• 제목/요약/키워드: In vivo development

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Zebrafish as a research tool for human diseases pathogenesis and drug development

  • Kim, Young Sook;Cho, Yong Wan;Lim, Hye-Won;Sun, Yonghua
    • 한국응용과학기술학회지
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    • 제39권3호
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    • pp.442-453
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    • 2022
  • 다양한 동물 모델이 인간 질병, 의약품의 효능 및 작용 메커니즘을 연구하는 데 사용되고 있다. Zebrafish(Danio rerio)는 여러 가지 장점이 있어 인간 질병에 대한 중개 연구의 모델로 점점 더 폭넓게 활용되고 있다. 본 논문은 Pubmed, Google Scholar, Scopus에서 2020년 12월까지 최근 10년간 zebrafish 모델, 천연물(한약), in vivo 스크리닝의 키워드를 사용하여 저널에 게재된 논문을 검토하여 필요한 정보를 얻었다. 이 리뷰에서 우리는 천연물(한약) 연구에 대한 다양한 제브라피쉬 질병 모델의 최근 경향에 대해 논의하였다. 특히, 암, 안질환, 혈관 질환, 당뇨병 및 합병증, 피부질환에 중점을 두었고, zebrafish 배아를 사용하여 이들 질병에 대한 의약품의 분자 작용 메커니즘에 관해 언급하였다. Zebrafish는 실험실에서 임상 연구까지의 격차를 줄이는 데 중추적 역할을 할 수 있는 중요한 동물 모델이다. Zebrafish는 의약품이나 화장품 개발, 질병의 병인론을 이해하기 위해 사용되고, 이로 인해 생의학 연구에서 설치류의 사용을 줄이는 데 크게 기여하고 있다.

A Rapid and Convenient Method for in Vivo Fluorescent Imaging of Protoscolices of Echinococcus multilocularis

  • Yang, Tao;Wang, Sibo;Zhang, Xuyong;Xia, Jie;Guo, Jun;Hou, Jixue;Zhang, Hongwei;Chen, Xueling;Wu, Xiangwei
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제54권2호
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    • pp.225-231
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    • 2016
  • Human and animal alveolar echinococcosis (AE) are important helminth infections endemic in wide areas of the Northern hemisphere. Monitoring Echinococcus multilocularis viability and spread using real-time fluorescent imaging in vivo provides a fast method to evaluate the load of parasite. Here, we generated a kind of fluorescent protoscolices in vivo imaging model and utilized this model to assess the activity against E. multilocularis protoscolices of metformin (Met). Results indicated that JC-1 tagged E. multilocularis can be reliably and confidently used to monitor protoscolices in vitro and in vivo. The availability of this transient in vivo fluorescent imaging of E. multilocularis protoscolices constitutes an important step toward the long term bio-imaging research of the AE-infected mouse models. In addition, this will be of great interest for further research on infection strategies and development of drugs and vaccines against E. multilocularis and other cestodes.

Geft is dispensable for the development of the second heart field

  • Fan, Xiongwei;Hou, Ning;Fan, Kaiji;Yuan, Jiajia;Mo, Xiaoyang;Deng, Yun;Wan, Yongqi;Teng, Yan;Yang, Xiao;Wu, Xiushan
    • BMB Reports
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    • 제45권3호
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    • pp.153-158
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    • 2012
  • Geft is a guanine nucleotide exchange factor, which can specifically activate Rho family of small GTPase by catalyzing the exchange of bound GDP for GTP. Geft is highly expressed in the excitable tissue as heart and skeletal muscle and plays important roles in many cellular processes, such as cell proliferation, migration, and cell fate decision. However, the in vivo role of Geft remains unknown. Here, we generated a Geft conditional knockout mouse by flanking exons 5-17 of Geft with loxP sites. Cre-mediated deletion of the Geft gene in heart using Mef2c-Cre transgenic mice resulted in a dramatic decrease of Geft expression. Geft knockout mice develop normally and exhibit no discernable phenotype, suggesting Geft is dispensable for the development of the second heart field in mouse. The Geft conditional knockout mouse will be a valuable genetic tool for uncovering the in vivo roles of Geft during development and in adult homeostasis.

