• Title/Summary/Keyword: Lysozyme

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초임계 반용매 침전법에 의한 라이소자임이 내포된 폴리감마글루탐산의 미세입자 제조 및 특성 (Preparation and Characterization of Microparticles of $Poly(\gamma-glutamic\;acid)$ Containing Lysozyme by means of Supercritical Anti-Solvent (SAS) Precipitation Process)

  • 이동일;능운;성문희;박일현
    • 폴리머
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    • 제31권2호
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    • pp.168-176
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    • 2007
  • 라이소자임이 내포된 폴리감마글루탐산(PGA)의 서브-마이크론 크기의 미세입자를 압력, 온도, 노즐내경, 농도 등을 변화시켜가면서 초임계 반용매 침전법 (SAS)으로 제조하였다. SAS법의 전체적인 결과는 압력이 클수록, 온도가 낮을수록, 노즐 내경이 작을수록, 농도가 묽을수록 작은 입자가 얻어졌다. FT-IR로 분석한 결과, 본래 초기의 PGA:라이소자임:50 : 50의 조성비는 SAS 공정을 거치면서 최종 분말 입자 내에서는 33 : 67로 변화하였다. 이것은 PGA가 라이소자임보다 탄산가스/디메틸설폭사이드(DMSO) 혼합용매에 더 높은 용해도를 가지기 때문인 것으로 추측된다. 또 이러한 용해도 특성 때문에 생성 입자는 핵-껍질 구조를 갖고 있으며, 핵 부분은 라이소자임이 구성하는 것으로 여겨진다. 생성된 분말 입자 내에는 $7.8\times10^{-3}wt%$의 농도로 미량의 DMSO가 잔존하고 있음이 밝혀졌다.

Bacillus subtilis의 $Ura^-$$TrP^-$균주(菌株)의 육성(育成)과 Protoplast 조제(調製) 및 Regeneration (Isolation of Uracil and Tryptophan Auxotrophs of Bacillus subtilis and Regeneration of their Protoplasts)

  • 하일호;이계호
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제28권1호
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    • pp.13-18
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    • 1985
  • 세균의 protopalst 융합을 연구하기 위하여 Bacillus subtilis로부터 두 개의 영양 요구성 균주를 NTG처리에 의해서 분리하였다. 두 개의 영양 요구성 균주는 Uracil 요구성 균주와 Tryptophan 요구성 균주였다. $ura^-$균주와 $trp^-$균주의 친주로의 역돌연변이율은 각각 $2.4{\times}10^{-8}$$1{\times}10^{-8}$이하였다. Lysozyme 처리에 의하여 protoplast를 만들기 위한 최적 pH와 온도는 6.5와 $30^{\circ}C$였다. Protoplast 생성을 위한 lysozyme의 최적농도는 $200{\mu}g/ml$였다. Protoplast가 본래의 균체로 회복되는 율은 3.3%였다.

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Enhancement of Protein Separation by Electric Field Applied to Ultrafiltration

  • Shin, Chun-Hwa;Son, Dong-Ho;Lee, Yun-Hee;Koo, Ja-Kyung;Jang, Dong-Il;Cho, Nam-Jun
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2005년도 생물공학의 동향(XVII)
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    • pp.554-557
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    • 2005
  • 한외여과분리를 이용해 albumin과 lysozyme의 혼합용액 중 두 단백질을 분리하는데 대한 전기장의 효과를 조사하였다. albumin 용액을 pH7에서 분리한 결과, 전기장의 의해 투과유속은 증가하나 albumin의 여과계수비는 감소하였다. lysozyme 용액을 pH7에서 분리한 결과, 전기장의 의해 투과유속이 소폭 감소하며 여과계수비는 증가함을 볼 수 있었다. 한외여과에서의 lysozyme의 albumin에 대한 선택도는 전기장에 의해 대폭 향상되었다. 전기한외여과법을 사용하여 lysozyme과 albumin을 효율적으로 분리하기 위한 기초를 확립하였으며 기존 한외여과법의 단점을 크게 개선하였다.

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용액에서의 아미노산 및 단백질 자유기에 관한 ESR 연구 제3보 $Ti-H_2O_2$ Flow System으로 만든 Lysozyme 자유기의 ESR 연구 (An ESR Study of Amino Acid and Protein Free Radicals in Solution Part Ⅲ. ESR Study of Lysozyme Free Radical Produced by $Ti-H_2O_2$ Flow System)

