본 연구는 부채마 70% 에탄올 추출물(DR)이 RBL-2H3 마스트 세포에서 항원에 의한 세포활성의 영향과 BALB/c 쥐에서 dinitrofluorobenzene에 의해 유도된 마스트 세포-매개 알레르기 접촉성피부염에 미치는 영향을 조사했다. DNP-HSA 항원과 Anti-DNP IgE 항체에 의해 활성 된 RBL-2H3 세포에서 에탄올 추출물은 급성 항원반응 표지인 ${\beta}$-hexosaminidase 분비와 히스타민 등을 억제하였고, 후기 항원반응 표지인 IL-4와 $TNF-{\alpha}$ 생성을 억압하였다. DNFB-유도 접촉성 알러지성 피부염 동물 모델에서 에탄올 추출물 처리는 귀 부기를 감소시키고 혈청 히스타민과 IL-4 분비를 억제시켰으며, DR 처리는 피부염 유발 부분에서 마스트 세포 유입을 효과적으로 방지하였다. 이러한 결과로, 에탄올 추출물은 아토피 피부염과 같은 마스트 세포-매개 알러지성 질병의 치료제로 사용할 수 있을 것이다.
전통생약으로서 다양한 효능과 향신료, 조미료로서 사용되어온 초과(草果)의 항알레르기 성분연구를 위해 80% 에탄올 추출물 중 CH2Cl2, 분획으로부터 3 종의 flavonoid를 단리하였으며, 이들의 물리화학적 성상과 분광분석 데이터로부터 구조를 확인한 결과 naringenin-5-O-methyl ether (1), helichrysetin (2) 및 cardamomin (3)로 각각 동정하였다. 이들 화합물 중 화합물 2는 Amomum 속으로부터 처음 규명되었고, 화합물 3은 이 식물에서 처음 보고되는 화합물이다. 또한 화합물 2와 3은 RBL-2H3 세포로부터 β-hexosaminidase assay를 수행한 결과 탈과립 억제효과를 나타내었다. 따라서 초과의 chalcone 성분은 탈과립 억제효능을 통하여 알러지 질환에 유용할 것으로 사료된다.
Objectives : Allergy is an immune dysfunction caused by degranulation from mast cells in the early phase of allergic disease. The purpose of this study was to investigate the anti-allergic effect of fermented Angelicae gigantis Radix in human mast cell line, HMC-1. Method : The Angelicae gigantis Radix was fermented by Lactobacillus acidophilus. The cell toxicity of fermented Angelicae gigantis Radix(FAGR) was determined by MTT assay. The release of ${\beta}$-hexosaminidase from HMC-1 stimulated by phorbol-12-myristate 13-acetate (PMA) plus A23187 was determined by ${\beta}$-hexosaminidase assay. Also, the concentrations of cytokines (interleukin-$1{\beta}$, -6, -8 and tumor necrosis factor-alpha) were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. The gene expression of COX-2 from HMC-1 stimulated by phorbol-12-myristate 13-acetate (PMA) plus A23187 was determined by reverse transcription polymerase chain reaction. The release of histamine on substance P-stimulated HMC-1 was measured by histamine assay. Result : The FAGR suppressed the release of ${\beta}$-hexosaminidase, a marker of degranulation, from HMC-1 stimulated by PMA plus A23187. The FAGR inhibited the production of interleukin-$1{\beta}$, -6, -8 and tumor necrosis factor-alpha. The FAGR inhibited the expression of COX-2 mRNA. The FAGR suppressed the release of histamine on substance P-stimulated HMC-1. Conclusion : These results provide that FAGR may be beneficial in the treatment of allergic inflammatory disease.
Basophils and mast cells are specialized effector cells in allergic reactions. Haliotis discus hannai (abalone), is valuable seafood. Abalone male viscera, which has a brownish color and has not been previously reported to show anti-allergic activities, was extracted with acetone. Six different acetone/hexane fractions (0, 10, 20, 30, 40, and 100%) were obtained using a silica column via β-hexosaminidase release inhibitory activity-guided selection in phorbol myristate acetate and a calcium ionophore, A23187 (PMACI)-induced human basophils, KU812F cells. The 40% acetone/hexane fraction (A40) exhibited the strongest inhibition of PMACI-induced-β-hexosaminidase release. This fraction dose-dependently inhibited reactive oxygen species (ROS) production and calcium mobilization without cytotoxicity. Western blot analysis revealed that A40 down-regulated PMACI-induced MAPK (ERK 1/2, p-38, and JNK) phosphorylation, and the NF-κB translocation from the cytosol to membrane. Moreover, A40 inhibited PMACI-induced interleukin (IL)-1β, IL-6, and IL-8 production. Anti-allergic activities of A40 were confirmed based on inhibitory effects on IL-4 and tumor necrosis factor alpha (TNF-α) production in compound (com) 48/80-induced rat basophilic leukemia (RBL)-2H3 cells. A40 inhibited β-hexosaminidase release and cytokine production such as IL-4 and TNF-α produced by com 48/80-stimulated RBL-2H3 cells. Furthermore, it's fraction attenuated the IgE/DNP-induced passive cutaneous anaphylaxis (PCA) reaction in the ears of BALB/c mice. Our results suggest that abalone contains the active fraction, A40 is a potent therapeutic and functional material to treat allergic diseases.
