP^+$ mast cells in the muscle was more than 88.2%, and that in the mucosa was more than 86.3% from day 1 through 35 after injection. These results indicated that percentage of degranulation on day 1, 3, 7, 14 after injection of 500 PMCs was significantly higher than that after injection of $10^5$ PMCs. Futhermore, when 500 PMCs were injected, protease expression phenotypes of PMCs changed from day 14 after injection. When $10^5$ PMCs were injected, protease expression phenotype of PMCs did not change after injection. Such degranulated PMCs may acquire the new phenotype and adapt the new tissue.
본 연구는 그라비올라(Annona muricata)가 인간 비만세포(LUVA 세포)에서 immunoglobulin(Ig) E-매개 알러지 반응에 어떠한 효과를 나타내는지 확인하는데 목적이 있다. 그라비올라 잎 추출물(GLE)의 항알러지 효과를 알아보기 위해 IgE로 감작된 비만세포에 다양한 농도의 추출물을 처리하였다. 비만세포의 IgE-매개 탈과립 실험 결과, GLE가 LUVA 세포에서 histamine, β-hexosaminidase, TNF-α, IL-4 및 IL-6의 방출을 유의하게 억제하였다. 또한 GLE는 IgE 유도에 의한 Lyn과 Syk의 인산화를 억제하였고 그 하위 경로에 있는 MAPK의 활성을 억제하였다. 이상의 결과는 GLE가 비만세포 활성화 및 알러지 반응을 억제할 수 있음을 보여주고, 이는 GLE가 항알러지 효과를 통하여 기능성 화장품 소재로서의 활용이 가능함을 시사한다.
The anti-allergic actions of the leaves of Castanea crenata (Fagaceae) were studied. The water extract demonstrated potent anti-allergic actions in in vivo and in vitro experiments. The oral or intraperitoneal administration of the extract (100 or 200 mg/kg) caused a significant inhibition of the 48 hr-PCA (up to 90%) and the vascular permeability induced by histamine or serotonin in rats (about 80%). The anaphylactic release of ${\beta}$-hexosaminidase for RBL-2H3 cells was also significantly inhibited by the extract in as dose-dependent manner with an IC50 value of 230 $\mu\textrm{g}$/ml. The activity-guided fractionation of the extract, based on the determination of inhibitor effect upon the release of ${\beta}$-hexosaminidase, led to the isolation of quercetin as an active principle responsible for the inhibition of degranulation.
Lee, Kyoung-Pil;Kang, Saeromi;Noh, Min-Soo;Park, Soo-Jin;Kim, Jung-Min;Chung, Hae Young;Je, Nam Kyung;Lee, Young-Geun;Choi, Young-Whan;Im, Dong-Soon
Biomolecules & Therapeutics
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제23권1호
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pp.45-52
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2015
To explore the anti-allergic and anti-inflammatory effects of extracts of Petasites genus, we studied the effects of s-petasin, a major sesquiterpene from Petasites formosanus (a butterbur species) on asthma and peritonitis models. In an ovalbumin-induced mouse asthma model, s-petasin significantly inhibited the accumulations of eosinophils, macrophages, and lymphocytes in bronchoalveolar fluids. S-petasin inhibited the antigen-induced degranulation of ${\beta}$-hexosamidase but did not inhibit intracellular $Ca^{2+}$ increase in RBL-2H3 mast cells. S-petasin inhibited the LPS induction of iNOS at the RNA and protein levels in mouse peritoneal macrophages. Furthermore, s-petasin inhibited the production of NO (the product of iNOS) in a concentration-dependent manner in the macrophages. Furthermore, in an LPS-induced mouse model of peritonitis, s-petasin significantly inhibited the accumulation of polymorpho nuclear and mononuclear leukocytes in peritoneal cavity. This study shows that s-petasin in Petasites genus has therapeutic effects on allergic and inflammatory diseases, such as, asthma and peritonitis through degranulation inhibition in mast cells, suppression of iNOS induction and production of NO in macrophages, and suppression of inflammatory cell accumulation.
