The purpose of this study is to develop a new preparation process of American ginseng (Panax quinquefolium) extract featuring high concentration of ginsenoside $Rg_3$, $Rg_5$, and $Rk_1$, Red ginseng special components. Chemical transformation from ginseng saponin glycosides to prosapogenin was analyzed by the HPLC. Extracts of American ginseng were processed under several treatment conditions of microwave and vinegar (about 14% acidity). The results showed that the quantity of ginsenoside $Rg_3$ increased by over 0.9% at the 20 minutes of the pH 2~4 vinegar and microwave American ginseng ethanol extract compared with other process times. The result of MAG-20 indicates that the American ginseng microwave and vinegar-processed American ginseng extracts (about 14% acidity) treated for 20 minutes produced the highest amount of ginsenoside $Rg_3$ (0.969%), $Rg_5$ (1.071%), and $Rk_1$ (0.247%). Besides, MAG-15 indicates that the microwave - and vinegar-processed American ginseng extracts (about 14% acidity) treated for 15 minutes produced the highest amount of ginsenoside $Rg_3$ (0.772%), $Rg_5$ (1.330%), and $Rk_1$ (0.386%). This indicates that American ginseng treated with microwave and vinegar had the quantity of the ginsenoside $Rg_3$ over 32 times the amount of the ginsenoside $Rg_3$ (which was not found in raw and American ginsengs) in the average commercial Red ginseng.
인삼 nectar, 인삼추출물이 함유된 orange juice, 인삼 drink 제등을 정상식이에 첨가 (555 mg Ginseng extract/kg of diet, 1,110 mg Ginseng extract/kg diet)하여 이유 직후의 Sprgue-Dawley strain 백쥐 40마리를 8마리씩 5군으로 나누어 12주간 사육하였다 12주후에 체중증가율, 사료효율, 장기의 무게, hematocrit value, serum cholesterol content, serum GOT and GPT 활성등을 측정하여 정상식이군과 비교한 결과 체중증가율, 사료효율, 장기의 무게, hematocrit value, SGOT 활성등을 모두 정상식이군에 비해서 실험군이 통계적으로 유의차를 보이지 않았으나, s-GOT 활성은 대조군에 비해 실험군이 다소 낮은 경향을 관찰할 수 있었고, s-cholesterol 농도는 대조군에 비해 다소 높은 경향이었으나 통계적인 유의차는 없었다. 백쥐 각군의 간, 신장, 비장등의 조직세포를 검사한 바 하등의 이상 조직을 발견하지 못하였다. 12주 실험이 끝난 후 체중을 측정하고 swimming test를 실시한 결과 대조군에 비해 실험군의 수영시간이 연장되었으며 V군에서는 유의성있게 연장되었다.
Background: Continuous exposure to high temperatures can lead to heat stress. This stress response alters the expression of multiple genes and can contribute to the onset of various diseases. In particular, heat stress induces oxidative stress by increasing the production of reactive oxygen species. The liver is an essential organ that plays a variety of roles, such as detoxification and protein synthesis. Therefore, it is important to protect the liver from oxidative stress caused by heat stress. Korean ginseng has a variety of beneficial biological properties, and our previous studies showed that it provides an effective defense against heat stress. Methods: We investigated the ability of Korean Red Ginseng and Korean black ginseng extracts (JP5 and BG1) to protect against heat stress using a rat model. We then confirmed the active ingredients and mechanism of action using a cell-based model. Results: Heat stress significantly increased gene and protein expression of oxidative stress-related factors such as catalase and SOD2, but treatment with JP5 (Korean Red Ginseng extract) and BG1 (Korean black ginseng extract) abolished this response in both liver tissue and HepG2 cells. In addition, JP5 and BG1 inhibited the expression of inflammatory proteins such as p-NF-κB and tumor necrosis factor alpha-α. In particular, JP5 and BG1 decreased the expression of components of the NLRP3 inflammasome, a key inflammatory signaling factor. Thus, JP5 and BG1 inhibited both oxidative stress and inflammation. Conclusions: JP5 and BG1 protect against oxidative stress and inflammation induced by heat stress and help maintain liver function by preventing liver damage.
본 연구는 홍삼추출물의 화장품소재로서의 항염증 효과의 가능성을 확인하는 것을 목적으로 한다. 본 연구에서는 홍삼 추출물을 사용하여 항염증에 대한 생물학적 활성평가를 수행하였다. 대식세포인 RAW 264.7 세포에서 시료의 항염증 효과를 평가하기 위해 MTT assay를 이용한 홍삼 추출물의 독성평가와 nitric oxide 생성 저해 활성 및 염증관련 단백질 및 유전자의 발현량을 확인하였다. LPS로 유도된 RAW 264.7 세포 내에서 시료의 nitric oxide 저해활성은 25 ㎍/ml에서 71.2 %의 우수한 효능을 나타내었으며, western blot 시험결과 iNOS, COX-2 단백질의 발현은 농도 의존적으로 감소하는 것으로 확인하였다. 이러한 실험 결과를 바탕으로 홍삼추출물이 항염 효과를 가진 화장품 소재로서의 가치를 제안할 수 있다.
