검정콩 안토시아닌의 항산화력과 암세포독성을 분석한 결과는 다음과 같다. 1. 안토시아닌 함량은 일품검정콩이 공시재료 중 가장 높게 나타났으며, 특히 C3G 함량은 타 계통보다 2배 이상 높았다. 2. 안토시아닌을 분획한 후 각각의 pigment로 항산화 효과를 분석한 결과 TEAC 법과 DPPH법 모두 C3G, D3G, 및 Pt3G의 효과가 인정되었으며, C3G와 D3G의 항산화력이 높게 나타났다. 일품검정콩과 재래속청간 품종 비교에서는 일품검정콩이 3가지 분획 모두 재래속청 보다 항산화 효과가 높았으며, 이는 TEAC 법과 DPPH법 공히 같은 경향이었다. 3. 인간 암세포인 Jurkat T 세포와 MCF-7 세포에 안토시 아닌 개별색소(C3G, D3G 및 Pt3G)를 $100{\sim}500\;{\mu}g/mL$ 농도로 처리하고 암세포에 대한 독성을 관찰한 결과, 3가지 시험물질 모두 두 가지 암 세포에서 세포독성 효과를 나타내었다. 이와 같은 결과는 검정콩 안토시아닌이 여러 가지 생리활성 효과를 가지고 있음을 나타내는 결과로 판단된다.
HIV-1 Tat, a strong transactivator, is essential for the HIV-1 replication and AIDS progression. The Tat function is markedly inhibited by human p53 anti-oncogene. However, the detail mechanism has not yet been clearly revealed. In our previous report, we have addressed that p53 is unlikely to interact directly with HIV-1 Tat. In the consecutive experiments, Tat-phosphorylation was found to increase in proportional to the amounts of transfected p53. This work was initiated to identify the signaling factor that is involved in the p53-mediated Tat suppression. Several protein kinases were tested for the phosphorylation of Tat, and we found that PKR is likely to be involved in the p53-mediated Tat suppression. PKR was co-immunoprecipitated by anti-Tat antibody in the Tat-expressing Jurkat cell lysates only when the cells were transfected by p53, indicating that PKR-Tat interaction depends on the p53 activity. The interaction seems to result in PKR-mediated Tat-phosphorylation. Tat function was not blocked by p53 when co-transfected trasiently with antisense-PKR. We have generated PKR-knock out Jurkat cell clone. The PKR defective Jurkat cells didn't show the p53-mediated Tat suppression. These data indicate that p53-mediated Tat suppression is strongly associated with PKR. PKR-mediated Tat phosphorylation experiments are now under investigation by kinase assay and co-immunoprecipitation in the presence or absence of p53.
우리나라 중요한 식품 원료인 전통 매주로부터 분리한 단독균의 접종 메주의 암세포 저해효과를 검색하기 위하여, 민간유래의 혈액암 세포주에 대한 저해활성을 MTT assay로 분석하였다. 먼저 전통 메주로부터 21종의 단독균을 분리한 후 각각 접종하여 발효된 단독균의 메주시료를 조제한 다음 80% methanol로 추출하였다. 메주 메탄올추출물은 혈액암세포중 HL60에서는 다소 낮은 성장 저해효과를 보였으나, U937과 Jurkat cell에서는 저해효과가 큰 것으로 나타났다. 특히 Mucor속과 Absidia속 Aspergillus속으로 제조된 메주들에서 이들 혈액암세포에 대해 저해효과가 큰 것으로 나타났다. 그러나 모든 메주 메탄올추출물들은 인간의 정상 lymphocyte에서 대해서는 90% 이상의 높은 생존율을 나타내어 정상 세포에 대한 성장 저해 효과가 거의 없음을 보며주었다. 이는 단독균의 메주시료가 가지는 세포독성이 암세포에 대한 특이적인 작용인 것으로 나타났다.
