Three pork fabrication processing were examined for isolation and serotyping of Listeria monocytogenes. Three hundred thirty samples were collected from gloves, knife sharpeners, knives, cutting boards, conveyer belts, skinning machines, working room air, pig carcasses, and cut meat. Among the 234 samples taken from processing environment, the isolation rates of Listeria monocytogenes and other Listeria spp. were 17.5%, 34.2% respectively. Isolation rates of Listeria monocytogenes from different specimens during processing were 20.8% in gloves, 21.3% in knife sharpeners, 14.6% in knives, 20.8% in cutting boards, 28.6% in conveyer belts, 16.7% in skinnig machines. Listeria monocytogenes and other Listeria spp. were not detected in working room air. Isolation rate of Listeria monocytogenes 14.6% in pork was increased compared to that of 8.5% in pig carcasses (p<0.05). The serovars of 41 isolates from processing environment were 4b 36.6%, 1/2a 24.4%, 4ab 17.0%, 4a 4.9%, 1/2c 2.4%, and 4c 2.4%. The serovars of 4b, 1/2a, 4ab were detected from carcassess and cut meats.
To investigate the epidemiological trait of listeriosis, Listeria spp were isolated from poultry meat, products and environmental specimens in chicken slaughterhouse. Also determined were isolation rates by the different enrichment procedures, the biochemical properties of isolates. In a total of 307 samples including poultry meat, liver, feathers, feces, chiller water, scalding water overflow and slaughterhouse floor, Listeria spp were isolated predominantly from scalding water overflow (90.0%), body skin before washing (66.7%), liver (20.0%) and feathers(15.0%) However, few Listeria spp were isolated from body skin after washing and feces. The higher isolation rates were obtained in the secondary enrichment procedure (7.2%) than in the primary enrichment (3.9%); after stored the secondary enrichment cultures for 2 weeks at $4^{\circ}C$, Listeria spp were present in 9.8%. The majority of the isolated Listeria spp were identical to those of the standards strains in biochemical and cultural properties. Overall, Listeria spp were present in 13.4% of the specimens tested, and were in order of prevalence of L innocua(11.1%), L monocytogenes(3.3%), L grayi(0.7%) and L murrayi(0.3%).
Foodborne pathogens, like Listeria monocytogenes, continue to inflict substantial financial losses on the food industry. Various methods for detecting Listeria in food have been developed and numerous studies have been conducted to compare the different methods. But, in recent years, new Listeria species have been identified, and currently the genus comprises 26 species. Therefore, it would be a more accurate approach to re-evaluate existing detection methods by considering new species. The present investigation involved the analysis of 42 ready-to-eat (RTE) foods, encompassing a variety of food categories, such as mezes, salads, dairy products, and meat products, with the aim of ascertaining the presence of Listeria. Among the traditional culture-dependent reference methods, the ISO 11290 method was preferred. The process of strain identification was conducted with the API Identification System. Furthermore, to ascertain the existence of L. monocytogenes and Listeria spp., the samples underwent additional analysis employing the VIDAS Immunoassay System, ELISA, and RT-PCR methodologies. Thus, four alternative approaches were employed in this study to compare not only the different methods used to determine Listeria while taking into account the newly identified Listeria species, but also to assess the compliance of retail RTE food items with microbiological criteria pertaining to the genus Listeria. Based on the conducted analyses, L. monocytogenes was conclusively determined to be present in one sample. The presence of Listeria spp. was detected in 30.9% of the samples, specifically in Turkish cig kofte, sliced salami, and salads.
Highly lethal Listeria monocytogenes, causing bromatoxism through vegetables, dairy products, meat products and shellfish etc, was examined for possible contamination in market beef. USDA, FDA, Malthus and Modified Cold Enrichment methods were used for the detection of Listeria spp.. Samples of domestic and imported market beef were collected from local meat shopsat Seoul, Korea. Total two hundreds and six of Listeria spp. were isolated and identified from beef. Among 206 isolates, the number of L. welshimeri was one hundred and twenty-one(44.8%). The numbers of isolated L. innocua, L. murrayi, L. monocytogenes, L. grayi, L. seeligeri, and L. ivanovii were 49(18.1%), 14(5.2%), 12(4.4%), 6(2.2%), 2(0.7%), and 2(0.7%), respectively. Detection rates of Listeria spp. varied among four methods. The highest detection rate of Listeria spp. in market beef was found at USDA method and that of L. monocytogenes was found at Malthus method.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.4
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pp.606-614
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2000
This study was carried out for comparing Listeria strains developing genetic markers for Listeroa strains using Listeria sp. genetic markers using Randomly Amlymorphic DNA (RAPD) analysis method. Five of RAPD promers (OPA-01, OP-26-01, OP-26-02, OPB-01, OP-26-10) showed the distinctive polymorphism among Kisteria sp. isolated from domestic foods. RAPD-PCR with five arbitrary primers produced 76 DNA polymorphism. Among them, OPA-01 and OP-26-01 primers produced about 1.5kb and 0.7 kb amplified DNA fragments for all the Listeric relationships of Listeria sp. using NTSYS program were grouped into 7 clusters and showed 0.54 to 0.93 similarity among strains. Especially, No. 3 and No. 20 isolates showed the genetically most similar relationship by 0.94, and No. 7 and No. 24, or No. 7 and N0. 45 isolates showed the least similarty by 0.54 From these results, RAPD analysis method deemed to be successfully applied the classification and genetic analysis for Listeria sp. isolates.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.31
no.2
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pp.333-337
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2002
To develope food preservative, antimicrobial activities of Pinus densiflora (PD) ethanol extract against Listeria monocytogenes Scott A. Listeria monocytogenes Brie I and Listeria monocytogenes ATCC 19111 were investigated. The ethanol extracts of PD showed strong antimicrobial activities on Listeria monocytogenes. The crude ethanol extracts of PD were further fractionated by ether, ethyl acetate and butanol. The ether fraction from ethanol extract showed the strongest antimicrobial effects on Listeria monocytogenes in tryptic soy broth containing 40 mg/mL ether fractions compared with other fractions. The effect of ethanol extract of pinus densiflora against Listeria monocytogenes culture for growth stage in tryptic soy broth at 35$^{\circ}C$ showed the strongest antimicrobial activites for lag phase. The morphological changes of the cells were observed with transmission electron microscope (TEM) and scanning electron microscope (SEM) and the cells were injured by treatment of 40 mg/mL ethanol extract of Pinus densiflora.