세포내 $Ca^{{+}{+}}$의 증가는 비만세포에서 수용체 활성을 거치지 않고 탈과립을 유도한다. 괴화는 천연 염색 재료로 사용되고 있으며, 또한 항염증 작용과 $Fc{\varepsilon}RI$와 IgE 가교에 의한 항알레르기 효능도 보고되었다. 이번 연구에서 비만세포에서 $Ca^{{+}{+}}$ 유입에 의해 생산되는 알레르기 매개물에 대한 괴화 추출물의 조절 기능을 보고한다. 괴화 추출물은 A23187에 의해 유도되는 IL-4와 TNF-${\alpha}$의 생산과 탈과립을 저해하였다. 또한 괴화 추출물은 DNFB로 유도한 알레르기 피부염의 동물 모델에서 알레르기 반응을 억제하였다. 괴화추출물 50 mg/kg을 경구투여 또는 도말을 한 경우, DNFB를 단독으로 처리한 군보다 IL-4, TNF 그리고 IFN-${\gamma}$와 같은 염증성 사이토카인의 생산량이 감소하였다. 또한 괴화 추출물을 처리한 경우 혈청 내 IgE의 함량이 DNFB를 단독으로 처리한 군보다 감소하였다. 괴화 추출물을 처리한 군에서의 비장과 림프절의 무게도 DNFB를 단독으로 처리한 군보다 감소하였다. 이러한 결과를 토대로 괴화는 비만세포에서 $Fc{\varepsilon}RI$ 자극뿐만 아니라 $Ca^{{+}{+}}$의 유입에 의한 항알레르기 효능이 있다는 것을 보고한다.
We investigated the effects of butanol fraction of Asterias amurensis (BFA) on the anti-allergic activity. BFA inhibited both cyclooxygenase-2 dependent prostaglandin $D_2$ and 5-lipoxygenase dependent leukotriene $C_4$ generation in a concentration-dependent manner with $IC_{50}$ values of 174.6 and 22.2 ${\mu}g$/ml, respectively. In addition, BFA also inhibited the degranulation in a dose dependent manner. Furthermore, oral administration of BFA inhibited IgE-mediated passive cutaneous anaphylaxis in mice. These results suggested that BFA may be useful in regulating mast cell-mediated allergic diseases.
Mast cells play an important role in the pathophysiologlcal changes observed in acute cutaneous and inflammatory diseases In order to see whether Kum-Hwang-San has an influence on mast cell- mediated immediate cutaneous reactions, the author has undertaken an animal study. Ears of mice were treated with a compound 48/80 solution topically at 30 min after the cutaneous application of Kum-Hwang-San. At each point, an ear swelling response was measured with a digimatic thickness micrometer. Ear swelling response induced by compound 48/80 was significantly suppressed dose-dependently by Kum-Hwang-San 30 min before topical application as compared with that in nonapplicated control mice, and the value returned to normal levels by 120 min. Compound 48/80- induced mast cell degranulation by Kum-Hwang-San was also remarkably decreased in accordance with the suppression in ear swelling response. Kum-Hwang-San dose-dependently inhibited histamine release from the rat peritoneal mast cells activated by compound 48/80. Another way to test acute cutaneous reaction is to induce passive cutaneous anaphylactic reaction. Kum-Hwang-San significantly inhibited passive cutaneous anaphylactic reaction activated by anti-dinitrophenyl IgE on both topical application and intradermal injection. Kum-Hwang-San also inhibited histamine release from the rat peritoneal mast cells induced by anti-DNP IgE. This study provides evidence that Kum-Hwang-San will be beneficial in the treatment of acute cutaneous diseases.
