The antioxidative effect of the extracts from the leaves and fruits of Acer ginnala against free radicals was studied by two different methods using DPPH radical-generating system, and hydroxyl radical-generating system $(Cu^{++}/H_2O_2\;system)$ which induces DNA strand breaking. Compared with well known antioxidative plants, green tea, Scutellaria baicalensis, the Acer ginnala extracts showed excellent radical-scavenging activity in DPPH radical-generating system and inhibited effectively hydroxyl radical induced-DNA strand breaking in a concentration-dependent manner in $Cu^{++}/H_2O_2$ system whereas the green tea extract stimulated the strand breaking at a low concentration. These results suggest that he extracts from the leaves and fruits of Acer ginnula could be good antioxidative agents.
Park, Young-Mi;Lim, Jae-Hwan;Jeong, Hyung-Jin;Seo, Eul-Won
대한의생명과학회지
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제17권1호
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pp.69-77
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2011
In this study, we evaluated the protective effects of supercritical extracts and two step ethanol extracts after supercritical extraction from Schizandra chinensis on antioxidant activities and oxidative DNA and cell damages. Supercritical extracts removed DPPH (1,1-diphenyl-2-picryldrazyl) radical by 85.5% at 200 ${\mu}g$/ml, but showed low activities of scavenging and chelating the hydroxyl radical and ferrous iron. However, two step ethanol extracts showed low activities of scavenging the DPPH radical, but removed the hydroxyl radical by 86% at 200 ${\mu}g$/ml. In addition, we tested the activities of extracts for reducing hydroxyl radical-induced DNA and cell damage. Two step ethanol extracts showed protective effect against the oxidative DNA damage by reducing DNA segmentation, inhibiting DNA migration and decreasing the expression of phospho-H2AX. Also, two step ethanol extracts showed protective effect against the oxidative cell damage by inhibiting lipid peroxidation and increasing the expression of p21 protein. Taken together, we suggest that two step ethanol extracts from S. chinensis have a role as useful inhibitors against oxidative damages.
본 연구에서는 열수 팥 추출물이 hydroxyl 라디칼에 의해 유도되는 산화적 스트레스에 미치는 영향을 알아보기 위하여 항산화활성과 DNA 및 세포의 산화적 손상 억제 효과를 조사하였다. 팥 열수 추출물의 DPPH 라디칼과 hydroxyl 라디칼의 제거능은 다소 낮았으나, $Fe^{2+}$-chelating과 과산화수소 제거효과는 높게 나타나 활성산소의 생성을 억제하는 데 효과적인 것으로 확인되었다. 또한 팥 열수 추출물의 in vitro DNA cleavage, DNA migration 및 H2AX의 인산화비 억제활성은 높은 활성을 보여주고 있어 라디칼에 의한 DNA 손상 억제에 효과적으로 작용하였다. 또한 지질과산화와 p21의 발현율을 통해 세포의 산화적 손상에 미치는 영향을 살펴보면 지질과산화 억제능과 p21의 발현율에 매우 효과적으로 작용하고 있어 라디칼에 의한 산화적 스트레스로부터 세포를 보호할 것으로 생각된다.
Schisandra chinensis have been traditionally used in Asia for the treatment of dyspnea, cough, mouth dryness, spontaneous diaphoresis, nocturnal diaphoresis, nocturnal emission, dysentery, insomnia and amnesia. The purpose of this study is to evaluate the protective effects of Schisandra chinensis on oxidative DNA damage and lipid peroxidation induced by ROS in non cellular and cellular system. DPPH radical, hydroxyl radical and hydrogen peroxide scavenging assay were used to measure the antioxidant activities. Phi X-174RF I plasmid DNA cleavage assay and intracellular DNA migration assay were used to evaluate the protective effect on oxidative DNA damage. MTT assay and lipid peroxidation assay were used for evaluating the protective effect on oxidative cell damage. It was found to scavenge DPPH radical, hydrogen peroxide and hydroxyl radical and it inhibited oxidative DNA damage, lipid peroxidation and cell death induced by hydroxyl radical. These data indicate that Schisandra chinensis possesses a spectrum of antioxidant and DNA-protective properties
지질, 단백질 및 DNA의 산화적 손상이 관절염, 간염, 위염, 대장염 및 치주 질환과 같은 만성 염증뿐만 아니라 암 전이에 관련되어 있다고 알려져 있다. 이러한 질환의 발생을 예방하기 위하여 독성이 없는 천연 화합물을 개발하는 것이 최근의 주요 연구 관심 대상이다. 산화적 스트레스와 관련 있는 DPPH radical, hydrogen peroxide, hydroxyl radical 및 과산화수소와 같은 활성산소에 대한 흑마늘(ABGE)의 소거능력이 연구되었다. 뿐만 아니라 TBARS assay를 이용하여 본 연구에서 사용된 산화방법으로 Fenton반응에 의하여 hydroxyl radical에 노출된 세포에서 ABGE의 항산화 효과도 조사되었다. ABGE는 활성산소종 중에서 특히 과산화수소에 대한 항산화 효능이 우수하였고 hydroxyl radical에 노출된 genomic DNA의 산화에 대한 보호 효과도 관찰되었다. 살아있는 세포에 대한 산화적 스트레스도 ABGE의 존재 하에서 억제되었다. 뿐만 아니라, 암전이와 관련 있는 MMP-2 및 MMP-9의 활성과 발현에 대한 ABGE의 효과를 gelatin zymography 및 western blot을 이용하여 조사하였다. ABGE는 PMA로 자극한 사람 섬유아육종세포로부터 분비된 MMP-2 및 MMP-9의 활성과 발현을 동시에 억제 하였으므로 암을 억제 할 수 있는 하나의 생리활성물질로 개발 될 수 있으리라 판단된다.