  • 홍순주
    • 대한화학회지
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    • 제15권4호
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    • pp.177-181
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    • 1971
  • Free radicals of lysozyme produced by $Ti-H_2O_2$ system were studied in aqueous solution at room temperature using ESR with a continuous flow-mixing. The spectra, each consisting of a doublet with 5.5 G splitting and a broad resonance covering 80 G splitting are closely similar in shape to that for solid irradiated in vacuum at $77^{\circ}K$ and observed at room temperature immediately on warming. The result is assumed to indicate that the secondary protein radical components formed within 0.01 second, dead time of the mixing chamber, and initiated by hydrogen atom abstraction at ${\alpha}$-carbon atom of peptide chain in liquid solution at room temperature are identical to those resulting from the initial formation of a mixture of positive holes and negative ions by ionization processes as well as radical fragments by the rupture of chemical bonds in the solid during similar time at the same temperature. A broad resonance is observed with considerable amplitude on the high field side of the doublet, which is quite dissimilar to the spectra of irradiated solid lysozyme. This resonance was tentatively attributed to the polypeptide free radical in which unpaired electrons are localized on side chain.

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Zymomonas mobilis의 원형질체 형성과 재생 (Spheroplast Formatation and Regeneration of Zymomonas mobilis)

  • 김정윤;이계준
    • 미생물학회지
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    • 제24권3호
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    • pp.228-235
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    • 1986
  • Zymomonas mobilis의 spheroplast 형성과 새생조건의 새량과 초|소배시에서의 새생에 대해서 연구하였다. Tris-maleate buffer (pH 5~6), $Ca^{++}$ ions 그러고 EDTA등은 out야 membrane의 투과성 변화를 야기시 켰다 Zymommonas의 세포벽은 lysozyme, mutanolysin같은 세포벽 분해효소에 의해 분해가 되지 않은 것처럼 보였고 sphe-roplast 생성에 glycine 처리는 필수적이었다. 그러나 lysozyme 처리에 의해서 spheroplast 형성이 촉진되는 것을 확인하였다. 따라서 ly sozyme과 glycine을 함께 처리함으로서 spheroplasting배지에서의 처리시간을 4시간으로 단축 할 수 있었고 재생율이 7-10% 증가되었다.

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Bi-functional Activities of Chimeric Lysozymes Constructed by Domain Swapping between Bacteriophage T7 and K11 Lysozymes

  • Alcantara, Ethel H.;Kim, Dong-Hee;Do, Su-Il;Lee, Sang-Soo
    • BMB Reports
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    • 제40권4호
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    • pp.539-546
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    • 2007
  • The lysozymes encoded by bacteriophage T7 and K11 are both bifunctional enzymes sharing an extensive sequence homology (75%). The constructions of chimeric lysozymes were carried out by swapping the N-terminal and C-terminal domains between phage T7 and K11 lysozymes. This technique generated two chimeras, T7K11-lysozyme (N-terminal T7 domain and C-terminal K11 domain) and K11T7-lysozyme (N-terminal K11 domain and C-terminal T7 domain), which are both enzymatically active. The amidase activity of T7K11-lysozyme is comparable with the parental enzymes while K11T7-lysozyme exhibits an activity that is approximately 45% greater than the wild-type lysozymes. Moreover, these chimeric constructs have optimum pH of 7.2-7.4 similar to the parental lysozymes but exhibit greater thermal stabilities. On the other hand, the chimeras inhibit transcription comparable with the parental lysozymes depending on the source of their N-terminals. Taken together, our results indicated that domain swapping technique localizes the N-terminal region as the domain responsible for the transcription inhibition specificity of the wild type T7 and K11 lysozymes. Furthermore, we were able to develop a simple and rapid purification scheme in purifying both the wild-type and chimeric lysozymes.

$\beta$-glucan을 접종한 한국산 메기(Silurus asotus)의 호중구와 리소자임 활성 증강 (Increase in phagocytic activity of peripheal neutrophil and lysozyme activity of blood serum in Korea catfish (Silurus asotus) intraperitoneally injecteded with $\beta$-glucan)

  • 박성우;김영길;최동림
    • 한국어병학회지
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    • 제9권1호
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    • pp.87-93
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    • 1996
  • 한국산 메기(Silurus asotus)에 $\beta$-glucan을 복강내에 접종한 후, 경시적으로 말초혈액중의 호중구의 수와 PAS반응의 변화, 호중구의 탐식능 및 혈청중의 리소자임의 활성변화를 지표로 비특이적방어능력의 증강유무를 조사하였다. 글루칸의 투여후 말초혈액중의 호중구수를 증가시켰으며 투여회수에 따라 2회 접종한 경우 호중구의 증가가 지속되는 기간이 1회 접종어보다 길게 나타났다. 그러나 호중구의 PAS반응에는 변화가 없었다. 또 탐식율도 현저하게 증가하였지만 탐식지수는 변화가 없었다. 리소자임의 활성은 2회 접종시만이 현저히 증가하였으나 1회 접종시에는 활성의 증가가 없었다. 그러므로 $\beta$-glucan의 투여는 말초혈액중의 호중구수와 탐식능의 증가 및 리소자임 활성의 증가등 비특이적방어인자의 활성을 증가시켜 어체를 방어하는 능력을 증강시키는 것임을 알 수 있다.

