송이균을 접종하여 균근을 형성시킨 소나무 묘목을 실외로 가지고 나갈 경우 송이 균근이 이탈되는 현상을 극복하기 위한 방법을 모색하였다. 실내에서 형성한 송이균 접종 소나무 배지의 초기 토양구조를 유지하며 수분을 공급하고자 배양병의 아래에 구멍을 뚫어 화분형태로 변형을 시킨 후 8종류의 급수방식을 시도하였다. 증류수만을 공급한 경우에는 송이 균근이 이탈되었지만, 2.5% PDMP(24 g potato dextrose broth, 3 g malt extract, 1 g peptone) 용액이나 0.5% Tween 80 용액을 2주 간격으로 관수한 경우에는 3개월의 순화처리 이후에도 송이 균근이 강한 활성을 띠고 있음을 확인하였다. 순화기간동안 송이 균근 형성 비율이 증가하였으며, 순화 성공률은 70% 수준에 이르렀다. 금후 송이를 접종한 소나무 묘목은 이러한 순화처리 과정을 거쳐서 균근을 안정시킨 후 현지에 이식하는 방법을 사용하기를 추천한다.
The antitumor activity of the roots extract of Pueraria thunbergiana was investigated on the basis of cytotoxicity upon the cultured human tumor cell lines, in vitro. The purification of methylene chloride (MC) soluble part and ethylacetate (EA) soluble part of extract by column chromatography furnished seven isoflavonoids, two triterpenoids, one but-2-enolide. The structures of them were established by chemical and spectroscopic means to be lupeol (1), $\beta$-sitosterol (2), biochanin A (3), (-)-tuberosin (4), calycosin (5), daidzein (6), puerarin (7), daidzin (8), (+)-puerol-B 2-O-$\beta$-glucopyranoside (9), formononetin-7-O-$\beta$-glucopyranoside (10). Each isolates ($1{\sim}10$) were evaluated for inhibitory activities on the proliferation of cultured human tumor cell lines such as A549, SK-OV-3, HCT-15 and SK-MEL-2, respectively.
희귀 및 멸종위기 수종 개느삼의 액아배양을 통한 기내증식을 시험하였다. 2년생 개느삼의 액아 줄기를 절편으로 MS, WPM 및 DKW 배지에 배양결과 DKW 배지에서 양호한 생장을 보였다. DKW 배지를 기본으로 BA 단독처리 혹은 BA+TDZ 혼용 처리로 증식시험을 실시하였다. 액아로부터 줄기의 증식은 BA 단독처리보다 BA 및 TDZ의 혼용처리가 효과적이었으며, 절편당 $6{\sim}10$개의 줄기가 유도되었다. 배양과정에서 비정상적인 줄기나 잎은 나타나지 않았으나 TDZ를 0.05 mg/L 이상 처리시에는 잎이 작고, 전개되지 않았으며 과수화 현상이 나타났다. 증식된 줄기의 기내 발근은 대체로 저조하였다. 1/2DKW 배지에 $0.2{\sim}1.0$ mg/L IBA 처리시 전혀 발근되지 않았으며, 0.5 mg/L 및 1.0 mg/L NAA 처리시 각각 9.1% 및 19.2%의 발근을 보였고, 1개의 뿌리만 내렸다 반면 개느삼의 발근유도는 기외 micro-cutting의 방법으로 발근율 향상이 가능하였다. 기내증식된 줄기를 재료로 멸균된 인공 상토(버미큘라이트)에 기외 삽목을 실시한 결과 IBA 100 mg/L 처리시 58.6%까지 발근되었고, 뿌리수도 식물체 당 평균 3개가 유도되었다. 이러한 발근묘는 온실에서 90% 이상 순화되었고, 포지에 이식하여 2년까지 정상 생장이 가능하였다. 본 실험결과는 액아 배양을 통한 개느삼의 기내 줄기증식이 가능하며 micro-cutting의 방법을 좀더 개선하면 효율적인 묘목생산이 가능함을 보여주었다.
Purpose: The aim of this in vitro study was to determine the sensitivity and specificity of cone-beam computed tomography (CBCT) and digital periapical radiography in the detection of mesial root perforations of mandibular molars. Materials and Methods: In this in vitro study, 48 mandibular molars were divided into 4 groups. First, the mesial canals of all the 48 teeth were endodontically prepared. In 2 groups (24 teeth each), the roots were axially perforated in the mesiolingual canal 1-3 mm below the furcation region, penetrating the root surface ("root perforation"). Then, in one of these 2 groups, the mesial canals were filled with gutta-percha and AH26 sealer. Mesial canals in one of the other 2 groups without perforation (control groups) were filled with the same materials. The CBCT and periapical radiographs with 3 different angulations were evaluated by 2 oral and maxillofacial radiologists. The specificity and sensitivity of the two methods were calculated, and P<0.05 was considered significant. Results: The sensitivity and specificity of CBCT scans in the detection of obturated root canal perforations were 79% and 96%, respectively, and in the case of three-angled periapical radiographs, they were 92% and 100%, respectively. In non-obturated root canals, the sensitivity and specificity of CBCT scans in perforation detection were 92% and 100%, respectively, and for three-angled periapical radiographs, they were 50% and 96%, respectively. Conclusion: For perforation detection in filled-root canals, periapical radiography with three different horizontal angulations would be trustworthy, but it is recommended that CBCT be used for perforation detection before obturating root canals.