In Vivo Development of Vitrified Rat Embryos: Effects of Timing and Sites of Transfer to Recipient Females

  • Han, Myung-Sook;Koji Niwa;Magosaburo Kasai
    • 한국발생생물학회:학술대회논문집
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    • 한국발생생물학회 2003년도 제3회 국제심포지움 및 학술대회
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    • pp.80-80
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    • 2003
  • In cryopreserved rat embryos, survival rates obtained in vitro are not always consistent with the rates obtained in vivo. To determine the optimal conditions for in vivo development to term, rat embryos at the 4-cell, 8-cell and morula stages were vitrified in EFS40 by a 1-step method and transferred into oviducts or uterine horns of recipients at various times during pseudopregnancy. Vitrified and fresh 4-cell embryos only developed after transfer into oviducts of asynchronous recipients on Day -1 to -2 of synchrony, i.e., at a point in pseudopregnancy that was 1-2 days earlier than the embryos. However, although about half the vitrified embryos transferred into oviducts on Day -1 developed to term, only a minority of embryos transferred at later times did so, whether vitrified (10-34%) or fresh (24-33%), suggesting that this may not be the most suitable stage for cryopreservation. Very few 8-cell embryos, either vitrified or fresh, developed when transferred into oviducts on Day 0 to -0.5. However, when transferred into uterine horns, high proportions of vitrified 8-cell embryos (-63%) developed to term in reasonably synchronous recipients (Day 0 to -0.5) but not in more asynchronous ones (6%; Day-1). A majority of vitrified morulae also developed to term (52-68%) in a wider range of recipients (Day 0 to -1), the greatest success occurring with recipients on Day -0.5. Similar proportions of vitrified and fresh 4-cell embryos, 8-cell embryos and morulae developed to term when there was appropriate synchronization between embryo and recipient. Thus vitrification of preimplantation stage rat embryos does not appear to impair their developmental potential in vivo.

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In Vivo Disease Control Efficacy of Isoquinoline Alkaloids Isolated from Corydalis ternata against Wheat Leaf Rust and Pepper Anthracnose

  • Han, Jae Woo;Shim, Sang Hee;Jang, Kyoung Soo;Choi, Yong Ho;Kim, Hun;Choi, Gyung Ja
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제28권2호
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    • pp.262-266
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    • 2018
  • Phytochemicals have been considered as alternatives for synthetic fungicides because of their biodegradability and low toxicity. In this study, we found that the methanolic extract of Corydalis ternata suppressed the development of plant diseases caused by Puccinia triticina and Colletotrichum coccodes. As the antifungal substance, three isoquinoline alkaloids (dehydrocorydaline, stylopine, and corydaline) were isolated from C. ternata. These active compounds also exhibited in vivo antifungal activity against P. triticina and C. coccodes. Taken together, our results suggest that C. ternata and its active compounds can be used to control plant diseases.

Fusarium속 균주로부터 분리한 Equisetin, Zearalenone 및 8'-Hydroxyzearalenone의 식물병원곰팡이에 대한 항균활성 (Antifungal Activities of Equisetin, Zearalenone, and 8'-Hydroxyaearalenone Isolated from Fusarium Species against Plant Pathogenic Fungi.)

  • 김진철;박중협;최경자;김흥태;최용호;조광연
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제30권4호
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    • pp.339-345
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    • 2002
  • 가지에서 분리한 F. equiseti FO-68균주와 벗풀에서 분리한 Fusarium sp. FO-510균주로부터 항균물질을 분리한 후 이들의 식물병원곰팡이에 대한 항균활성을 in vitro및 in vivo에서 조사하였다. FO-68균주의 쌀배양체로부터 하나의 항생물질을 순화하였는데 , 이 물질은 equisetin이라는 물질로 동정되었다. 그리고 FO-510균주의 쌀배양체로부터는 두 개의 항균활성 물질을 분리하였는데, 이들은 zearalenone과 8'-hydroxyzearalenone으로 동정되었다. Equisetin과 zearalenone은 in vitro에서 실험한 식물병원곰팡이 대부분에 대해서 높은 항균활성을 보였지만, 8'-hydroxyzearalenone은 거의 항균활성이 없었다. In vivo assay에서 equisetin은 토마토ㆍ잿빛곰팡이병과 토마토ㆍ역병에 방제효과가 컸으며, zearalenone은 벼ㆍ도열병, 벼ㆍ잎집무의마름병, 토마토ㆍ잿빛곰팡이병 및 토마토ㆍ역병에 대하여 효과를 나타내었다. 하지만 8'-hydroxyzearalenone는 토마토ㆍ잿빛곰팡이병을 제외한 나머지 식물병의 발생은 억제하지 못했다. Equisetin, zearalenone 및 8'-hydroxyzearalenone의 항진균활성은 본 논문에서 처음으로 보고하는 바이다.

