Several investigators have shown that CpG-DNA has outstanding effects as a Th1-responsive adjuvant and that its potent adjuvant effects are enhanced by encapsulation with a liposome of proper composition. In this study, we showed that encapsulation with phosphatidyl-${\beta}$-oleoyl-${\gamma}$-palmitoyl ethanolamine (DOPE): cholesterol hemisuccinate (CHEMS) complex enhances the immunostimulatory activity of CpG DNA and the binding of CpG-DNA to TLR9. We also examined involvement of myeloid differentiation protein (MyD88) and NF-${\kappa}B$ activation in liposome-encapsulated CpG-DNA-induced IL-8 promoter activation. In this manuscript, the natural phosphodiester bond CpG-DNA encapsulated by DOPE : CHEMS complex is designated as Lipoplex(O). Importantly, we successfully screened B cell epitopes of envelope protein (E protein) of hepatitis C virus (HCV-E) and attachment glycoprotein G of human respiratory syncytial virus (HRSV-G) by immunization with complexes of several peptides and Lipoplex(O) without carriers. Therefore, Lipoplex(O) is potentially applicable as a universal adjuvant for peptide-based epitope screening and antibody production.
Nelumbo nucifera (lotus) is known to be a useful medicinal plant and leaf extract contains several flavonoids and alkaloids. To analyze the effect of Nelumbo nucifera leaves extract (NNL) on the HBsAg production, we treated NNL on HepG2.2.15 cells which contain the hepatitis B viral genome and secrete surface antigen into media. NNL suppressed the production of hepatitis B surface antigen as a dose-dependent manner. To analyze the effect of NNL on HBV DNA replication, PCR analysis was performed. NNL was not affected the HBV DNA replication and HBsAg mRNA expression. To understand the effect of NNL on the production of HBsAg, we carried out the analysis of lipid-metabolizing gene expression using one-step RT-PCR. NNL reduced the gene expression of FASN and SREBP2 and increased the expression of LDLR. Triglyceride content of HepG2.2.15 cells was not decreased by treatment of NNL. This result suggests a possibility that NNL may have an effect for the inhibition of hepatitis B surface antigen by modulation of lipid and cholesterol metabolism.
A hepadnaviruses replicates its DNA genome via reverse transcription of an RNA template (pregenomic RNA or pgRNA), which has a cap structure at the 5' end and a poly(A) tail at the 3' end. We have previously shown that the 5' cap is indispensable for encapsidation of the pgRNA. A speculative extension of the above finding is that the cap contributes to encapsidation via its interaction with the poly(A) tail, possibly involving eIF4E-eIF4G-PABP interaction. To test this hypothesis, poly(A)-less pgRNAs were generated via cleavage by a cis-acting hepatitis delta virus ribozyme sequence. We found that accumulation of the poly(A)-less pgRNA was markedly diminished, mostly likely due to its reduced stability. Importantly, however, the remaining poly(A)-less pgRNAs were nonetheless encapsidated and reverse transcribed normally when the reduced stability was taken account. Our finding clearly contradicts the notion that the poly(A) tail has any function in encapsidation and viral reverse transcription.
우리나라와 같이 B형 간염 바이러스의 유병율이 높은 지역에서는 B형 간염 바이러스뿐만 아니라 HCV에 대한 항 바이러스 효과도 동시에 시행함이 유용할 것으로 사료되었다. 본 연구에서는 인진청간탕(菌蔯淸肝湯)을 이용하여 B형 간염 바이러스에 대한 항(抗) 바이러스 효과를 PCR을 이용하여 HBV의 DNA를 검색하였다. 인진청간탕(菌蔯淸肝湯)이 처리된 처리군의 경우 대조군에 비하여 농도 의존적으로 B형 간염 바이러스의 표면항원 생산을 억제하였고, PCR을 이용하여 증폭한 경우에도 증폭된 DNA의 양은 감소하였다. 또한 C형 간염 바이러스에 대한 항(抗) 바이러스 효과를 검색하기 위하여 복제에 필수적인 단백질인 HCV helicase의 ATPase에 대한 활성 억제 효과를 조사하였다. 인진청간탕(菌蔯淸肝湯)이 HCV helicase의 ATPase 활성을 억제하는 효과가 있음을 확인한 후 dose-respond에 따른 실험을 수행하여 HCV helicase의 ATPase 활성을 억제함으로써 탈인산화 되지 않은 ATP의 양을 이용하여 PSL로 분석한 결과 인진청간탕(菌蔯淸肝湯)이 HCV helicase의 ATPase 기능에 대한 억제효과가 우수함이 확인되었다. 이상의 결과로 보아 인진청간탕(菌蔯淸肝湯)이 B형 및 C형 간염치료에 동시에 응용될 수 있을 것으로 사료된다.
