The aims of this study were to investigate the occurrence of Listeria species in turkey meats and to check the antimicrobial susceptibility of the isolated strains. Hundred and fifteen raw turkey meat samples were randomly collected from the supermarkets, butchers and restaurants. Strain isolation and identification were made according to the ISO11290-1 method. Antimicrobial susceptibility was determined by the standard disc diffusion method. A total of 47 Listeria spp. were isolated from 115 (40.9%) raw turkey meat samples. The isolates were distributed between L. monocytogenes (25.53%), L. innocua (34.04%), L. grayi (31.91%) and L. welshimeri (8.51%). A total of 55.3 % of Listeria spp. isolates were multi-resistant to at least 3 of the antimicrobial agent tested. The level of multi-resistance was higher in L. monocytogenes strains (66.7%) than in L. innocua (62.5%) and L. grayi (53.3%). Listeria spp. isolates were highly resistant to ampicillin, cephalothin, penicillin, meticillin, oxacillin, and trimethoprime-sulfamethoxazole. The isolates particularly L. monocytogenes are increasingly resistant to one or more antibiotics and may represent a potential risk for public health because these antibiotics are common used in treatment of listeriosis. The correct and controlled use of antibiotics in veterinary medicine is important to the emergence of resistant strains.
김밥은 소비자가 즐겨 찾는 대표적인 RTE식품으로 전문음식점에서의 구입 및 섭취가 증가하면서 안전성 관리의 중요성이 부각되고 있다. 본 연구는 김밥 전문음식점의 오전과 오후 시간대의 작업 조건에서 Listeria spp. 오염 변화와 관련된 사항을 분석하여, 안전성 확보를 위해서 관리되어야 할 내용을 파악하였다. 전체 264건의 시료 중 Listeria spp.는 114건($43.2\%$)이 검출되었으며, 검출된 Listeria spp. 중 Listeria innocua 95건($83.3\%$), L. murrayi 18건($15.5\%$), L. grayi($0.9\%$)이 분리되었다. 인체 유해균인 Listeria monocytogenes는 검출되지 않았다. 모든 작업 환경에서 오전보다 오후 시간대의 오염수준이 더 높았으며(P < 0.05), 김밥 제조 과정에서 작업 도구의 세척$\cdot$소독이 잘 이루어지지 않기 때문인 것으로 파악되었다. 김밥은 열처리 없이 그대로 섭취하므로 식재료 및 도구의 초기 오염 관리와 제조된 김밥의 보존 온도 관리가 중요하다. 따라서 김밥 전문음식점에서의 식재료 준비 단계에서부터 오염 발생 요인을 제거하고, 준비된 식재료의 보관 온도 준수, 도마, 칼, 장갑 등의 세척$\cdot$소독 및 교환 횟수 준수, 식재료 보관 용기가 포함된 김밥 제조대의 오염 차단 설계, 특히 식품 취급 종업원이 위생수칙을 준수하도록 위생관리 지침 및 위생 교육이 강화되어야 하겠다. 이러한 위생관리가 체계적으로 이루어지기 위해서는 김밥 전문음식점의 현실에 맞는 Good Hygienic Practices를 개발하여 보급하는 것이, 시판 김밥을 포함한 즉석조리 식품의 안전성 향상을 위해서 반드시 필요한 조치인 것으로 판단된다.
살균소독력 평가균주로 사용되는 E. coli ATCC 10536과 Staphylococcus aureus ATCC 6538균에 대하여 5 logCFU/ml 감소의 살균소독력을 보이는 살균소독제가 국내에서 식중독을 일으키고 있는 식중독 원인균 중 Salmonella spp.와 Listeria monocytogenes에 대하여도 같은 살균소독력을 나타내는지 비교평가하였다. 청정조건 및 오염조건에서 현탁액시험법을 사용하여 차아염소산나트륨과 염화벤잘코늄의 살균소독력을 평가하였다. 시험균주로는 E. coli ATCC 10536, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Salmonella typhimurium ATCC 13311, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Listeria monocytogenes ATCC 19111, Salmonella spp. 10균주 및 Listeria monocytogenes 11균주를 사용하였다. 오염조건에서는 염화벤잘코늄만이 살균소독제의 유효성분 사용범위 농도 내에서 5 log 감소 이상의 살균소독력을 보였으나, 청정조건에서는 실험대상 균주 전부 5 log감소 이상의 살균소독력을 보였다.
The present study conducted to evaluate the isolation frequency of Salmonella sap., Escherichia O157:H7 and Listeria monocytogenes in fecal samples collected form 33 dairy cow feedlots in West Gyeong-nam province from tan. 179\ulcorner to Feb. 1999. Salmonella spp. were isolated from 8.7% of fecal samples and 57.5% of dairy cow feedlots participaiting in this study had at least one positive fecal 7ample. The isolation rates of Salmonella spp. in each herd size were 42.9% in ln less than 125 heads, 63.6% in 25% to 50 heads and 75% in more than 50 heads. Of the positive sample, the most common serogroup recovered was Bl(31.5%), followed by C1 and D(22.9%), C2(16.2%), A(4.2%) and E(2.1%), in order. However, E. coli O157:H7 and Listeria monocytogenes were net detected in the fecal samples collected from all feedlots.