Background: T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) is a kind of aggressive hematological cancer, and the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway is activated in most patients with T-ALL and responsible for poor prognosis. 20(S)-Ginsenoside Rh2 (20(S)-GRh2) is a major active compound extracted from ginseng, which exhibits anti-cancer effects. However, the underlying anticancer mechanisms of 20(S)-GRh2 targeting the PI3K/Akt/mTOR pathway in T-ALL have not been explored. Methods: Cell growth and cell cycle were determined to investigate the effect of 20(S)-GRh2 on ALL cells. PI3K/Akt/mTOR pathway-related proteins were detected in 20(S)-GRh2-treated Jurkat cells by immunoblotting. Antitumor effect of 20(S)-GRh2 against T-ALL was investigated in xenograft mice. The mechanisms of 20(S)-GRh2 against T-ALL were examined by cell proliferation, apoptosis, and autophagy. Results: In the present study, the results showed that 20(S)-GRh2 decreased cell growth and arrested cell cycle at the G1 phase in ALL cells. 20(S)-GRh2 induced apoptosis through enhancing reactive oxygen species generation and upregulating apoptosis-related proteins. 20(S)-GRh2 significantly elevated the levels of pEGFP-LC3 and autophagy-related proteins in Jurkat cells. Furthermore, the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway was effectively blocked by 20(S)-GRh2. 20(S)-GRh2 suppressed cell proliferation and promoted apoptosis and autophagy by suppressing the PI3K/Akt/mTOR pathway in Jurkat cells. Finally, 20(S)-GRh2 alleviated symptoms of leukemia and reduced the number of white blood cells and CD3 staining in the spleen of xenograft mice, indicating antitumor effects against T-ALL in vivo. Conclusion: These findings indicate that 20(S)-GRh2 exhibits beneficial effects against T-ALL through the PI3K/Akt/mTOR pathway and could be a natural product of novel target for T-ALL therapy.
Lee, Beom Zoo;Lee, Ik Soo;Pham, Chau Ha;Jeong, Soon-Kyu;Lee, Sulhae;Hong, KwangWon;Yoo, Hee Min
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제30권8호
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pp.1214-1221
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2020
Esculetin 6-O-β-D-arabinofuranosyl-(1 → 6)-β-D-glucopyranoside (EAG) is a coumarin glycoside isolated from the stem bark of Fraxinus rhynchophylla. This study scrutinized the anti-proliferative activity of EAG on blood cancer-derived Jurkat leukemic cells. Cell viability assays in leukemic cancer cells determined that EAG possesses potent anti-proliferative effects. Moreover, treatment with EAG increased the proportion of apoptotic cells, resulted in cell cycle arrest being induced at the subG0/G1 phase, and reduced the proportion of cells present in the S phase. In addition, mitochondrial membrane potential was reduced by EAG in Jurkat cells. Additionally, EAG triggered apoptosis that was mediated by the downregulation of BCL-XL, p-IκBα, and p-p65 expressions in addition to the upregulation of cleaved Caspase 3 and BAX expressions. These findings revealed that the toxic effect of EAG was mediated by intracellular signal transduction pathways that involved a mechanism in which reactive oxygen species (ROS) were upregulated. Thus, this study concludes that EAG could potentially serve as a therapeutic agent for leukemia.
The purpose of this research was to investigate the effect of Sabaek-San(SBS) on the activity of immune cell and leukemia cell. The addition of SBS(1 ㎍/㎖) enhanced the proliferation of cultured-splenocytes and thymocytes. And also, administration of SBS(250, 500 mg/kg) accelerated subpopulation of splenic T lymphocytes in BALB/c mice. Administration of SBS eminently enhanced the production of IFN-γ, and IL-4. The treatment of high dose of SBS inhibit the proliferation of Jurkat cells and dose-dependently increased the apoptosis of cultured-Jurkat leukemia cells. These results suggest that SBS have a cell mediated immuno-regulatory effect.