Salsolinol, endogenous neurotoxin, is known to be involved in the pathogenesis of Parkinson's disease (PD). In the present study, we have investigated the oxidative damage of DNA induced by the reaction of salsolinol with Cu,Zn-SOD. When plasmid DNA incubated with salsolinol and Cu,Zn-SOD, DNA cleavage was proportional to the concentrations of salsolinol and Cu,Zn-SOD. The salsolinol/Cu,Zn-SOD system-mediated DNA cleavage was significantly inhibited by radical scavengers such as mannitol, ethanol and thiourea. These results indicated that free radicals might participate in DNA cleavage by the salsolinol/Cu,Zn-SOD system. Spectrophotometric study using a thiobarbituric acid showed that hydroxyl radical formation was proportional to the concentration of salsolinol and was inhibited by radical scavengers. These results indicated that hydroxyl radical generated in the reaction of salsolinol with Cu,Zn-SOD was implicated in the DNA cleavage. Catalase and copper chelators inhibited DNA cleavage and the production of hydroxyl radicals. These results suggest that DNA cleavage is mediated in the reaction of salsolinol with Cu,Zn-SOD via the generation of hydroxyl radical by a combination of the oxidation reaction of salsolinol and Fenton-like reaction of free copper ions released from oxidatively damaged SOD.
The flowers of Buddleja officinalis are used to treat sore and damaged eyes, a condition which is similar to skin wounds. However, whether it has any protective effect on oxidative DNA damage and cell death induced by hydroxyl radical remains unclear. In this study, we evaluated the protective effects of the extracts against oxidative DNA and cell damage caused by hydroxyl radical. DPPH radical, hydroxyl radical, hydrogen peroxide and intracellular ROS scavenging assay, and $Fe^{2+}$ chelating assay were used to evaluate the antioxidant properties. phi X 174 RF I plasmid DNA and intracellular DNA migration assay were used to evaluate the protective effect against oxidative DNA damage. Lastly, MTT assay and lipid peroxidation assay were used to evaluate the protective effect against oxidative cell damage. It was found to prevent intracellular DNA and the normal cells from oxidative damage caused by hydroxyl radical via antioxidant activities. These results suggest that Buddleja officinalis may exert the inhibitory effect on ROS-induced carcinogenesis by blocking oxidative DNA damage and cell death.
