Mast cells play pivotal pathologic roles in allergic disease involving T helper 2 (Th2) cytokine such as interleukin (IL)-4 and IL-13. Fisetin has been known as an anti-allergic agent having inhibitory effects on the IL-4 and IL-13 gene expressions in inflammatory immune cells. However, its molecular mechanisms for suppressive effects of fisetin on IL-4 and IL-13 in activated mast cells have been incompletely elucidated. In this study we found that fisetin significantly inhibited the phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and ionomycin (PI)-induced production of IL-4 and IL-13 in mast cells. The levels of mRNA were dramatically decreased by fisetin, indicating the suppression might be regulated at the transcriptional levels. Western blot analysis of the nuclear expression of various transcription factors involved in the promoter activation indicated that suppression of c-Fos was prominent together with significant down-regulation of nuclear factor of activated T-cell (NF-AT) and NF-${\kappa}B$, but not c-Jun. Furthermore, the nuclear expression of GATA binding protein 2 (GATA-2) transcription factor was significantly down-regulated by fisetin. Taken together, our study indicated fisetin has suppressive effects on IL-4 and IL-13 gene expression through the regulation of selective transcription factors.
비유중기, 건유초기 및 임신말기의 C3H/HeN 마우스의 비장, 장간막림프절, 말초림프절(액와, 상완 및 샅림프절)유래 림프구에서 생산되는 lymphokine의 양을 비교하였다. 비장에서의 IL-2 생산양은 임신말기와 비유중기에 낮았지만, IL-4, IL-6와 $IFN_{\gamma}$의 생산양은 임신말기와 건유초기에 높았다. 말초림프절에서의 IL-4, IL-6 및 $IFN_{\gamma}$ 생산양은 임신말기와 건유초기에 높았지만, IL-2의 생산양은 임신말기, 비유중기 및 건유초기에 각각 감소하였다. 장간막림프절에서의 IL-4 생산양은 임신말기와 비유중기에 각각 증가하였으나, IL-2의 생산양은 임신말기에 감소하였다. 이와같이 전반적으로 건유초기와 임신말기에 IL-2의 생산양은 낮지만, IL-4, IL-6와 $IFN_{\gamma}$의 생산양이 높은 결과는 이 시기에 유방염의 발생비율이 높은 것과 연관성이 있는 것으로 추정된다.
Interleukin-6(IL-6) stimulate osteoclast differentiation. $17{\beta}$-estradiol, 1,25-dihydroxyvitamin $D_3$(1,25-$(OH)_2D_3$) and interleukin-$1{\beta}$ inhibit or stimulate osteoclast differentiation by decreasing or increasing the synthesis of interleukin-6(IL-6) from stromal/osteoblastic cells, respectively. Periodontal ligament(PDL) cells reside between the alveolar bone and the cementum and have osteoblastic characteristics. To estimate the effect of $17{\beta}$-estradiol and 1,25$(OH)_2D_3$ on IL-6 production of PDL cells, PDL cells were treated with $17{\beta}$-estradiol or 1,25-$(OH)_2D_3$ in the absence or the presence of IL-$1{\beta}$. The concentration of IL-6 produced form PDL cells was determined by enzym linked immunosorbent assay(ELISA). In unstimulated PDL cells, we detected constitutive production of IL-6 at 1st and 2nd day. IL-$1{\beta}$ increased IL-6 synthesis at 1st day and 2nd day. $17{\beta}$-estradiol had no significant effect on the secretion of this cytokine, either constitutively or after stimulation with IL- $1{\beta}$(0.05 ng/ml). 1,25-$(OH)_2D_3$($10^{-8}M$) decreased not only constitutive IL-6 production but also IL-$1{\beta}$-induced IL-6 production at 2nd day. These results suggest that 1,25-$(OH)_2D_3$ may control IL-$1{\beta}$-induced osteoclast differentiation by decreasing IL-$1{\beta}$-induced IL-6 secretion of PDL cells.