본 연구에서는 이산화염소수를 이용한 계사 내 깔짚의 미생물 수 저감화를 통한 깔짚의 미생물학적 안전성 확보를 위하여 연구를 수행하였다. 사용하기 전의 깔짚에는 coliform, E. coli, Listeria spp., yeasts and molds 및 total aerobic bacteria가 높은 수준으로 검출되었으며 사용기간이 늘어남에 따라 미생물 수가 증가하였다. 500 ppm 이산화염소수를 이용한 살균처리에서는 coliform, E. coli, Listeria spp., yeasts and molds, total aerobic bacteria 및 Salmonella spp.의 균수가 모든 깔짚 시료에서 처리횟수에 따라 유의적으로 감소하였다. 사용하지 않은 깔짚에서는 coliform, E. coli, Listeria spp., yeasts and molds 및 total aerobic bacteria 수가 각각 4.47, 1.29, 1.23, 3.24 및 5.2 log CFU/g로 감소하였고, 1주 및 5주 사용한 깔짚의 경우도 모든 미생물 수가 현저하게 감소하였다. 따라서 본 연구 결과, 이산화염소수를 이용한 계사 내 깔짚의 미생물 수 저감화 방법이 도계된 계육의 미생물학적 안전성을 향상시키기 위한 방법으로 적합하다고 판단된다.
Listeria (L.) monocytogenes in samples could not be detected occasioally by faster growth of other Listeria spp. especially L. innocua. The aim of this study was to develop the differential media and multiplex polymerase chain reaction (PCR) assays for the rapid detection of L. monocytogenes. L. monocytogenes colonies were characterized by their ${\beta}$-hemolysis with fluorescence under 366 nm UV light on the Listeria hemolysis agar (LHA). L. innocua, a species commonly present in foods, did not produce ${\beta}$-hemolysis on LHA. Therefore, one or more colonies of L. monocytogenes were easily distinguished from large populations of L. innocua. The multiplex PCR assays were developed to distinguish from L. monocytogenes and other Listeria spp. with two pairs of primers. The primers were designed in 16S rRNA and listeriolysin O gene for specific amplification of all members of the genus Listeria and L. monocytogenes, respectively. The multiplex PCR assays produced 560 and 938 bp products in L. monocytogenes; only 938 bp products in the genus Listeria. The multiplex PCR assays could detect as little as 50 pg of L monocytogenes DNA. These results indicated that the differential media and multiplex PCR assays might be useful diagnostic tools for the rapid detection of L. monocytogenes.
리스테리아를 보다 효과적으로 typing할 수 있는 방법을 찾기 위해 표준균주 13종을 대상으로 하여 RAPD, ERIC (Enterobacterial repetitive intergenic consensus) fingerprinting, ribotyping-PCR의 분리력을 비교해 보았다. DG107 (primer 6) 또는 DG122 (Lis 11) primer를 이용한 RAPD의 경우 11가지의 유형으로 분류되는 반면, ERIC fingerprinting은 9가지, ribotyping-PCR은 7가지씩의 유형을 보였다. 그러나 2가지 primer를 이용하여 각각 행한 RAPD 결과를 종합하거나, DG122를 이용한 RAPD와 ribotyping-PCR의 결과를 종합할 경우 13가지의 유형으로 모두 분리할 수 있었다.
The major purpose of the present study is to syrvey vegetables, meats, seafoods, processed foods and imported foods for the presence of Listeria spp. and to prevent listeriosis caused by the contamination of Listeria monocytogenes. Listeria spp. was not found in vegetables and processed foods. The optimum growth condition of isolates indentified as Listeria monocytogenes was pH 7.0 and 37$^{\circ}C$. the antimicrobial effect of grapefruit seed extract(GFSE) was observed in the level of more than 100ppm by disk method. When 1ml(2.5$\times$106 CFU/ml) of Listeria monocytogenes was inoculated and incubated for 3 days at 3$0^{\circ}C$, the total cell number of the organism was 4.5$\times$109 in the control, 7.2$\times$103 in 100 $\mu\textrm{g}$/ml of GFSE medium, and 3.5 $\mu\textrm{g}$/ml of GFSE medium. Direct visualization of microbial cells by using both transmission electron microscope and scanning electron microscope showed microbial cell membrane the function of which was destroyed by treating with the dilute solutions of GFSE. It could be confirmed that GFSE completely inhibited the growth of the test strain of Listeria monocytogenes.
국내 유통중인 냉동만두와 피자 중 L. monocytogenes의 분포와 분리균의 특성을 조사하기 위하여 1998년 8월부터 11월에 걸쳐 시료 72개를 구입하여 실험하였다. 전체 냉동식품 중 9.7%(7개)에서 L. monocytogenes가 분리되었으며 냉동만두 중 11.1%,피자 중 5.6%가 오염되어 있었다. USDA와 FDA방법. 그리고 modified cold enrichment 방법 중 USDA방법이 가장 L. monocytogenes의 분리율이 높았으며 분리된 L. monocytogenes 혈청형은 4였다. PCR실험결과 CAMP test와 API Listeria kit를 사용하여 분리된 균주가 L. monocytogenes임이 확인되었다. USDA방법과 PCR을 이용하여 L. monocytogenes를 분리하고 확인하는데 3-4일 정도의 시간이 소요되어 시간을 단축시킬 수 있는 분리 및 확인방법의 개발이 필요하리라 사료된다. 분리된 L. monocytogenes의 내열성을 조사한 결과 tryptic soy broth에서 D값이 $60^{\circ}C$에서 49.2초, $65^{\circ}C$에서 8.8초였으며 냉동식품의 안전한 사용을 위하여 L. monocytogenes의 분리율이 높은 식품에서 D값의 측정이 필요하다고 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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