Application of Multiplex PCR Using Lis-mix Primers in Food test and Specific Detection of Listeria ivanovii

식품검사에서 Lis-mix multiplex PCR 방법의 응용 및 Listeria ivanovii 특이적 검출

Listeria monocytogenes and L. ivanovii are important food-pathogens for human and animal. The diagnostic of Listeria in food using culture medium requires time and laborwork, because there are many other non-pathogenic species like L. innocua, L welshimeri, L. seeligeri and L. grayi in Genus Listeria. For these reasons, Lismix multiplex PCR method was developed as a rapid method for the detection and identification of Listeria. In this study we developed a practical system of Lis-mix PCR detection for the application to food samples and new developed Siw-mix III PCR system overall 69 listerial strains were successful species-identified and confirmed. Also, the Siw-mix III PCR system allows the species-specific identification among L. ivanovii, L. welshimeri and L seeligeri in a single PCR.

Listeria monocytogenes와 L. ivanovii는 인간과 동물에 대한 식품 유래성 병원성 세균이다. Listeria 속에는 이들 병원균 외에 비병원성세균인 L. innocua, L, welshimeri, L. seeligeri, L.grayi 등 이 포함되어 있기에, 식품검사에서 배양법을 사용하는 종래의 Listeria의 검출방법은 시간과 많은 실험을 필요로 한다. 이런 이유 등으로 Literia의 종동정과 검출을 위한 신속한 검출법으로 Lis-mix multiplex PCR검출법 (Bubert et al., 1999)이 개발되었다. 본 연구에서는 식품검사에 활용하기 위한 실용적인 Lis-mix multiplex PCR 방법을 개발하고, 아울러 새로운 Siw-mixIII PCR 검출법을 개발하였다. 이 방법을 사용하여 식품에서 분리된 총 69개의 Listeria 균주를 성공적으로 종동정할 수 있었으며, Siw-mixIII multiplex PCR방법을 사용하여 L. ivanovii, L.welshimeri, L.seeligeri를 한번의 PCR로 검출 및 종동정을 할 수 있었다.