폐흡충 감염시 일어나는 비만세포 (mastcell)의 반응이 감염경로에 따라 어떠한 영향을 미치는지 알아보고자 비호적숙주인 마우스에 폐흡충의 피낭유충 10개를 피하 또는 경구 감염시킨 후 감염 시기별로 진피 내에 동원되는 비만세포의 숫적 변동 및 탈과립률 (%)을 경시적으로 관찰하였다. 피하로 감염시킨 마우스는 감염 1주 ($38.3/\textrm{mm}^2$)부터 진피 내 비만세포의 수가 PBS주입군 (대조군) (범위: $19.4-25.1/\textrm{mm}^2$)에 비해 유의한 수준 (P<0.05)으로 증가하기 시작하여 전 실험기간 동안 증가하였다. 이때 비만세포는 충체의 낭 (cyst)주위의 피하층에도 집중적으로 침윤되어 있었다. 경구로 감염시킨 마우스 는 감염 2주 ($33.5/\textrm{mm}^2$)부터 진피 내 비만세포의 수가 비감염군 (대조군)(범위: $17.4-22.3/\textrm{mm}^2$)에 비 해 유의 한 수준 (p<0.05)으로 증가하기 시작하여 전 실험 기간인 감염 6주 ($38.4/\textrm{mm}^2$)까지 높게 운지 되었다. 진피 내에 동원된 비만세포의 평균 탈과림률 (%)은 피하 감염 및 경구 감염군 모두 감염 2주부 터 6주까지 60%이상을 보인 반면 PBS주입군 (대조군)및 비감염군 (대조군)에 있어서는 전 실험기간 동안 10%정도의 탈과립률이 관찰되었다. 이상의 결과로 보아 폐흡충을 마우스에 감염시켰을 때 일어 나는 진피 내 비만세포 반응은 감염경로와는 상관없이 충체에서 분비되는 배설-분비 항원의 자극과 깊은 관계가 있음을 알 수 있었다.
본 연구는 으뜸도라지추출물의 항알레르기 효과를 조사하기 위해 실시하였다. 으뜸도라지추출물 (50, 100 및 $200{\mu}g/mL$) 처리에 따른 RBL-2H3 비만세포의 세포독성을 조사한 결과 으뜸도라지추출물은 모든 농도에서 세포독성이 관찰되지 않았고, ${\beta}$-hexosaminidase assay를 통해 비만세포의 탈과립 억제능을 평가한 결과 재래종도라지추출물과 비교하여 ${\beta}$-hexosaminidase 억제능이 10배 뛰어남을 확인 하였다. 또한 으뜸도라지추출물은 RBL-2H3 비만세포에서 탈과립 후 유리되는 대표물질인 IL-4, $TNF-{\alpha}$, $PGE_2$ 및 $LTB_4$의 생성 분비를 현저히 감소시켰고, 이러한 효과는 재래종도라지와 비교하여 월등한 것으로 나타났다. 이상의 결과는 으뜸도라지추출물이 알레르기 반응을 효과적으로 억제함을 제시하며 향후 항알레르기 기능성 소재로 개발 가능성이 있음을 나타낸다.
한방에서 사용되는 약재 중 가자와 지모, 단삼은 면역조절 및 항암효과, 항염증효과가 있다고 알려졌다. 그러나 비만세포와 관련된 아나필락스를 이해할 수 있는 세포학적 기전에 대한 가자와 지모, 단삼의 효과에 대해서는 알려진 바 없다. 본 연구에서는 가자와 지모, 단삼의 메탄올 추출물이 아나필락시스 반응에 대해 어떠한 영향을 끼치는지를 조사하였다. 시험관내 실험과 생체 실험을 통하여, 가자와 지모, 단삼의 메탄올 추출물이 compound 48/80에 의한 아나필락시스와 비만세포 활성화 및 IgE에 의한 피부반응을 관찰하였다. 실험결과는 다음과 같다. 1) 가자와 지모, 단삼의 메탄올 추출물은 compound 48/80에 의한 전신성 아나필락시스와 귀부종 반응, IgE에 의한 피부반응을 억제하였다. 2) Compound 48/80에 의한 비만세포 탈과립과 흰쥐 복강 비만세포로부터 히스타민 유리가 가자와 지모, 단삼의 메탄올 추출물 전처리에 의해 억제되었다. 3) Compound 48/80에 의한 흰쥐 복강 비만세포내로의 칼슘 유입이 가자와 지모, 단삼의 메탄올 추출물 전처리에 의해 현저하게 억제되었다. 이상의 결과로 가자와 지모, 단삼의 메탄올 추출물은 비만세포 탈과립과 비만세포로부터 히스타민 유리, 비만세포내로 칼슘유입을 억제함으로써 compound 48/80에 의한 아나필락시스와 IgE에 의한 피부반응을 억제한다는 것을 알 수 있었다. 이로써 가자와 지모, 단삼은 알레르기 질환에 대한 효과적인 치료제로 이용될 수 있을 것으로 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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