3T3-L1 지방세포에서 상업용 Bacillus subtilis 균주와 순창 민속마을 전통 청국장에서 분리한 Bacillus subtilis KC-3(KCCM 42923) 균주를 이용해 두유를 발효시키고 이를 발효하지 않는 두유와 지방 생성 억제 효과를 비교하였다. 렙틴의 분비량은 B. subtilis MYCO 10001 발효두유(F-MYCO)와 B. subtilis KC-3 발효두유(F-KC)에서 유의적으로 감소하였다. 이러한 지방 생성 억제 효과가 지방의 축적과도 관련이 있는지 알아보기 위하여 지방구를 관찰한 결과 두유와 발효두유 모두에서 축적된 지방의 양이 감소했고 그중 F-KC는 유의적으로 감소하여(p<0.05) 지방의 생성과 축적이 억제된 것을 알 수 있었다. 지방축적의 감소가 지방 분해와도 관련이 있는지 조사하기 위하여 글리세롤의 분비량을 측정하였는데 발효되지 않은 두유의 글리세롤 분비 정도는 control과 비슷하였으나 발효두유의 모든 군에서는 글리세롤의 분비량이 증가하였고 특히 F-KC에서 글리세롤 분비량이 유의적으로 증가하였다. 또한 F-KC의 지방 축적 감소가 지방 생성 억 제로부터 기인된 것인지 조사하기 위하여 지방생성에 중추적 역할을 맡고 있는 전사인자인 $PPAR{\gamma}$와 SREBP-1c의 mRNA 발현을 확인한 결과 두유나 다른 발효두유에 비하여 F-KC에서 이들 유전자 발현이 감소한 것으로 나타났다. 따라서 B. subtilis KC-3에 의해 발효된 두유의 항비만 효과는 지방 생성의 중요한 전사인자인 $PPAR{\gamma}$와 SREBP-1c의 발현 억제에 기인한 것으로서 그 결과 지방의 생성을 억제하고 지방 축적을 효과적으로 감소 시키는 것으로 보인다.
Effects of Phaseoli Semen rubra Herbal-acupuncture at zusanli(ST-36), Quchi(LI-11) and Sanyinjiao(Sp-6) on lipid composition, liver function, oxidative capacity and molecular biological aspects were investigate in high fat diet induced obese rats. Forty male Sprague-Dawley rats weighing about 400g were divided into 4 groups according to body weight and raised four weeks with control, zusanli(ST-36), Quchi(LI-11) and Sanyinjiao(Sp-6) Herbal-acupuncture groups. 1. Plasma total cholesterol and LDL-cholesterol showed a low values in the (ST-36) and (LI-11) Herbal-acupuncture groups and HDL-cholesterol showed a high values in the (ST-36) Herbal-acupuncture groups. 2. Plasma triglyceride and glucose showed a low values in the (ST-36) and (LI-11) Herbal-acupuncture groups. 3. The contents of plasma free fatty acids showed a tendence to decrease in the Herbal-acupuncture groups, however in the Herbal-acupuncture groups, the values showed no significantly different. 4. The activities of AST and ALT showed no significantly different in all treatment groups. 5. The contents of plasma ${\beta}-lipoprotein$ and free fatty acids showed a tendency to decrease in the Herbal-acupuncture groups compared to those of control group. In the Herbal-acupuncture groups, the values of (ST-36) and (LI-11) Herbal-acupuncture groups showed a low in the acupuncture groups. 6. Liver total cholesterol and triglyceride showed a low values in the (ST-36) and (LI-11) Herbal-acupuncture groups. 7. Contents of plasma TBARS showed a low values in the (ST-36) and (LI-11) Herbal-acupuncture groups, however contents of liver TBARS showed no significantly different among treatment groups. 8. Values of liver glutathione peroxidase and catalase activity showed a tendency to increase in the (ST-36) and (LI-11) Herbalacupuncture groups. Values of liver super oxide dismutase activity showed a high in the (ST-36) Herbal-acupuncture groups compared to those of other groups. 9. Expression of apo-B mRNA in liver cell showed a low in (ST-36) Herbal-acupuncture groups, however expression of apo-E mRNA showed a high in Herbal-acupuncture groups and $TNF-{\alpha}$ mRNA in adipose cell showed no different among all the treatment groups. Expression of Leptin mRNA showed a tendance to decrease in (ST-36) Herbal-acupuncture group. 10. Histological character of liver, those of (ST-36) Herbal-acupuncture group showed a good, however other treatment groups showed slight vasodilation and slight fat accumulation. These results indicated that Phaseoli Semen rubra Herbal-acupuncture at (ST-36) and (LI-22) suppressed adipose tissue mass and lipid peroxidation and increased antioxidant system.
