• 생명과학회지
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• 제15권3호
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• pp.332-336
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• 2005

4-(p-Nitrobenzyl)pyridine (NBP)의 색깔변화를 이용한 epoxide hydrolase활성 측정법을 사용하여 다양한 미생물 세포유래의 epoxide hydrolase 활성을 측정하고 평가하였다. Epoxide hydrolase의 가수분해 반응에 의해 분해되고 남은 에폭사이드 기질에 의한 NBP alkylation 반응을 통한 색깔변화로 손쉽게 epoxide hydrolase 활성을 측정할 수 있었다. NBP 반응에서 triethylamine을 첨가하여 색깔반응 효율을 높일 수 있었으며, 10mM styrene oxide에 대한 최적 세포 사용량은 12.5mg/ml로 결정하였다. 본 연구에서 얻은 colorimetric assay조건에서 대용량의 미생물 후보군집으로부터 유용한 epoxide hydrolase를 가지는 신규 미생물을 효율적으로 선별할 수 있을 것으로 기대된다.

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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• pp.163.1-163.1
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• 2003

The inhibitory activities of various analogues of adenosine (Group I, Group II, Group III, Group IV, Group V) were assayed by using recombinant human placental SAH hydrolase. The activity of the SAH hydrolase was determined by measuring the formation of AdoHcy from Ado and Hcy. AdoHcy was analyzed by HPLC using C18 reverse-phase column. The peak of AdoHcy was monitored at 258 nm. Among the tested compounds, fluoroneplanocin A (LJ-276) was the most potent inhibitor.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제47권1호
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• pp.69-77
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• 2019

Screening microorganisms that can produce glucan hydrolases for industrial, environmental, and biomedical applications is important. Herein, we describe a novel approach to perform glucan hydrolase screening-based on analysis of matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry (MALDI-MS) spectra-which involves degradation of the oligo- and polysaccharides. As a proof-of-concept study, glucan hydrolases that could break down glucans made of several glucose units were used to demonstrate the MALDI-MS-based enzyme assay. First, the enzyme activities of ${\alpha}$-amylase and cellulase on a mixture of glucan oligosaccharides were successfully discriminated, where changes of the MALDI-MS profiles directly reflected the glucan hydrolase activities. Next, we validated that this MALDI-MS-based enzyme assay could be applied to glucan polysaccharides (i.e., pullulan, lichenan, and schizophyllan). Finally, the bacterial glucan hydrolase activities were screened on 96-well plate-based platforms, using cell lysates or samples of secreted enzyme. Our results demonstrated that the MALDI-MS-based enzyme assay system would be useful for investigating bacterial glucoside hydrolases in a high-throughput manner.

• 생명과학회지
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• 제13권2호
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• pp.230-235
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• 2003

Bromobenzene으로 간독성을 유발한 흰쥐에 생열귀나무 뿌리를 투여하여 bromobenzene 대사계에 미치는 효소활성을 관찰하였다. Bromobenzene은 bromobenzene 2,3-oxide와 bromobenzene-3, 4-oxide로 전환되며, 3,4-oxide는 독성물질로서 epoxide hydrolase에 의해 무독성 bromobenzene-3,4-dihyrodiol로 대사 또는 glutathione S-transferase에 의하여 배설되기도 한다. 중국 민간에서 강장제로 사용하는 생열귀나무는 한방에서 소화불량, 위통 등의 치료에 사용되는 약용식물이다. 생열귀나무의 뿌리 추출물은 흰쥐의 간 epoxide 생성계에 관여하는 aminopyrine N-demethylase, aniline hydroxylase 활성과 epoxide를 대사시키는 glutathione S-transferase 활성에는 변화를 주지 않았다. 그러나 생열귀추출물 500 mg/kg 경구투여군은 eporide를 무독화시키는 epoxide hydrolase 활성에서 bromobenzene 투여로 효소활성이 저하된 대조군보다 33% 활성을 회복시켰다. 따라서 생열귀나무 뿌리는 간독성물질인 bromobenzene 대사에 관여하는 epoxide hydrolase 활성 증가로 인해 간보호작용이 일어나는 것으로 판단된다.

• 대한약리학회지
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• 제21권1호
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• pp.1-11
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• 1985

이물질(xenobiotics) 대사에 관여하는 간장 microsome과 cytosol 효소 활성에 indole, indole-3-carbinol 및 benzofuran이 미치는 영향을 검색하기위하여 마우스에 이들 약물을 각각 5 mmole/kg씩 10일간 투여하여 다음 몇 가지의 성적을 얻었다. Benzofuran은 microsome 효소인 aniline hydroxylase, 7-ethoxycoumarin O-deethylase, p-nitrophenol UDPGA-transferase, epoxide hydrolase와 cytosol 효소인 glutathione S-tranferase, NADH : quinone reductase, UDP-glucose dehydrogenase의 활성도를 증가시켰다. 그러나 benzofuran과는 구조적으로 furan ring내의 N원소가 O원소로 치환되었을 뿐 주된 구조가 유사한 indole과 indole-3-carbinol 투여로는 UDPGA-transferase와 NADH: quinone reductase의 활성도 증가를 볼 수 없었으며, 특히 indole은 NADPH : cytochrome C reductase만을 증가시킨데 비하여 구조상 indole에 carbinol (methanol)기가 붙은 indole-3-carbinol은 수종의 mixed function oxidase와 아울러 특히 epoxide hydrolase의 활성도 역시 증가시켰다. 이러한 결과는 benzofuran과 indole-3-carbinol에 의한 epoxide hydrolase 활성도 증가의 기전의 일부를 설명할 수 있을 것으로 생각된다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2000년도 추계학술발표대회 및 bio-venture fair
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• pp.571-574
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• 2000