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액적기반 미세유체장치에서 라이소자임 결정화 (Lysozyme Crystallization in Droplet-based Microfluidic Device)

  • 고관영;김인호
    • Korean Chemical Engineering Research
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    • 제51권6호
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    • pp.760-765
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    • 2013
  • 액적기반 미세유체 시스템을 이용해 난백단백질인 라이소자임의 결정화실험을 하였다. Flow-focusing 칩을 이용해 water-in-oil 형태의 액적을 만들고 페트리 디쉬와 십자몰드에 넣은 후, 액적 내부에서 라이소자임 수용액과 침전제 (NaCl) 사이의 액-액 반응을 관찰하였다. 그리고 수용액의 pH가 4.8일 때와 7.2일 때의 결정형태를 비교하였다. 그 결과, pH 4.8에서는 다면체 또는 판상형의 결정이 형성되었고, pH 7.2에서는 침상형 결정이 생성되었다. pH 4.8, 7.2 두 경우 액적이 홀로 있을 때에는 액적부피가 유지되거나 감소하면서 결정이 형성되었다. 하지만 액적이 서로 인접해 있을 때는 액적사이의 상호작용이 관찰되었고, 두 pH에서 다른 경향성을 보였다. pH 4.8에서는 인접한 액적의 부피에 영향을 주어 한 액적의 부피가 커졌고, 부피가 커진 액적에서 결정이 형성되었다. pH 7.2에서는 부피에 영향을 서로 주지 않고 각각의 액적에서 결정이 형성되었다.

In vitro Study on the Antimicrobial Activity of Human Tears with Respect to Age

  • Zahoor, Muhammad;Bahadar, Haji;Ayaz, Muhammad;Khan, Ajmal;Shah, Muhammad Jalat
    • 대한임상검사과학회지
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    • 제50권2호
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    • pp.93-99
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    • 2018
  • Lysozyme is present in tears and has the ability to inhibit bacterial growth. In addition, it acts as a physiological scavenger for harmful substances. In the present study, sixteen tear samples from people of different ages were evaluated for their antibacterial spectrum against selected bacterial strains (Escherichia coli, Shigella sonnei, Staphylococcus aureus, Salmonella enterica Typhi). A radial diffusion assay was used to evaluate the antibacterial potential of tear samples. To correlate the antibacterial activities of these tear samples, the concentration of lysozyme in the tear samples was also determined. Ampicillin was used as a standard drug. The zone of inhibition (mm) was used to measure the antibacterial property of the tears. All samples showed good antibacterial activities. The tear samples of children showed antibacterial activities in the range of 4.40~5.00 mm inhibition zones against the selected bacterial strains. The tear samples from the young and adults showed good antibacterial potential with a zone of inhibition in the range of 3.20~4.00 and 4.00~5.50 mm, respectively. The tear samples from the old age group showed inhibition zones from 1.50~5 mm. The adult tear samples showed the maximum inhibition against the selected bacterial strains among all groups. The lysozyme concentration was 1.7 mg/mL, 1.95 mg/mL, 2.13 mg/mL, and 1.76 mg/mL for children, young, adults, and elderly, respectively. In conclusion, the tears from adults have the high inhibition potential. In addition, this data also showed that the lysozyme contents in the tear sample increased with age until 40~42 years.

대장균의 periplasm으로부터 재조합 PGA 단백질의 효율적이고 간단한 방출 방법 (An Efficient Method for the Release of Recombinant Penicillin G Amidase from the Escherichia coli Periplasm)

  • 이상만
    • 생명과학회지
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    • 제27권10호
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    • pp.1145-1151
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    • 2017
  • 세제에 의하여 대장균의 periplasm에서 penicillin G amidase (PGA)를 방출하는 방법을 연구하였다. 결과적으로 세제와 lysozyme의 혼합 작용이 효과적인 것으로 나타났다. 세포 투과성의 최적 조건을 알아보기 위하여 세제의 종류, 농도, pH, 반응 시간, 온도 등의 영향을 살펴보았다. 그리하여 대장균에서 재조합 PGA를 periplasm에서 방출하는 모델을 만들 수 있었고 방출된 PGA를 농축할 수 있었다. 실리카 구슬을 이용한 고정화 시스템으로 PGA 용액을 농축할 수 있었으며, 더 이상의 정제 과정 없이 순수하게 추출 할 수 있었다. 고정화된 PGA는 penicillin G 생성의 원료인 6-APA를 생산하는데 사용할 수 있었다. 이 방법은 대장균으로부터 재조합 단백질을 추출하는 간단한 방법이며 고정화 PGA를 이용하여 ${\beta}-lactam$ 항생물질의 산업적 생산 이용될 수 있을 것으로 사료된다.