The pregnancy and abortion process involves a complex mechanism with various immune cells present in the implantation sites and several hormones associated with pregnancy, such as leptin, ghrelin and nesfatin-1. However, the mechanism underlying spontaneous abortion by maternal T helper 17 (Th17) present in the implantation sites and nesfatin-1, which is of anorexigenic hormones, is not fully understood so far. Therefore, the purpose of this study was to examine the possible roles of Th17 cells present in the implantation sites and nesfatin-1 expressed in the uterus on spontaneous abortion using the $CBA/j{\times}DBA/2$ mouse model. Th17 transcription factor, ROR-${\gamma}t$ mRNA expression was significantly increased in the abortion sites compared with the implantation sites of abortion model mice on day 14.5 and 19.5 of pregnancy. In addition, the expression levels of IL-17A mRNA were significantly higher in abortion sites than in implantation sites on day 14.5 and 19.5. Moreover, the nesfatin-1/NUCB2 protein and mRNA levels were increased in abortion sites compared with levels in implantation sites of both normal pregnant and abortion model mice on day 14.5 of pregnancy. Interestingly, nesfatin-1/NUCB2 serum levels were not changed throughout the whole pregnancy in abortion model mice, but its serum level was dramatically increased on day 14.5, and then rapidly decreased on day 19.5 in normal pregnant mice. In this study, we showed for the first time the expression of nesfatin-1/NUCB2 mRNA and protein in implantation sites during pregnancy. The present results suggest that Th17 cells in the uterus may play an important role in the period of implantation and for maintenance of pregnancy. Furthermore, the present results suggest that Th17 cells in implantation sites may be a key regulator for maintenance of pregnancy and provides evidence that activation of these cells may be regulated by nesfatin-1/NUCB2. Further study is needed to elucidate the role of nesfatin-1 expressed in the uterus during pregnancy.
본 연구에서는 발효콩 유지가 비만 억제 및 예방, 3T3-L1 지방전구세포의 성장 및 분화 억제 효과를 관찰하기 위해 실험을 실시하였다. 3T3-L1 지방전구세포에 발효콩 유지를 처리하여 세포생존율을 측정한 결과, NF군 $100{\mu}g/mL$에서 3T3-L1 지방전구세포의 생존율을 유의적으로 감소시켜 세포독성이 나타났다. 분화를 유도한 다음 세포 내 triglyceride 함량을 측정한 결과, 비발효콩 유지(NF) 처리군보다 발효콩 유지처리군에서 triglyceride 함량 저해 효과가 높게 나타났으며, 특히 BS, LBA, BLO군 순으로 높게 나타났다. 또한, BS군, LBA군, BLO군 순으로 지방세포분화 관련 유전자인 $PPAR{\gamma}$의 mRNA 발현을 농도 의존적으로 감소시켰으며, $PPAR{\gamma}$ 유전자와 상관관계에 있는 $C/EBP{\alpha}$ 유전자도 농도 의존적으로 감소시켰다. 그리고 adiponectin 유전자의 발현은 농도 의존적으로 증가시켰다. 고지방식이로 비만을 유도한 C57BL/6J 생쥐를 이용하여 항비만 활성을 관찰한 결과, 총 체중증가량은 대조군에 비해 4주째에 감소하는 경향이 나타났다. 혈액 내 지질농도를 측정한 결과 중성지방, 총콜레스테롤, LDL-콜레스테롤 함량은 LBA, BLO군에서 유의적으로 낮게 나타났으며(P<0.05), HDL-콜레스테롤 함량은 대조군보다 증가하였으나 유의적인 차이는 나타나지 않았다. 동맥경화 지수인 AI(atherogenic index)는 대조군보다 감소시키는 경향을 보였다. 비만관련 호르몬인 adiponectin의 농도는 SO, BS, LBA, BLO군에서 유의적으로 증가하였고(P<0.05), insulin 농도는 유의적으로 감소하였다(P<0.05). Leptin은 대조군보다 감소하였으나 유의적인 차이는 나타나지 않았다. 따라서 이러한 결과를 종합하여 볼 때 발효콩 유지가 3T3-L1 지방전구세포의 mRNA 단계에서부터 지방분화를 억제하여 항비만 활성을 가지고 있는 것으로 추정되고, 고지방식이로 비만이 유도된 C57BL/6J 생쥐에서 총체중을 감소시키고, 혈액 내 지질농도인 triglyceride와 총콜레스테롤, LDL-콜레스테롤 및 HDL-콜레스테롤과 비만관련 호르몬인 adiponectin, insulin, leptin을 조절하여 항비만 활성을 가지고 있는 것으로 확인되었다. 이 결과로 발효콩 유지가 항비만 생리활성을 나타내는 새로운 식품 소재로서 이를 활용한 기능성 식품 개발의 가능성이 있다고 생각된다.