온실에서 생육하고 있는 Guzmaniz cv. Cherry의 신초를 채취하여 기내에서 대량번식하였다. 온실에서 생장한 신초는 초대배양에서 약 80% 정도로 오염율이 매우 높았다. Cytokinin이 단용으로 첨가된 배지에서 재생된 신초의 증식은 BA 2.0mg/L 첨가배지가 신초수 6.6개로 가장 좋았으며, kinetin 0.5mg/L 첨가배지와 BA 0.5~1.0 mg/L 첨가배지도 증식이 양호하였다. 신초증식에 양호한 cytokinin 과 농도를 선택하여 IAA와 혼용첨가한 배지에서는 kinetin보다 BA를 첨가한 배지가 전반적으로 신초증식이 높았으며, BA 2.0mg/L 단용첨가보다 BA 2.0mg/L 와 IAA 0.1~0.5mg/L를 혼용첨가하였을 때, 신초의 증식이 증가하였다. BA 2.0mg/L와 IAA 0.1mg/L 를 첨가한 배지에서 8.7개의 가장 높은 신초증식율을 나타냈었고, BA 2.0mg/L 와 IAA 0.5~1.0mg/L를 첨가한 배지도 신초증식이 매우 높았다. BA 0.5 mg/L와 IAA 0.1mg/L를 첨가한 배지에서, 80rpm으로 액체회전배양하는 것이 신초수가 12.4개로 액체정체배양이나 고체배양보다 증식율이 월등히 높았다. 신초의 발근은 IBA 2.0 mg/L첨가한 배지가 발근율 100%, 뿌리수 4.14개, 뿌리길이 1.53 cm로 발근이 가장 좋았다.
최근 박과류 재배 주산단지에서 발생이 증가하고 있는 검은점뿌리썩음병의 방제에 필요한 기초자료를 얻기 위해서 지역적인 발생분포와 발생소장을 조사하고 병원성을 검정하였다. Monosporascus cannonballus 에 의한 검은점뿌리썩음병은 멜론, 참외, 수박 및 오이에서 발생하였으며, 발생포장 수는 \\`97년 10개 포장에서 \\`98년 32개 포장으로 확대되었고, 발생지역은 김해, 진주, 남해, 광양, 광주, 여주, 이천 등이었다. 경남 남해 멜론 재배포장에서 발생소장을 조사한 결과, 생육중기까지는 발병을 관찰할 수 없었으나, 과실 성숙기에 급격히 발병이 증가하여 50%이상의 식물체 덩굴이 시들어 고사하였다. 시들은 증상을 나타내는 기주에서 M. cannonballus의 분리비율은 36.7%이었고, Fusarium oxysporum과 Rhizoctonia solani도 높은 비율로 분리되었다. 물한천 시험관법에 의한 박과류 유묘에 대한 병원성은 접종후 7∼14일 사이에 대부분의 식물체가 시들고 21일후에는 뿌리에 자낭각이 형성되었다. 특히 오이품종 중에서 백봉과 은화는 저항성 반응을 나타내었다.
Jeong, Hyeon Gun;Lee, Chan Woo;Lee, Ju Hee;Kim, So Joong;Kwon, Yong Soo;Heo, Yisu;Kim, Hyun Pyo
Natural Product Sciences
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제22권1호
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pp.70-75
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2016
A phytoformula containing the root barks of Morus alba, the fructus of Schizandra sinensis and the roots of Asparagus cochinchinensis (MSA) was prepared as a potential new herbal remedy, and its therapeutic potential for alleviating inflammatory lung conditions was examined. For in vivo evaluation, an animal model of lipopolysaccharide (LPS)-induced acute lung injury (ALI) in mice was used. With oral administration of 6 - 60 mg/kg, MSA potently and dose-dependently inhibited bronchitis-like symptoms in acute lung injury induced by intranasal treatment of LPS as judged by the number of cells in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF) and histological observation. The inhibitory potency was comparable with that of dexamethasone. For in vitro assay, the effects on the production of proinflammatory molecules in lung epithelial cells and alveolar macrophages were examined. Although MSA inhibited IL-6 production in IL-$1{\beta}$-treated lung epithelial cells (A549) only at a high concentration ($300{\mu}g/ml$), the formula strongly and concentration-dependently inhibited NO production in LPS-treated alveolar macrophages (MH-S) at $20-300{\mu}g/ml$. Based on all of these findings, the new phytoformula MSA is suggested to have the potential to control inflammatory lung diseases including bronchitis, at least in part, by inhibiting inducible nitric oxide synthase-catalyzed NO production.