The role of sonic hedgehog signaling pathway in in vitro oocyte maturation

  • Lee, Sanghoon;Cho, Jongki
    • 한국동물생명공학회지
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    • 제36권4호
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    • pp.183-188
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    • 2021
  • In vitro maturation (IVM) of oocytes is the procedure where the immature oocytes are cultivated in a laboratory until they are mature. Since IVM oocytes generally have low developmental competence as compared to those matured in vivo, development of an optimal IVM culture system by fine-tuning culture conditions is crucial to maintain high quality. In-depth knowledge and a deep understanding of the in vivo physiology of oocyte maturation are pre-requisites to accomplish this. Within ovarian follicles, various signaling pathways that drive oocyte development and maturation regulate interaction between oocytes and surrounding somatic cells. This review discusses the sonic hedgehog (SHH) signaling pathway, which has been demonstrated to be intimately involved in folliculogenesis and oocyte maturation. Advances in elucidating the role of the SHH signaling pathway in oocyte maturation will aid attempts to improve the current inferior in vitro oocyte maturation system.

초자화 동결된 생쥐 미성숙란의 체외/체내 발달 (In Vitro/In Vivo Development of Vitrified Immature Mouse Oocytes)

  • 이봉경;김은영;남화경;이금실;윤산현;박세필;임진호
    • 한국가축번식학회지
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    • 제23권2호
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    • pp.133-139
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    • 1999
  • 본 연구는 생쥐 미성숙란올 초자화 동결-융해하였올 때, 체외/체내 배발달능을 검토하고자 실시하였다. 생쥐 미성숙란은 동해제인 EFS40(40% ethylene glycol, 18% ficoll, 0.5 M sucrose)으로 초자화동결되었으며, 융해 후 16 시간동안 체외성숙을 유도하여, 제 1 극체가 나타난 성숙된 난자를 1~2$\times$$10^{6}$$m\ell$ 농도의 정자로 체외수정시킨 다음, 난할율 ($\geq$ 2- 세포기)과 체외 / 체내 발달율을 조사하였다. 쥐 미성숙란을 초자화 동결 융해하였던 군 (63.1%)의 체외성숙율은 동해제 노출군 (67.5%)과 대조군(66.3%)에 유사하게 나타났으나, 초자화 동결군의 난할율과 배반포형성율 (64.9, 59.0%)은 동해제노출군 (83.7, 74.7%)과 대조군 (90.7, 83.7%) 에 비해 유의하게 감소하였다 (p<0.05). 그러나, 초자화 동결 융해하였던 생쥐 미성숙란으로부터 얻어진 배반포기배를 가임신 생쥐에 이식하였을 때, 체내발달율인 전체착상율 (31.3%)과 착상된 배로부터 발달된 산자형성율 (66.7%)은 대조군의 결과 (40.8%, 58.1%)와 각각 비교하였을 때 유의차가 인정되지 않았다. 따라서, 생쥐 미성숙란을 초자화 동결-융해하였을 때, 체외발달율은 유의하게 감소하였지만 생성된 배반포기배로부터의 산자발달율은 대조군과 유사하게 나타나, EFS40을 이용한 초자화 동결 방법은 생쥐 미성숙란 동결에 유용하게 이용될 수 있다는 것을 알 수 있었다.

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Morphological Characteristics of Pig Blastocysts Produced by Somatic Cell Nuclear Transfer

  • Y.M. Han;D.B. Koo;Park, Y.H.;Park, J.S.;Kim, H.N.;Y.K. Kang;W.K. Chang;Lee, K.K.
    • 한국동물번식학회:학술대회논문집
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    • 한국동물번식학회 2001년도 춘계학술발표대회
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    • pp.68-68
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    • 2001
  • Blastocyst formation, consisting of the inner cell mass (ICM) and trophectoderm (TE), is the first differentiation process during embryonic development in mammals. It has been hypothesized that the proportion of ICM to TE in the blastocyst may be crucial for subsequent developmental competence of early embryos, which it may be expressed as a sensitive indicator for evaluating in vitro systems. In this study ICM/total cell ratio of nuclear transfer (NT) embryos was compared with IVF-derived and in vivo embryos. Somatic cell nuclei obtained from a fetus at Day 40 of gestation were transferred into the enucleated oocyte and then cultured in NCSU 23 medium for 6 days as previously described (Koo et al., Biol. Reprod. 2000; 63:986-992). ICM and TE cells of blastocysts were determined by using a differential staining method (Han et al., Biol. Reprod. 1999; 60:1110-1113). Development rate (9.8$\pm$2.5%, 23/225) to the blastocyst stage of NT embryos was lower than IVF embryos (23.8$\pm$2.7%, 53/223). Thus, a difference was detected in the in vitro developmental rate to blastocyst stage between NT and IVF-derived embryos (P<0.05). In the next experiment, we investigated ICM and TE nuclei to assess the quality of blastocysts that produced by NT, IVF and in vivo, respectively. NT blastocysts (27.6$\pm$8.3) showed a smaller total cell number than IVF-derived (42.6$\pm$17.4) and in vivo embryos (283.9$\pm$103.5) (P<0.05). Ratios of ICM/total cells in NT, IVF and in vivo blastocysts were 15.1$\pm$ 18.6% (n=56), 12.3$\pm$9.2% (n=57) and 30.4$\pm$6.8% (n=40), respectively. Individual blastocysts for the ratio of ICM/total cells were assigned to 3 groups (I; <20%, II; 20 to 40% and III;>40%). As the results, most in vivo blastocysts (97.5%, 39/40) were distributed into group II while most NT (78.6%, 44/56) and IVF-derived blastocysts (82.5%, 47/57) were allocated to group I. Thus, our data show that NT or IVF-derived embryos have aberrant morphology during early development in vitro systems, suggesting that these anomalies may result in developmental failures of the NT embryos to term.