유기용매 내성 세균인 Pseudomonas sp. BCNU 106을 10%(v/v) 톨루엔에 노출시킨 후 8시간 동안 random arbitrarily primed polymerase chain reaction (RAP-PCR)기법을 이용하여 메신져 RNA 발현 레벨을 조사하였다. 총 100개의 상향발현된 발현 산물 중에서 50개의 상보적인 단편들이 반복적으로 재현성있게 발현되는 것으로 확인되어, 이들을 클로닝을 하였으며 나아가 유전자 염기서열을 결정하였다. Blast analysis 결과, 톨루엔은 LysR family transcriptional regulator 그리고 RNA polymerase factor sigma-32같은 전사와 관련된 유전자들의 발현 레벨을 적응적으로 증가시키는 것으로 확인되었다. 그리고 톨루엔 스트레스 존재 하에서 inorganic ion 수송과 대사와 관련된 catalase와 Mn2+/Fe2+ transporter 유전자의 발현이 증가되었으며, 신호전달과 대사와 기능적으로 관련된 type IV pilus assembly PilZ와 multi-sensor signal transduction histidine kinase 유전자들의 발현 증가도 확인되었다. 한편 톨루엔 노출 후 탄수화물 수송과 대사와 관련된 beta-hexosaminidase 유전자발현 레벨이 증가하였다. 나아가 DNA polymerase III subunit epsilon, DNA-3-methyladenine glycosylase II와 DEAD/DEAH box helicase domain-containing 유전자들과 같은 DNA 복제, 재조합 그리고 수복에 관련성이 있는 유전자들의 발현 레벨 그리고 심지어는 ABC transporter 유전자와 같은 방어 메커니즘에 관련성이 있는 유전자들의 발현 레벨이 적응적으로 증가되는 것으로 밝혀졌다. 특히 10% 톨루엔 존재하에서 ABC transportor, Mn2+/Fe2+ transporter 및 β-hexosaminidase 유전자에 해당하는 RNA들이 괄목하게 유도되는 것이 확인되었다. 그러므로 유기용매 내성 세균 Pseudomonas sp. BCNU 106이 유기용매에 대하여 내성을 나타내는데 있어서 방어 메커니즘, 세포내 이온 항상성 그리고 바이오 필름 형성이 필수적인 것으로 확인되었다.
상백피의 기능성식품 소재로서의 이용 가능성을 조사하기 위하여 상백피 물 추출물의 항산화 활성 및 in vitro에서의 항천식 효과를 확인하였다. 항산화 측정 결과는 총 페놀함량은 35.2 mg/g로 나타났으며, DPPH radical 소거능은 35.3~59.8%, hydroxyl radical 소거능은 62.1~78.8% 범위로 높은 항산화 효능을 나타내었다. DNP-IgE와 HSA로 활성화된 RBL-2H3 세포에서의 항천식 효과는 농도가 증가할수록 유의적으로 $\beta$-hexosaminidase를 감소시켰으며, 염증성 cytokine인 IL-4, TNF-$\alpha$ 사이토카인 분비량 또한 유의적(p<0.05)으로 감소시켰다. 결과적으로 상백피는 높은 항산화력을 가지며, 항천식과 관련된 지표들을 유의적으로 감소시킴으로써 천식 예방 및 개선을 위한 기능성 소재로서 이용가치가 높을 것으로 사료된다.