바위떡풀의 기내 배양시 MS배지의 농도별로 12주간 배양한 결과 1/2 MS 배지에서 신초길이 1.9 cm, 엽수 24.7매, 뿌리수 8.0개, 신초수 절편당 11.0개로 1 MS나 2 MS 배지에 비해 효과적이었다. 1/2 MS배지를 기본으로 하여 생장조절제를 첨가하여 8주간 배양한 결과 CPPU 농도처리시 신초길이와 뿌리수는 무처리구에서 많았으나 신초수에 있어서는 농도가 높아질수록 많아져 $2.00mg{\cdot}L^{-1}$ 농도 처리구에서 8.2개로 가장 많아 증식에 유리한 것으로 나타났으나 TDZ, zeatin과 BA처리는 무처리에 비해 처리효과가 없는 것으로 나타났다. 그러므로 바위떡풀을 조직배양 방법을 이용하여 대량증식 시키고자 할 때에는 생장점을 초대배양(MS배지)한 후 신초를 CPPU $2.00mg{\cdot}L^{-1}$ 을 첨가한 1/2 MS배지에 치상하여 다신초를 발생시킨 후 다시 신초를 하나씩 분리하여 1/2 MS배지에 계대하여 배양한 후 순화하면 다량의 식물을 획득할 수 있을 것으로 생각된다.
작약 뿌리 절편으로부터 유도된 캘러스 클론으로부터 부정근 발생에 대한 최적의 배양조건을 조사하기 위하여 뿌리 절편으로부터 캘러스 유도를 위해서 먼저 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0 mg/L 농도의 오옥신(IAA, NAA, IBA, 2,4-D)과 0, 0.5, 1.0, 2.0 mg/L 농도의 싸이토카닌(kinetin, zeatin, BAP)를 조합한 MS 배지에서 배양하였다. 캘러스 클론으로부터 부정근 유도와 길이 생장은 0.1, 0.5, 1.0 mg/L 농도의 오옥신(IAA, NAA, IBA) 또는 싸이토카닌(kinetin, zeatin, BAP)을 단독으로 첨가한 배지에서 암 조건으로 그리고 0.1, 0.5, 1.0 mg/L 농도의 IBA와 zeatin을 각각 조합 첨가한 배지에서 명/암 조건으로 6주 동안 배양하였다. 캘러스 형성은 다른 조합 처리보다 1.0 mg/L 농도의 NAA와 zeatin을 조합 첨가한 배지에서 가장 효과적이었으며, 캘러스 클론으로부터 부정근 발생 수와 부정근의 길이 생장은 IBA 단독처리의 경우 각각 6.66개와 4.82 cm, zeatin 단독 처리의 경우 2.32개와 0.92 cm로 다른 호르몬에 비해 우수하였다. 특히 0.1 mg/L IBA와 0.5 mg/L zeatin을 조합 첨가한 배지에서 광 조건으로 배양할 경우 가장 많은 부정근이(14.06) 형성되었으며, 동일배지에서 암 조건으로 배양할 경우 부정근의 길이가 가장 긴 5.45 cm로 측정되어 가장 효과적인 농도와 조합임을 알 수 있었다. 이러한 작약의 기내 배양에 대한 최적의 배양 조건은 기내배양을 통해 작약 부정근의 대량 생산을 위한 배지로 사용할 수 있음을 보여 주었다.
패랭이꽃속의 분포와 개발을 위한 기초자료로 강원도에서 자생 2종과 수집가능한 7 외래종에 대한 기내배양체의 특성을 조사하였다. 캘러스의 유도를 위해 조직부위별 다양한 절편체들을 2,4-D. NAA, BA가 농도별로 처리된 MS 배지에 치상한 후, 27$^{\circ}C$ 광조건과 2.0mg/L 2,4-D와 0.5 mg/L BA의 조합배지에서 배양했을 때 3주 후 절단면에서 callus가 형성되기 시작하였으며, 패랭이꽃 (Dianthus chinensis)의 잎절편체에서 가장 양호하였다. Organogenic 캘러스의 선발은 기내에서 증식된 adventitious shoot의 절편체 유래 캘러스로부터 가능했으며 이들 캘러스를 1.0 mg/L BA와 0.1 mg/L NAA가 조합된 배지에 치상하였을 때 약 30% 정도의 shoot 형성률을 보였고 multiple shoot의 분화를 관찰할 수 있었다. In vitro에서 증식된 adventitious shoot 절편체를 1.0 mg/L BA와 0.1 mg/L NAA가 포함된 N6 배지에 치상했을 때, 캘러스 단계를 거치지 않고 직접 shoot이 형성되었고 D. gratianopol 유래 adventitious shoot 절편체는 52%의 높은 shoot 형성률을 보였다. 이들 multiple shoot로부터 재분화된 소식물체는 0.1 mg/L NAA가 포함된 MS 배지에서 뿌리가 유도되고 vermiculite가 담긴 pot에 이식 후 85% 습도하에서 활착되어 정상적인 개화된 개체를 획득할 수 있었다. 0.03 M EMS 처리된 패랭이꽃의 adventitious, shoot 절편체 유래 캘러스로부터 힌꽃의 패랭이꽃의 도연변체식물 (M23)이 분화되었으며 종자 형성이 가능하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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