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초자화 동결된 생쥐 배반포기배의 융해 후 배양조건과 수정란 이식방법에 따른 체외/체내발달 (In Vitro/In Vivo Development after Thawing of Vitrified Mouse Blastocysts by Culture Condition and Embryo Transfer Method)

  • 김묘경;김은영;이봉경;윤산현;박세필;정길생;임진호
    • Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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    • 제24권3호
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    • pp.347-353
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    • 1997
  • 본 실험은 초자화 동결된 생쥐 배반포기배의 융해 후 배양조건 및 이식방법이 난자의 생존에 미치는 효과를 조사하고자 실시하였다. 체외수정후, M16배양액에서 4일동안 배양하여 얻어진 생쥐 배반포기배는 EFS40 (40% ethylene glycol, 18% Ficoll, 0.5 M sucrose가 함유된 PBS)으로 초자화동결하였다. 실험 I에서는 융해 후 배양조건에 따른 난자들의 체외/체내 생존율을 조사하였다. 융해된 난자가 M16과 4 mg/ml 소혈청알부민과 20 가지 아미노산이 함유된 m-CR1 (2% BME 아미노산 용액, 1% MEM 아미노산 용액) 및 단층배양이 유도된 난구세포 (10% FBS가 함유된 m-CR1배양액)에서 각각 배양되었을 때, 융해 후 24시간째 체외 생존율은 배양조건에 따라 차이가 없었다(75.6, 83.1, 82.4%). 그러나 체내 발달율에 있어서 임신 15일째 생존 산자율은 39.0, 49.0, 38.1%로서 유사한 성적을 나타냈으나, 전체 착상율에 있어서는 m-CR1 (80.4%)에 배양되었을 때, M16 (51.2%), 난구세포와 공배양시 (57.1%)보다 유의하게 높은 생존율을 보였다(p<0.05). 실험 II에서는 수정란 이식 방법에 따른 체내 발달율을 조사하였다. 배반포기배를 융해 후 체외배양없이 곧바로 가임신 2, 3일째 대리모에 이식을 실시하였을 때, 가임신 2일째 대리모에서는 임신징후를 얻지 못하였고, 가임신 3일째 대리모에서는 50.0%의 착상율과 15.4%의 정상산자율을 얻었다. 그러나, 이러한 결과는 융해 후, 16시간 배양하여 가임신 3일째 대리모에 이식 (73.5, 57.1%)하는 경우보다 유의하게 낮은 결과였다(p<0.05). 실험 III에서는 초자화 동결된 배반포기배의 융해 후 배양시 발달이 늦어진 수정란의 이용효율을 극대화시키기 위해 융해한 4일째 초기, 5일째 초기, 5일째 팽창 배반포기배의 체외/체내 생존율을 조사하였다. 가장 높은 체외 생존율은 5일째 팽창 배반포기배 (78.3%)에서 얻었으나, 체내 발달율 (산자율, 착상율)에 있어서는 4일째 초기 배반포기배 (33.3, 66.7%)의 경우가, 5일째 팽창 배반포기배(29.0, 38.7%)의 경우보다 높았다(p<0.05). 따라서 본 연구의 결과는 배양조건과 수정란 이식방법에 따라 초자화 동결된 배아의 체외/체내 발달율을 높일 수 있으며, 발달이 늦은 배반포기배의 체내 발달율은 체외 배양시간이 길어질수록 낮아짐으로, 5일째 팽창 배반포기배보다 4일째 초기 배반포기배를 동결하는 것이 더 유용하다는 것을 알 수 있었다.

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