Listeria (L.) monocytogenes in samples could not be detected occasioally by faster growth of other Listeria spp. especially L. innocua. The aim of this study was to develop the differential media and multiplex polymerase chain reaction (PCR) assays for the rapid detection of L. monocytogenes. L. monocytogenes colonies were characterized by their ${\beta}$-hemolysis with fluorescence under 366 nm UV light on the Listeria hemolysis agar (LHA). L. innocua, a species commonly present in foods, did not produce ${\beta}$-hemolysis on LHA. Therefore, one or more colonies of L. monocytogenes were easily distinguished from large populations of L. innocua. The multiplex PCR assays were developed to distinguish from L. monocytogenes and other Listeria spp. with two pairs of primers. The primers were designed in 16S rRNA and listeriolysin O gene for specific amplification of all members of the genus Listeria and L. monocytogenes, respectively. The multiplex PCR assays produced 560 and 938 bp products in L. monocytogenes; only 938 bp products in the genus Listeria. The multiplex PCR assays could detect as little as 50 pg of L monocytogenes DNA. These results indicated that the differential media and multiplex PCR assays might be useful diagnostic tools for the rapid detection of L. monocytogenes.
Listeria spp. were isolated from a total of 402 naturally contaminated domestic ready-to-eat (RTE) vegetable samples by the conventional Food and Drug Administration protocol and confinned by API-Listeria kit. Also, the susceptibility to 12 antibiotics, polymerase chain reaction (PCR) assay for virulence gene of pathogenic Listeria monocytogenes isolates, and in vitro virulence assay using myeloma and hybridoma cells from murine and human sources were tested. Among the samples, 17 samples (4.2%) were found to be contaminated with Listeria species. Among the 17 strains of Listeria spp. isolates, only 2 strains (11.8%) of L. monocytogenes and 15 strains (88.2%) of L. innocua were identified. Antibiotic susceptibility test showed that the Listeria spp. isolates were very susceptible to the antibiotics tested, except for nalidixic acid. Among 17 strains of Listeria spp., PCR analysis showed that 2 strains of L. monocytogenes isolates proved to have a virulence hly gene, but none of L. innocua had the hly gene. Also, hybridoma Ped-2E9 cells assay showed that only L. monocytogenes isolates killed approximately 95-99% hybridoma cells after 6 h, but L. innocua isolates had about 0-5% lethal effect. These results indicate that PCR assay with hly primer or hybridoma Ped-2E9 cells assay could be used as a good monitoring tool or in vitro virulence test for L. monocytogenes.
Four species of the genus of Listeria were isolated from seawater and sea food in Kyungnam province, South Korea. These isolated strains were classified into Listeria sp. from different samples by appropriate cultivation conditions and biochemical tests including serological test. In a day enrichment cultivation, the following strains were found out of 100 samples: L. innocua (35%), L. ivanovii (4%), L. monocytogenes (4%), and L. welshimeri (1%). For seven days enrichment culture, L. innocua (38%), L. ivanoii (5%), L. monocytogenes (7%), and L. welshimeri (1%) were isolated. From these results, Listeria species were more efficiently isolated in seven day enrichment broth than in one day enrichment. However, these isolated Listeria species were less grown in the selective medium than in the enrichment medium. Isolation rates of Listeria species showed differency for each sample and Listeria species were more abundantly isolated in shrimps (80%) and crayfishes (80%) than little neck clams (50%), seawater (25%) and mussels (20%). From the results of serological classes for the seven L. monocytogenes, two strains were defined as type I and the other five strains as type IV.
Listeria monocytogenes and L. ivanovii are important food-pathogens for human and animal. The diagnostic of Listeria in food using culture medium requires time and laborwork, because there are many other non-pathogenic species like L. innocua, L welshimeri, L. seeligeri and L. grayi in Genus Listeria. For these reasons, Lismix multiplex PCR method was developed as a rapid method for the detection and identification of Listeria. In this study we developed a practical system of Lis-mix PCR detection for the application to food samples and new developed Siw-mix III PCR system overall 69 listerial strains were successful species-identified and confirmed. Also, the Siw-mix III PCR system allows the species-specific identification among L. ivanovii, L. welshimeri and L seeligeri in a single PCR.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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