연구목적 : 혈청 sIL-2R 농도는 T세포의 면역활성화가 관여되는 육아종성질환, 장기이식, 자가면역질환에서, 또한 혈액종양 및 림프세망내 피계종양등에서 증가 한다고 알려져있다. 최근 결핵환자에서도 질병의 활성화 정도에 따라 혈청 및 흉강 삼출액에서 sIL-2R 농도의 증가를 보고하고 있다. 임상에서 결핵성 흉강삼출과 악성 흉강삼출의 감별이 어려운 경우를 경험하게 되는데 흉강삼출액에서 sIL-2R 농도 측정이 이들 질환의 감별에 도움이 될수 있는지 알아보기 위해 늑막조직검사에서 결핵성으로 확인된 12명의 결핵성 흉강삼출액환자와 32명의 비결핵성 흉강 삼출액환자를 대상으로 혈청 및 흉강삼출액에서 sIL-2R 농도를 측정하였다. 방법 : 대상환자의 늑막삼출액을 원심분리하여 얻은 상층액과 동시에 채취한 혈청을 $-70^{\circ}C$에 보관한 후 검사를 시행하였다. 가용성 IL-2수용체 농도 측정은 Cellfree(r) IL-2R test kit(T-cell sciences Inc., Cambridge, MA, USA)를 이용하였다. 측정방법을 간단히 설명하면 IL-2R 분자의 두가지 항원 결정기(epitope)에 대한 단일 항체를 이용한 샌드위치 ELISA 검사로 측정하였다. 결과 : 1) 늑막삼출액의 sIL-2R 농도는 비결핵성 늑막삼출환자군보다 결핵성 늑막삼출환자군에서 높았다(p<0.005). 2) 늑막삼출액에서 감별진단 기준을 sIL-2R 농도 5,000u/ml로 할 경우 결핵성 늑막삼출환자군을 악성 늑막삼출환자군과 비교시 민감도는 84.6%, 특이도는 99.9%였다. 3) 혈청 sIL-2R 농도는 결핵성 늑막삼출환자군에서 세균성 늑막 삼출환자군보다 유의한 증가를 보였으나(p<0.05), 악성 늑막 삼출환자군 및 늑막여출액환자군과는 유의한 차이가 없었다(p>0.05). 4) 결핵성 늑막삼출환자군에서 sIL-2R 농도는 혈청에서보다 늑막삼출액에서 더 높았다(p<0.005). 결론 : 결핵성 늑막삼출에서 늑막삼출액내의 sIL-2R 농도는 감별기준 5,000 u/ml로 사용할 경우 결핵성 늑막삼출과 비결핵성 늑막삼출의 감별진단에 도움이 되리라 생각된다.
Codonopsis lanceolatae have been used as one of the traditional remedies as well as food source. We previously reported that in vitro supplementation of Codonopsis lanceolatae water extracts enhanced the splenocytes proliferation compared to the control group. This study, the combined immunomodulative effect of water extract Codonopsis lanceolatae was Seven to eight weeks old mice(balb/c) was fed ad libitum on chow diet and water extract of Codonopsis lanceolatae was orally administrated every other day for four weeks at two different concentrations(50 and 500 mg/kg B.W.). The production of cytokine(IL-2, IL-10 and IFN-${\gamma}$), secreted by macrophages stimulated with LPS or not, were detected by ELISA assay using the cytokine kit. The result of ex vivo study showed that the IL-2, IL-10 and IFN-${\gamma}$ was detected at 500 mg/kg B.W. supplementation group with LPS stimulation in all cases. Also, ratio of IFN-${\gamma}$, IL-10 was the range of 3${\sim}$7 with mitogen stimulation such as Con A and LPS. In conclusion, this study suggests that Codonopsis lanceolatae extracts may enhance the immune function by regulating the cytokine(IL-2, IL-10 and IFN-${\gamma}$) prodution capacity by activated macrophages in mice.
Falun Gong (FG) is an advanced system of cultivation and practice, which is beneficial for both mind and body. In this study we investigated the effects of FG on the production of cytokines in FG practitioner (FGP). To study whether plasma cytokines levels were affected by FG, their levels were analyzed. The amount of $interferon-{\gamma}$$(IFN-{\gamma})$, interleukin (IL)-2, IL-4 and IL-6 (2.5-fold for $IFN-{\gamma}$, 1.2-fold for IL-2, 2.1-fold for IL-4 and 2.5-fold for IL-6, respectively) were significantly higher in the FGP group than normal group (P<0.05). Peripheral blood mononuclear cells obtained from normal healthy control and FGP were cultured for 24 h in the presence or absence of lipopolysaccharide. The amount of $IFN-{\gamma}$, IL-2, IL-4 and IL-6 in culture supernatant was quantified. However, there were no significant differences in the level of the same cytokines between the normal and FGP group. These data suggest that FG cultivation may contribute to immune-enhancement in vivo.
Objectives The purpose of this study is to investigate the effects of korean herbal bathing extracts composition 1 and composition 2 on Th2 cytokine production in MC/9 mast cells. Methods The effects of composition 1, 2 was analyzed by ELISA and Real-time PCR in MC/9 mast cells. Levels of IL-5, IL-13 were measured using enzyme-linked immunosorbent assays(ELISA). mRNA levels of IL-4, IL-5, IL-6, IL-13 were analyzed with Real-time PCR. Results Composition 1, 2 inhibited the IL-5, IL-13 production significantly(p<.001) in comparison to PI-control group at concentration of 100 ${\mu}g/mL$, 200 ${\mu}g/mL$. Composition 1, 2 inhibited the IL-4, IL-5, IL-13 mRNA expression significantly in comparison to PI-control group at concentration of 100 ${\mu}g/mL$, 200 ${\mu}g/mL$. Composition 1 inhibited the IL-6 mRNA expression significantly in comparison to PI-control group at concentration of 200 ${\mu}g/ml$. Composition 2 inhibited the IL-6 mRNA expression significantly in comparison to PI-control group at concentration of 100 ${\mu}g/mL$, 200 ${\mu}g/mL$. Conclusions These results indicate that composition 1, 2 has the effect of decreasing the Th2 cytokine production in the MC/9 mast cell.