본 연구에서는 Bacillus subtilis를 첨가하여 발효시킨 감귤 가공부산물의 열수 추출액과 80% 메탄올 추출액을 가지고 항균활성과 항산화활성을 측정하였는데, 그 결과(Table 3)를 살펴보면 우선 열수추출법으로 추출한 시료에서는 추출온도를 $40^{\circ}C$하여 추출한 실험구(Bacillus subtilis 첨가구)와 비교 실험구(Bacillus subtilis 미 첨가구) 20 mg/ml 농도에서 항균활성이 높게 나타났다. 그리고 80% 메탄올을 사용하여 추출한 시료에 결과(Table 4)를 보면 열수추출법에 의해 추출한 실험 결과보다 전반적으로 높은 항균활성을 나타내는 것을 볼 수가 있다. 특히 $25^{\circ}C$에서 추출한 실험구에서 항균실험에 이용된 12종의 미생물 모두에서 높은 항균 활성을 나타내고 있다. DPPH method에 의한 radical 소거활성을 보면 열수추출법(Fig. 2)에서는 Bacillus subtilis 이용하여 발효시킨 시료를 $40^{\circ}C$에서 추출하였을 경우 10 mg/ml 농도에서 합성 항산화 제인 BHT보다 높고 BHA와 유사한 항산화 활성을 나타내었으며, 20 mg/ml 농도에서는 BHA보다 높은 활성을 나타내었다. 반면 80% methanol(Fig. 3)을 이용하여 Bacillus subtilis를 첨가하여 발효시킨 시료를 $25^{\circ}C$에서 추출 할 경우 5 mg/ml 농도에서는 BHT와 유사한 활성을 나타내며, 10 mg/ml에서는 BHA보다 높은 radical 소거활성을 나타내었으며, 20 mg/ml에서는 천연 항산화제인 ${\alpha}-tocopherol$보다 훨씬 높은 radical 소거활성을 나타내는 것을 알 수가 있다. 2-deoxyribose oxidation method에 의한 hydroxyl radical 소거활성을 보면 열수추출법으로 추출한 시료(Fig. 5)에서는 모든 시료에서 천연 항산화제와 합성 항산화제보다 높은 hydroxyl radical 소거활성을 보이는 시료는 나타나지 않았으나 Bacillus subtilis를 이용하여 발효시킨 시료를 $40^{\circ}C$에서 추출하여 20 mg/ml 농도로 실험하였을 때 합성 항산화제인 BHT와 유사한 활성을 나타내었고, Bacillus subtilis로 발효시키지 않은 시료 보다는 hydroxyl radical 소거활성을 나타내었다. 반면 80% methanol을 이용하여 추출한 시료(Fig. 6)에서는 Bacillus subtilis를 첨가하여 발효시킨 시료를 $25^{\circ}C$에서 추출 할 경우 5 mg/ml 농도에서 BHT 보다 높은 hydroxyl radical 소거활성을 나타내었으며, 10 mg/ml의 농도에서는 BHA 보다 높고 천연항산화제인 ${\alpha}-tocopherol$과 유사한 hydroxyl radical 소거활성을 나타내었다. 특히 20 mg/ml에서는 천연 항산화제인 ${\alpha}-tocopherol$ 보다 훨씬 높은 hydroxyl radical 소거활성을 나타내는 것을 볼 수가 있었다.
This experiment carried out to compare the protective effects of some antioxidants to hydroxyl radicals in embryonic mouse whole brain tissue culture. The ICR mouse whole brain (13 embryonic day) was cultured in hydroxyl radical system in which radicals were generated by 20 mU / ml glucose oxidase (GO). In this experiment, to make ferrous iron from ferric iron, iron as an accelerator, and ascorbic acid as a reductant were used. For comparison of the protective effects to hydroxyl radicals, antioxidants such as desferrioxamine (DFX), laccase. water or ethanol extracts from Rhus Vemiciflua Stokes (RVS), and $\alpha$-tocopherol were used, because they relate to metal ion. The results of this experiment showed that all antioxidants protected effectively the cytotoxicity from hydroxyl radicals in the brain cultures. More than 70% of cell viabilities among different antioxidants was at 1 mM DFX, 1.43 $\mu\textrm{m}$ laccase, 12.5 $\mu\textrm{m}$ water extract, 12.5 $\mu\textrm{m}$ ethanol extract and 50 $\mu\textrm{m}$$\alpha$-tocopherol individually, compared with 20 mU/ml GO alone. In comparison to the antioxidative activities of antioxidants, laccase and extracts from RVS showed strong antioxidative effects even at low concentration.
숙성된 인삼은 인간의 건강을 회복시키고 향상시키는 강장제로서 알려져 있으며, 백삼보다 더 많은 약리적인 활성을 가진다고 알려져 왔다. 전이 가능한 종양, 림프구 증식과 쥐간의 지질과산화에 대한 숙성된 인삼의 효과도 연구되었다. 본 연구는 3가지 인삼 추출물의 항산화와 항노화 효과를 평가하기 위해서 실험하게 되었다. 시장에서 이미 만들어진 홍삼엑기스를 사용하였고, 그 외 수삼, 건삼을 구매하여 홍삼제조기로 만들어진 추출물로 실험에 사용하였다. 숙성된 인삼의 3가지 추출물들은 superoxide radical 소거 활성, hydroxyl radical 소거 활성, 리놀산 자동산화 억제, 섬유아세포에서 collagenase 억제와 collagen 합성의 효과를 연구했다. 숙성시켜 만든 수삼은 100 ug/mL의 농도에서 가장 높은 superoxide radical 소거 활성뿐만 아니라 vitamin C보다 더 높은 hydroxyl radical 소거 활성을 나타냈다. 또한 리놀산 자동산화 억제, collagen 합성과 collagenase 억제에서 가장 높은 활성을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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