Ginseng saponins have been known as main active principles and are quantified as the index components of ginseng and its products for quality control. However ginseng saponins are easily hydrolyzed in acidic solutions of crude drug preparations. Due to the hydrolysis of saponins in acidic condition, it is generally difficult to determine ginseng saponins In crude drug preparations. Ginseng saponins, prosapogenins and sapogenins of crude drug extracts were quantified by HPLC. Ginseng saponins were quantified by HPLC on $Lichrosorb-NH_2$ column with acetonitrile/water/1-butanol(80:20:10, v/v). Ginseng $prosapogenin-Rg_2$ and $-Rg_2$ were extracted with ethyl acetate from $50\%$ acetic acid hydrolyzates of saponin fractions and quantified by HPLC on $Lichrosorb-NH_2$ column with acetonitrile/water(90:10, v/v). Ginseng sapogenins, panafadiol and panaxatriol, were extracted with diethyl ether from $7\%-sulfuric$ acid hydrolyzates of saponin fractions and quantified by HPLC on ${\mu}-Bondapak\;C_{18}$ column with acetonitrile/methano1/chloroform(83:10:7, v/v). These methods of analyses of sapogenins and prosapogenins were more useful for quality control than those of ginseng saponins in some of crude drug preparations.
홍삼 사포닌의 항산화 작용을 나타내는 활성성분을 screening하기 위하여 홍삼 추출물(물 추출물, 알코올 추출물, 지용성분획, 총 사포닌, PD 및 PT)이 항산화 효소(SOD, catalase)의활성도 변화와 $H_2O$$_2$ 및 MDA의 함량 변화에 미치는 영향을 조사하였다. 항산화 효소인 SOD의 활성도를 조사해 본 결과 지용성 추출물, PD, 알코올 추출물 투여군 순으로 활성도를 높이는 것으로 조사되었으며, SOD에 의한 중간 생성물인 $H_2O$$_2$의 함량을 조사한 결과 모든 추출물 투여군에서 감소하였으며, 그 중에서도 PT 알코올 추출물 및 PD투여군이 유의성있게 감소하였다. catalase 활성도는 지용성 추출물 투여군이 가장 높았고, 그 다음으로 총 사포닌, 알코올 추출물 투여군 순으로 조사되었다. 유리기에 의해 생성된 지질과 산화의 최종산물인 MDA의 함량은 모든 추출물 투여군에서 유의성(p<0.01) 있게 감소하였으며, 그 중에서도 지용성 추출물, 알코올 추출물, PD투여군 순으로 가장 많이 감소하였다. 이와 같은 홍삼 사포닌의 항산화 효과는 SOD및 catalase와 같은 항산화 효소의 직접적인 작용과 홍삼의 특정 성분들이 생체내에서 내인성 항산화 물질의 합성능력을 강화시킴으로서 산화적 손상에 대한 방어기전을 향상시키는 결과로 생각되며, 그중에서 지용성 추출물과 PD분획물이 가장 효과적인 성분으로 생각된다.
백삼과 홍삼 추출물이 APAP에 의한 산화적 급성 간손상에 대한 보호효과를 마우스를 대상으로 검토한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 백삼과 홍삼 추출물의 간장보호 활성에 관한 기전을 규명하고자 항산화효소인 SOD, CAT의 활성도는 APAP를 복강 주사한 실험군에서 대조군에 비해 효소활성이 감소하였고, 백삼과 홍삼추출물을 전처리한 실험군에서는 APAP군에 비해 효소 활성도가 증가하는 경향을 보였다. 2. 지질과산화물의 함량은 APAP를 복강 주사한 실험군이 대조군에 비해 유의성 있게 증가하였고 백삼과 홍삼 추출물을 전처리한 실험군에서는 APAP군에 비해 지질과산화물의 생성을 유의성 있게 억제하였다. 3. 백삼과 홍삼 추출물의 투여량을 각각 50mg/kg, 250mg/kg으로 최대 5일간 전처리하여 APAP의 급성 간손상에 대한 보호효과를 조사한 결과 인삼 추출물의 투여량에는 크게 영향을 받지 않는 것으로 보였다. 따라서 백삼과 홍삼 추출물은 APAP의 활성 대사체에 의한 급성 산화적 간손상을 억제하였으며, 이는 인삼 추출물 성분이 항산화 효소와 항산화물질로 구성된 항산화 방어 체계를 통한 것임을 알 수 있다. 본 연구의 결과를 바탕으로 백삼과 홍삼 추출물이 간장 보호제로서의 개발 가능성이 있으며, APAP중독에 매우 효과적인 치료제로서 임상에서 활용될 수 있다고 생각된다.