This study was undertaken to evaluate the effect of bacteria-derived $\beta$-glucan fiber on serum lipids, adiposity and uncoupling protein (UCP) expression in rats. In order to induce obesity, Sprague-Dawley weanling male rats were allowed free access to AIN-76A diet until 4 weeks of age, and fed high-fat diet (beef tallow, $40\%$ of calories as fat) for 6 weeks until 10 weeks of age. Rats were then fed with $0\%$ thigh- fat control group), $1\%$, or $5\%$ bacterial ~-glucan supplemented high-fat diets (w/w) for another 6 weeks. For comparison, normal control group was fed with AIN-76 diet $11.7\%$ fat). Supplementation with bacterial $\beta$-glucan resulted in a significant reduction of high-fat-induced white fat (i.e., visceral and peritoneal fat) development, adipocyte hypertrophy, and development of hyperinsulinemia and hyperleptinemia. Serum triglyceride, total cholesterol, and free fatty acid levels were greatly reduced, but, HDL-cholesterol concentrations were increased by bacterial $\beta$-glucan supplementation. Serum leptin level was lower in the $\beta$-glucan groups than in the high-fat group. The expression of UCPs (UCP1, UCP2, and UCP3) in brown adipose tissue (BAT) were significantly increased by $5\%$ bacterial $\beta$-glucan-containing diet. This study suggests that the anti-obesity effect of $5\%$ bacterial $\beta$-glucan is attributed to upregulation of UCPs and inefficient energy utilization.
Objective: To explore the molecular mechanisms of fatty liver hemorrhagic syndrome (FLHS) in laying hens, an experiment was conducted to reveal the differences in histopathological observation and gene expression between FLHS group and normal group. Methods: We compared the histopathological difference using hematoxylin and eosin staining and proceeded with RNA sequencing of adipose tissue to search differentially expressed genes and enriched biological processes and pathways. Then we validated the mRNA expression levels by real-time polymerase chain reaction and quantified protein levels in the circulation by enzyme-linked immunosorbent assay. Results: We identified 100 differentially expressed transcripts corresponding to 66 genes (DEGs) were identified between FLHS-affected group and normal group. Seven DEGs were significantly enriched in the immune response process and lipid metabolic process, including phospholipase A2 group V, WAP kunitz and netrin domain containing 2, delta 4-desaturase sphingolipid 2, perilipin 3, interleukin-6 (IL-6), ciliary neurotrophic factor (CNTF), and suppressor of cytokine signaling 3 (SOCS3). And these genes could be the targets of immune response and be involved in metabolic homeostasis during the process of FLHS in laying hens. Based on functional categories of the DEGs, we further proposed a model to explain the etiology and pathogenesis of FLHS. IL-6 and SOCS3 mediate inflammatory responses and the satiety hormone of leptin, induce dysfunction of Jak-STAT signaling pathway, leading to insulin resistance and lipid metabolic disorders. Conversely, CNTF may reduce tissue destruction during inflammatory attacks and confer protection from inflammation-induced insulin resistance in FLHS chickens. Conclusion: These findings highlight the therapeutic implications of targeting the JAK-STAT pathway. Inhibition of IL6 and SOCS3 and facilitation of CNTF could serve as a favorable strategy to enhance insulin action and improve glucose homoeostasis, which are of importance for treating obesity-related disorders for chickens.
The anti-adipogenic effect of dongchimi nano juice prepared using a nano-filtering process was investigated by measuring leptin and glycerol levels and the expression of a peroxisome proliferator-activated $receptor-\gamma\;(PPAR\gamma)$ gene as indicators of lipid accumulation or lipolysis. Red pepper powder, seeds of red pepper, garlic, and ginger were added in the preparation of dongchimi. Dongchimi was fermented to reach the optimal fermentation period, followed by nano-filtration in the range of $0.0005\sim0.1\;{\mu}m$. The lactic acid bacteria of dongchimi nano juice were removed completely by a nano-filtering process. Treatment of dongchimi nano juice induced glycerol release in the 3T3-L1 adipocytes and decreased the mRNA expression level of $PPAR\gamma$. These results suggested that dongchimi nano juice may enhance lipolysis and modulate adipogenesis in 3T3-L1 cells.