Hydrolase는 생물학적 공정에서 가장 널리 사용되는 효소군 중의 하나이다. 본 연구에서는 hydrolase들 중에 xylanase, lysozyme, glucoamylase, barnase가 대상 hydrolase로 선택하여 최적 pH를 예측하는 방법론을 제시하였다. Tanford-Kirkwood(TK) model에 기반을 두고 선택된 효소들의 catalytic residue들의 전하 변화가 optimum pH에 중요한 인자로서 그 catalytic residue들의 전하 차이가 최대일 때의 pH가 optimum pH로 나타났다. 이렇게 예측된 optimum pH 결과들은 실험적으로 결정된 optimum pH와 서로 잘 일치하고 있음을 보여준다.

• 생약학회지
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• 제25권1호
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• pp.47-50
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• 1994

For the biological survey, effects of Ailanthi Cortex Radicis, the root bark of Ailanthus altissima(Simaroubaceae) on epoxide hydrolyzing enzymes were checked. The methanolic extract and its chloroform fraction were shown to activate the liver metabolizing enzyme system including epoxide hydrolase system which was monitored by activities of transaminase, lactate dehydrogenase, alkaline phosphatase and epoxide hydrolase system in bromobenzene treated rats. But they showed no effect on glutathione S-transferase activity.

• 공업화학
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• 제16권3호
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• pp.456-459
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• 2005

미생물 세포 유래의 에폭사이드 가수분해 효소 활성을 효율적으로 분석하기 위하여 UV 분광기 측정법을 최적화하였다. 세포 생촉매의 에폭사이드 가수분해 활성에 의해 p-nitrostyrene oxide (pNSO) 기질이 p-nitrostyrene diol로 전환된 양을 측정함으로써 에폭사이드 가수분해 활성을 평가하였다. Rhodosporidium toruloides를 생촉매로 사용하고 pNSO에 대한 입체선택적 가수분해 동력학을 UV 분광기 측정법으로 분석한 결과, $K_m$과 $V_m$ 값을 $2.457nmol/min{\cdot}mg$ 및 1.078 mM로 각각 결정할 수 있었다.

• Food Science and Biotechnology
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• 제16권3호
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• pp.439-443
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• 2007

The effects of the methanol extract of the leaves of Brassica juncea and isorhamnetin $3-O-{\beta}-D-glucopyranoside$, major compound isolated from the ethyl acetate fraction of this plant on hepatic lipid peroxidation and drug-metabolizing enzymes, were evaluated in rats treated with bromobenzene. The extract and isorhamnetin $3-O-{\beta}-D-glucopyranoside$ of oral administration did not show any significant effects on activities of aminopyrine N-demethylase and aniline hydroxylase, enzymes forming toxic epoxide by bromobenzene as well as on glutathione content. However, both methanol extract and isorhamnetin $3-O-{\beta}-D-glucopyranoside$ significantly recovered the decreased activities of glutathione s-transferase and epoxide hydrolase, and also reduced the lipid peroxide level in rats treated with bromobenzene. From the results, the protections of this plant against bromobenzene-induced hepatotoxicity are thought to be via enhancing the activities of epoxide hydrolase and glutathione s-transferase, enzymes removing toxic epoxide, and reducing the lipid peroxide level.

• 미생물학회지
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• 제48권2호
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• pp.73-78
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• 2012

본 연구자들은 이전에 cellulase, xyalnase 및 lichenase의 다기능 효소활성을 지니는 절단된 Cel44C-$Man26A_{P558}$의 ${\beta}$-glycosyl hydrolase를 보고하였다. 본 연구에서는 절단된 Cel44C-$Man26A_{P558}$ 효소의 다기능성 ${\beta}$-glycosyl hydrolase 활성을 증가시키기 위해 DNA shuffling을 시도하였다. DNA shuffling에 의해 단일변이(P438A)를 가진 M2Cel44C-$Man26A_{P558}$와 이중변이(A273T 및 P438A)를 가진 M21Cel44C-$Man26A_{P558}$를 얻었다. 이중변이를 가진 M21Cel44C-$Man26A_{P558}$은 단일변이를 가진 M2Cel44C-$Man26A_{P558}$ 보다 효소활성이 낮게 나타났으나, M2Cel44C-$Man26A_{P558}$와 M21Cel44C-$Man26A_{P558}$은 대조구인 Cel44C-$Man26A_{P558}$ 보다 약 1.3에서 2.2배 정도 높은 효소활성을 나타내었다. 특히, 단일변이를 가진 M2Cel44C-$Man26A_{P558}$는 대조구인 Cel44C-$Man26A_{P558}$보다 cellulase, xylanase 및 lichenase 효소활성이 약 1.5에서 2.2배 정도 높게 나타났다. ${\beta}$-Glycosyl hydrolase의 cellulase, linchenase 및 xylanase 최적 효소활성은 각각 pH 7.0, 7.0 및 6.0에서 이었다. 이러한 결과는, 아미노산 잔기인 Ala438이 다기능성 ${\beta}$-glycosyl hydrolase 활성을 증가시키는 중요한 역할을 한다고 추정할 수 있다.