주기적인 고온환경 부가와 백삼 및 홍삼 추출물의 투여가 흰쥐의 체중, 식이섭취량, 혈액성분, 장기중량 및 간의 지질과 산화에 미치는 영향을 살펴보았다. 흰쥐를 이용한 동물모델 실험결과, 매일 $38^{\circ}C$에서 5시간씩 7일간 고온환경을 부가한 경우 주당 평균체중 증가률이 감소하는 현상이 관찰되었으나 뚜렷한 식이섭취량 변화는 없었다. 반면 고온환경 부가전후에 백삼과 홍삼 추출물을 투여한 경우에는 고온환경 부가에 따른 평균 체중증가률 감소가 억제되었다. 고온환경 부가에 의한 혈액성분 변화를 살펴본 결과에서는 적혈구수와 혈색소량은 큰 차이를 나타내지 않았으나 백혈구수는 다소 증가하는 경향을 나타내었으며 인삼 추출물 투여는 백혈구수 증가도 억제하는 효과를 나타내었다. 고온환경 부가에 따라 장기중 간장의 중량비가 감소하였고 간의 MDA 함량이 크게 증가하였다. 인삼 추출물 투여시에 고온환경부가에 따른 간의 중량감소 및 MDA 함량 증가 등의 변화도 억제되는 효과가 있었다. 특히 간의 중량변화 및 간의 지질과산화 억제효과에 있어서는 백삼보다 홍삼 추출물의 효과가 다소 우수하였으며 통계학적으로 유의적인 수준은 아니었다. 향후 인삼중의 유효성분 구명이나 관련 물질들의 활성 변화에 대한 연구가 필요할 것으로 판단되지만 고온 등 급격한 주위환경가 변화에 대한 인삼의 생체항상성 유지효과를 일부 증명할 수 있는 결과인 것으로 판단되었다.
인삼중에 함유되어 있는 항산화물질의 본태를 파악하기 위하여 인삼의 각종 용매(petroleum ether, chleroform, chleroform-methanol, methanol 및 methanol-water)추출물들이 혼합 불포화지방산 메틸에스테르(MEUFA)의 자동산화에 미치는 영향을 in vitro에서 검토한 결과는 다음과 같다. 1. 인삼의 각종 용매 추출물들은 모두 항산화작용을 나타내어 MEUFA의 자동산화에 의한 지질 과산화물의 형성을 억제하였다. 그 중에서도 클로로포름 및 클로로포름-메탄올(2 : 1, v/v)추출물들이 보다 강한 항산화작용을 나타내었다. 2. Olcotte 등의 oven test에 의한 무게의 증가는 MEUFA의 자동산화에 의한 과산화물의 형성에 기인함이 확인되었다. 3. 인삼의 각 추출물들은 MEUFA의 지질 과산화물형성의 유도기간을 연장시켰다. 4. 각 추출물들의 항산화작용에 있어서 Olcott 등의 oven test에 의한 무게의 측정 Lea법과 Rhodan 철법에 의한 POV 측정 등의 결과에서 추정되는 작용은 상호간 잘 일치되었다. 이상의 결과로부터 인삼중에는 항산화물질들이 인삼성분으로서 함유되어 있음이 in vitro에서 확인되었다.
인삼박의 가용성 추출물을 용출시킨 후 남은 잔여 묵인 인삼박에 상황버섯, 영지버섯, 운지버섯, 표고버섯 균사체를 접종ㆍ배양하여 얻어진 인삼박 균사체 추출액의 전자공여능 및 간암세포(Hep3B)와 고형암(S-180)의 증식에 미치는 영향을 조사하였다. 인삼박 균사체의 전자공여능은 500-10,000ppm 범위에서 농도가 진할수록 높게 나타났으며 운지가 4종류의 균사체 추출물 중 가장 높았다. 간암세포의 형태변화 및 증식 억 제 에 미 치 는 영 향은 에 탄을 추출물이 물 추출물보다 효과적이었으며, 60% 에탄을 추출물 5,000 ppm에서 상황, 영지,운지에 비해 표고가 99.1%로 가장 강한 세포증식억 제 효과를 나타내었다. S-180 고형 암 억제효과는 대조군에 비해 운지가 65%로 가장 컸으며 영지 61%, 표고 56%, 상황 59%의 고형암 억제효과를 나타내었다. 따라서 인삼박을 이용하여 배양된 버섯 균사체가 간암세포와 고형암의 증식 억제에 효과적인 것으로 관찰되므로써 항암물질의 자원으로서 그 활용성이 기대된다고 하겠다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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