Although it has recently been reported that Acanthopanax senticosus has a protective effect against the development of metabolic disorders such as diabetes and hyperlipidemia, its underlying molecular mechanisms have remained to be elucidated. In this study, we observed that treatment of an extract of A. senticosus (ASE) reduced body weight and adiposity and improved glucose tolerance in high-fat diet (HFD)-induced obese mice. HFD-induced weight gain in white adipose tissues and liver was also significantly reduced in ASE-treated HFD-fed mice, which was found to be contributed by suppression of mRNA expression of genes involved in fatty-acid uptake and fat synthesis in white adipose tissue. ASE treatment also attenuated M1 macrophage activation, increased regulatory T ($T_{reg}$) cell population, and modulated leptin/adiponectin profile that might alleviate chronic inflammation to protect against HFD-induced insulin resistance. Our findings suggest a therapeutic potential of ASE for prevention and treatment of type 2 diabetes without adverse effects such as weight gain and dyslipidemia.
Previous study showed that swimming improved obesity but was not through $PPAR{\alpha}$ activation in liver and skeletal muscle in high fat diet-fed female mice with functioning ovaries as an animal model of obese premenopausal women. Thus, this study was aimed at investigation of the effects of swimming on the promotion of health and its molecular mechanism in adipose tissue of high fat diet-fed female mice. Eight-week-old female C57BL/6J mice were randomly divided into two groups (a non-swim control group and a swim group, n=8/group). Mice in the swim group swam for 2 h daily for 6 weeks in water bath with temperature of $35{\pm}1^{\circ}C$. All the animals received high fat diet (45% kcal fat) for 6 weeks. Reverse transcription-polymerase chain reaction was used to elucidate the molecular mechanism. Female mice subjected to swimming had significantly decreased body weight gain and white adipose tissue mass compared with the female control mice. Histological studies illustrated that swimming decreases the hepatic lipid accumulation. As expected, swimming did not affect the expression of mRNA levels of peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR) ${\alpha}$ and $PPAR{\alpha}$ target genes responsible for mitochondrial fatty acid ${\beta}$-oxidation, such as carnitine palmitoyltransgerase-1 and medium chain acyl-CoA dehydrogenase in the white adipose tissue. However, mice that underwent 6-weeks of swimming exercise had decreased the mRNA expression of lipogenic genes, such as sterol regulatory element-binding proteins-1C and fatty acid synthase in comparison to sedentary control mice, with decreased $PPAR{\gamma}$ target genes involved in adipocyte-specific marker genes, such as adipocyte fatty acid binding protein and leptin in the white adipose tissue. These results suggest that swimming can effectively prevent obesity induced by high fat diet-fed, in part through down-regulation of adipogenesis and lipogenesis in white adipose tissue of female obese mice. Moreover, these results suggest that swimming maybe contributing the promotion of health through regulation of adipogenesis and lipogenesis in overweight premenopausal women.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Different fatty acids exert different health benefits. This study investigated the potential protective effects of perilla, olive, and safflower oils on high-fat diet-induced obesity and colon inflammation. MATERIALS/METHODS: Five-week old, C57BL/6J mice were assigned to 5 groups: low-fat diet (LFD), high-fat diet (HFD) and high-fat diet supplemented with-perilla oil (HPO), olive oil (HOO), and safflower oil (HSO). After 16 weeks of the experimental period, the mice were sacrificed, and blood and tissues were collected. The serum was analyzed for obesity- and inflammation-related biomarkers. Gene expression of the biomarkers in the liver, adipose tissue, and colon tissue was analyzed. Micro-computed tomography (CT) analysis was performed one week before sacrifice. RESULTS: Treatment with all the three oils significantly improved obesity-induced increases in body weight, liver weight, and epididymal fat weight as well as serum triglyceride and leptin levels. Treatment with perilla oil (PO) and safflower oil (SO) increased adiponectin levels. The micro-CT analysis revealed that PO and SO reduced abdominal fat volume considerably. The mRNA expression of lipogenic genes was reduced in all the three oilsupplemented groups and PO upregulated lipid oxidation in the liver. Supplementation of oils improved macroscopic score, increased colon length, and decreased serum endotoxin and proinflammatory cytokine levels in the colon. The abundance of Bifidobacteria was increased and that of Enterobacteriaceae was reduced in the PO-supplemented group. All three oils reduced proinflammatory cytokine levels, as indicated by the mRNA expression. In addition, PO increased the expression of tight junction proteins. CONCLUSIONS: Taken together, our data indicate that the three oils exert similar anti-obesity effects. Interestingly, compared with olive oil and SO, PO provides better protection against high-fat diet-induced colon inflammation, suggesting that PO consumption helps manage inflammation-related diseases and provides omega-3 fatty acids needed by the body.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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