Park, Youn-Hee;Moon, Eun-Kyung;Shin, Yong-Kyu;Bae, Myung-Ae;Kim, Jong-Guk;Kim, Young-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제10권1호
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pp.16-20
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2000
The aqueous extract from the cultural mycelium of Paecilomyces japonica showed cytotoxicity against several tumor cells including Jurkat, U937, HL-60, HepG2, BW5147.G.1.4, and NIH3T3. When the aqueous extract was fractionated by sequential organic solvent extractions using n-hexane and ethyl acetate, the ethyl acetate fraction appeared to contain the most cytotoxic activity, and the $IC_{50}$ values for various tumor cells were in the range from 1.5 to $10.0{\;}\mu\textrm{g}/ml$. To elucidate the cellular mechanism underlying the induced cytotoxicity, the apoptotic DNA fragmentation along with the cell cycle proression was examined in Jurkat T cells following the ethyl acetate fraction treatment. In the presence of $2.5{\;}\mu\textrm{g}/ml$ of the ethyl acetate fraction, apoptotic DNA fragmentation of the cells was detected within 1 h and increased upto 24 h in a time-dependent manner. Under the same conditions, a sub-G1 peak was detectable by flow cytometry. These results indicate that the cytotoxic effect of P. japonica on tumor cells is attributable to the induced apoptosis.
Objectives : The water extract of Bowon-tang composited with thePanax, AstragalusandGlycyrrhiza Radixhas been traditionally used for treatment of a sickly child and smallpox in oriental medicine. However, little is known about the regulatory effects of Bowon-tang on the production, expression and activity of immune mediators [nitric oxide, prostaglandin E2, inducible nitric oxide synthetase, cyclooxygenase-2], the macrophage activation factor production, the proliferation, subset expression, the killing activity, and the capping in immune cells.Methods : In this study, we investigated the effects of water extracts from Bowon-tang,Panax, AstragalusorGRin mouse immune cells or human Jurkat T cells. Each extract (25-200 ㎍/㎖)perse had no cytotoxic effect in unstimulated macrophages, but concentration-dependently regulated NO and PGE2production, iNOS expression, and COX-2 activity in mouse peritoneal macrophages with MAF stimulation. These regulatory effects were synergistically increased by their combination (Bowon-tang).Results : The extract of Bowon-tang concentration-dependently regulated T cell proliferation, CD4+and CD8+expression, and NK killing activity in mouse splenocytes and capping in Jurkat T cells.Conclusions : These results suggest that the water extract of Bowon-tang composited with thePanax, AstragalusandGRmay be useful for therapeutic drugs against a sickly constitution and immune diseases, probably by regulating the production of immune mediators.
Seo, Jeong Yeon;Choi, Ji Won;Lee, Jae Yeon;Park, Young Shik;Park, Yong Il
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권6호
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pp.860-873
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2018
Although ginseng marc is a by-product obtained during manufacturing of various commercial ginseng products and has been routinely discarded as a waste, it still contains considerable amounts of potential bioactive compounds, including saponins and polysaccharides. Previously, we reported that ginseng oligosaccharides derived from ginseng marc polysaccharides by enzymatic hydrolysis exert immunostimulatory activities in macrophages and these activated macrophages are in turn able to inhibit the growth of skin melanoma cells by inducing apoptosis. In the present study, a more detailed investigation of the immunostimulatory activity and underlying action mechanisms of an enzymatic hydrolysate (GEH) containing these oligosaccharides derived from ginseng marc polysaccharides was performed. The levels of proinflammatory cytokines and anti-inflammatory cytokines were measured in GEH-stimulated RAW264.7 macrophages using RT-PCR analysis and ELISA. The expression levels of Toll-like receptor 2 (TLR2) and TLR4, Dectin-1, and MerTK were measured by RT-PCR analysis or western blot analysis, and the phagocytic activities of GEH-challenged bone marrow-derived macrophages toward apoptotic Jurkat cells were assayed using fluorescence microscopy. GEH induced the production of both proinflammatory cytokines $TNF-{\alpha}$ and IL-6, and anti-inflammatory cytokine IL-10 in RAW 264.7 cells. The expression of the TLR2 and MerTK mRNAs was increased upon GEH treatment. Phagocytosis of apoptotic Jurkat cells was enhanced in GEH-treated macrophages. Based on the results, this enzymatic hydrolysate (GEH) containing oligosaccharides exerts immunostimulatory effects by maintaining the balance between M1 and M2 cytokines, facilitating macrophage activation and contributing to the efficient phagocytosis of apoptotic cells. Therefore, the GEH could be developed as value-added, health-beneficial food materials with immunostimulatory effects.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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