본 연구는 울릉도 돌외(Gynostemma pentaphyllum) 잎으로부터 캘러스 유도 및 추출한 후, 피부장벽 기능과 관련된 항염증, 항알러지, 각질세포외막 형성, S. aureus에 의한 각질형성세포 손상 완화 효능을 확인하고자 수행되었다. 돌외 캘러스 추출물의 피부에 대한 항염증 효능을 확인하기 위해, PAR-2 agonist로 활성화된 primary epidermal keratinocyte (HEKa)에서 염증성 사이토카인들의 발현을 확인한 결과, 돌외 캘러스 추출물은 IL-8, IL-25, TSLP 발현을 저해하는 효능이 있는 것을 확인하였다. RBL-2H3 세포를 이용한 β-hexosaminidase assay 시험을 통해 항알러지 효능을 확인한 결과, β-hexosaminidase 방출을 억제하는 효과를 보였다. 또한, 돌외 캘러스 추출물은 HaCaT 세포에서 각질세포외막(cornified envelope) 형성 효과가 있음을 확인하였고, HaCaT 세포와 S. aureus 공배양 실험을 통해 S. aureus에 의한 각질형성세포 생존율 감소를 완화하는 효능이 있음을 확인하였다. 본 연구 결과를 종합해보면, 울릉도 돌외 캘러스 추출물은 항염, 항알러지, S. aureus에 의한 각질세포 손상 완화 효능에 유효한 소재의 가능성을 확인하였고, 피부장벽 개선을 위한 화장품 소재로서 활용 가치가 있을 것으로 판단된다.
Objectives : We studied anti-allergic effects of Cinnamomi Ramulus(CR) herbal acupuncture and Cinnamomi Ramulus extract. Methods : In vivo, animals were herbal-acupunctured with CR at both ST36s three times for 5 days. Then, we induced active systemic anaphylatic shock using compound 48/80 in ICR mice, and passive cutaneous anaphylaxis using anti-DNP IgE in Sprague Dawley rat. In vitro, we measured cell viability, ${\beta}$ -hexosaminidase release and the expressions of IL-4, TNF-${\alpha}$ and COX-2 mRNA in RBL-2H3 cells after treatment of various concentrations of CR extract. Results : In vivo, CR herbal acupuncture pretreatments at both ST36s inhibited compound 48/80-induced active systemic anaphylatic shock. Passive cutaneous anaphylaxis was inhibited by CR herbal acupuncture pretreatments at both ST36s and optional points. In vitro, CR extract treatments did not affect on cell viability and inhibited ${\beta}$-hexosaminidase release. CR extract treatments also decreased the expressions of IL-4, TNF-${\alpha}$ and COX-2 mRNA in RBL-2H3 cells. Conclusions : These results suggest that CR herbal acupuncture and CR extract should be beneficial in the inhibition of allergic inflammatory response.
Objectives We studied on anti-allergic effects of Ganoderma lucidum herbal acupuncture(GHA) and Ganoderma lucidum extract(GE). Methods In vivo, Animals were herbal-acupunctured GHA at both B13s three times for 5 days. Then, we investigated compound 48/80-induced active systemic anaphylatic shock using ICR mice and anti-DNP IgE-induced passive cutaneous anaphylaxis using Sprague Dawley rat. In vitro, we measured cell viability, b-hexosaminidase release, IL-4 and TNF-a from RBL-2H3 cells, and nitric oxide from Raw264.7 cell after treatment of GE of various concentrations. Results In vivo, GHA pretreatments at both B13s inhibited compound 48/80-induced active systemic anaphylatic shock. Passive cutaneous anaphylaxis were inhibited by GHA10 and OP. In vitro, $0.1\;{\sim}\;2%$ GE treatments were not affect on cell viability and inhibited b-hexosaminidase release, IL-4, TNF-a and nitric oxide. Conclusions These results suggest that GHA and GE may be beneficial in the inhibition of allergic inflammatory response.
Zheng, Ming Shan;Yang, Ju-Hye;Li, Ying;Li, Xian;Chang, Hyeun-Wook;Son, Jong-Keun
Biomolecules & Therapeutics
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제18권3호
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pp.321-328
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2010
Twenty six compounds (1-26) were isolated from the root barks of Ulmus davidiana var. japonica. The anti-inflammatory activity of the isolated compounds were evaluated agai nst the generation of inflammatory chemical mediators in bone marrow-derived mast cells. Among them, compounds 10, 11, 13, 15 and 19 inhibited not only cyclooxygenase-2 dependent prostaglandin $D_2$ generation but also 5-lipoxygenase dependent leukotrien $C_4$ generation in a concentration-dependent manner. In addition, compounds 11, 12, 13, 15 and 19 also inhibited $\beta$-hexosaminidase release, a marker of mast cell degranulation reaction, from bone marrow-derived mast cell. These results suggest that the anti-inflammatory activity of U. davidiana might in part occur by both the inhibition of eicosanoid generations and the degranulation reaction of mast cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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