이 연구의 목적은 신체활동이 마이오카인 발현에 미치는 영향을 보고자 문헌고찰을 하였다. 신체적인 활동은 제2형 당뇨, 심혈관질환, 대장암, 치매 및 우울증과 같은 질환을 예방하는 역할을 하고 있다. 그리고 마이오카인(myokine)은 운동 훈련에 의해 분비되는 호르몬으로 뇌성장이나 알츠하이머 같은 질환 예방에 도움을 준다. 운동수행과정에서 수축하는 근육으로부터 분비되는 항염증 마이오카인의 생성과 대사 조절에 필요한 분비 활성화가 건강증진에 중요한 요인으로 보고 있다. 인체 골격근에서 분비되는 마이오카인 가운데 IL-4, IL-6, IL-7, IL-8, IL-15 등은 근육비대(hypertrophy)와 세포(myogenesis) 및 혈관생성(angiogenesis) 등의 조절에 관여한다. IL-6는 AMPK 활성화로 인한 대사중 지방 산화를 촉진시키는 작용을 하고, IL-1Ra, IL-10 과 sTNF-R 는 염증성 싸이토카인 $TNF-{\alpha}$의 분비를 억제한다. IL-15는 저항 운동시 근수축을 통한 발현량이 증가하어 근육 성장의 중요 합성요인으로 작용한다. 한편 IL-7 및 IL-8도 신호 전달 수용체 C-X-C를 통해 혈관신생을 촉진시킨다.
Enterokinase에 의한 G3-IL-2 가수분해 반응에 있어서의 urea 는 글루카곤과 IL-2를 분리하고자 하는 데에 펼요한 절단 부위 가 잘 노출되도록 도움을 주는 역할을 하는데 1.0 M이상의 높 은 농도에서 오히려 원하는 단백질의 변성에 영향을 미침을 알 수 있었다, 그리고 효소 반응 시에 효소의 활성에 도움을 주는 첨가제는 반응 후에 침전이 생기고, IL-2의 회수율에는 오히려 나쁜 영향을 주었다. 그리고 반응시간에 따른 반응의 효과는 24 시간 이후에는 효소에 의한 가수분해 반응이 진행되지 않음이 관찰되었다. 가수분해 반응 후의 순수한 IL-2의 회수율은 약 1 5 5~35% 정도였고, 반응 조건에 따라 수융은 차이가 있었다. IL-2는 시간이 지남에 따라 분자 상호 간의 응집에 의해 oligomer의 형태가 되어 본래의 크기보다 더 커져 RP-HPLC에서 더 빨리 용리되는 결과를 얻을 수 있었다.
Interleukin-2 (IL-2)는 많은 immunoenhancing lymphokine의 한 종류로서 lymphokine activiated killer (LAK) cell의 생성을 자극시켜 흑종의 종양세포를 죽인다고 알려져 있다. 최근 간종양에서 비장동맥 또는 간동맥으로 투여한 IL-2가 비장의 임파계를 자극하여 LAK cell을 생성하여 어느정도효과가 있음이 밝혀지면서, 여러가지의 투여 방법이 시도되고 있다. 그러나 각종의 투여 방법에서 실제로 투여한 IL-2의 인체내 분포에 관한 연구는 없다. 저자들은 비정맥과 간문맥에 이상이 없는 증례의 비동맥에 IL-2와 $^{99m}Tc-phytate$ 혼합물을 투여하고, IL-2의 생체에서의 비장과 간에 어떻게 분포하는지 알아보기 위하여 $^{99m}Tc$의 radioactivity를 계측하여 보았다. 6예의 간세포암과 3예의 위암으로부터의 전이성간암에서 동맥조영술적방법을 이용하여 초선택적 비장동맥에 투여한 IL-2와 $^{99m}Tc-phytate$ 혼합물이 비장 27%, 간73%의 분포를 보여 비장을 거쳐온 $^{99m}Tc$의 방사능이 간에 많이 침착함을 확인하였고 간과 비장이외의 부위 즉 골수, 복수 또는 폐장이나 늑막에는 전혀 방사능 분포가 없음을 알 수 있었다. 따라서 비정맥이나 간문백에 이상이 없는 증례에서 IL-2의 비장동맥 투여는 목적하는 바 IL-2의 생체내 분포를 이룩할 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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