Objectives : Chronic HBsAg carriers are the principal source of infection for other susceptible people, and are themselves at high risk of developing serious liver diseases. In Korea, it has been estimated that 65-75% of the HBsAg positives remained as persistent carriers. Additionally, familial clustering of MBV infection has frequently been observed among carriers. Some would become progressive, chronic hepatitis patients, and others would not. The aim of this study was to evaluate the association between various factors, such as the duration of infection, type of virus, mutation of precore/core region in HBV, major histocompatibility class-I, and developing chronic liver diseases among familial HBV carriers. Methods : Chronic carrier status was identified by repeated serological tests for HBsAg at intervals of six months or more. A familial chronic carrier was defined when the disease was observed in a family member over two generations. Two families were recruited, among which a total of 20 chronic HBsAg carriers(11 carriers in No.1, and 9 in No.2 family) were identified. Data on the general characteristics and liver disease status were collected. Identification of the HBV-DNA was successful only for 13 subjects among the 20 carriers. Analysis of viral DNA in terms of subtype, pre-core and core region mutations was carried out. The type of major histocompatibility class-1 for the 13 subjects was also analysed. Results & Conclusions : Seven of 10 chronic HBV carriers of the 1st generation and one of 10 of the 2nd generation were clinical patients with chronic hepatitis, the others, three of the 1 st and nine of the 2nd generation, were asymptomatic carriers. This data indicates that the duration of HBV carriage is one of the major factors for disease severity. The subtype of HBsAg analysed using MBV-DNA identified in 13 carriers were adr, and the pattern of precore nonsense mutation in HBV-DNA was identical among family members, which meads that the same virus strains were transmitted between the family members. The association between the precore or core mutations in HBV-DNA and the disease severity was not observed. While it was suggested that a specific type of MHC class-I may be related to disease progression.
Background and Aims: Hepatitis B virus (HBV) reactivation was reported to be induced by transcatheter arterial chemoembolization (TACE) in HBV-related hepatocellular carcinonma (HCC) patients with a high incidence. The effective strategy to reduce hepatitis flares due to HBV reactivation in this specific group of patients was limited to lamivudine. This retrospective study was aimed to investigate the efficacy of prophylactic entecavir in HCC patients receiving TACE. Methods: A consecutive series of 191 HBV-related HCC patients receiving TACE were analyzed including 44 patients received prophylactic entecavir. Virologic events, defined as an increase in serum HBV DNA level to more than 1 log10 copies/ml higher than nadir the level, and hepatitis flares due to HBV reactivation were the main endpoints. Results: Patients with or without prophylactic were similar in host factors and the majorities of characteristics regarding to tumor factors, HBV status, liver function and LMR. Notably, cycles of TACE were parallel between the groups. Ten (22.7%) patients receiving prophylactic entecavir reached virologic response. The patients receiving prophylactic entecavir presented significantly reduced virologic events (6.8% vs 54.4%, p=0.000) and hepatitis flares due to HBV reactivation (0.0% vs 11.6%, p=0.039) compared with patients without prophylaxis. Kaplan-Meier analysis illustrated that the patients in the entecavir group presented significantly improved virologic events free survival (p=0.000) and hepatitis flare free survival (p=0.017). Female and Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) performance status 2 was the only significant predictors for virological events in patients without prophylactic antiviral. Rescue antiviral therapy did not reduce the incidence of hepatitis flares due to HBV reactivation. Conclusion: Prophylactic entecavir presented promising efficacy in HBV-related cancer patients receiving TACE. Lower performance status and female gender might be the predictors for HBV reactivation in these patients.
수혈 후 B형 간염 바이러스의 전파를 감소시키기 위한 방법으로 현재 적십자 혈액원에서 공급되는 적혈구 농축제재를 대상으로 HBV DNA, HBsAg, anti-HBs 및 anti-HBc를 측정 하여 수혈자에서 HBV DNA의 노출정도와 HBV DNA와 B형 바이러스 간염의 혈청학적 표지자와의 관련성을 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 대구 적십자 혈액원에서 공급되는 적혈구 농축제재에서는 HBsAg이 검출되지 않았으며, HBV DNA는 0.6%에서 검출되었는데, 모두 anti-HBc만 양성인 경우였다. Anti-HBc양성률은 37%였으며, 이들중 65.8%에서 anti-HBs도 양성으로 나타나 anti-HBc만 양성인 경우는 공혈혈액의 13.0% 정도로 추정되었다. 따라서, 우리나라와 같이 anti-HBc양성률이 높은 지역에서는 anti-HBs를 추가하는 경우 13%의 혈액제제만을 폐기함으로써 HBV DNA의 전파를 차단시킬수 있으리라 생각되며 현재 실시하고 있는 검사보다 예민도와 특이도가 높은 선별검사의 개발이 필요한 것으로 생각된다.
본 연구는, HBV의 증식 및 감염력을 파악하는데 가장 중요한 표지자로 알려진 HBV DNA를 최근 임상에서 많이 이용되고 있는 PCR법을 사용해 검출함으로써 기존의 dot blot법과 PCR법을 비교하고, 만성 간질환 환자에서 HBV의 e항원, 항체체계에 따른 HBV DNA의 검출율을 PCR법을 이용하여 알아봄으로써 HBV의 증식 및 감염력을 파악하고자 무증상 HBsAg 보유자 17명(HBeAg 양성 9명, anti-HBe 양성 8명), 만성 B형 간염 환자 91명(HBeAg 양성 50명, anti-HBe 양성 41명), 간경변증 한자 57명(HBeAg 양성 21명, anti-HBe 양성 36명), 원발성 간세포암 환자 27명(HBeAg 양성 10명, antiHBe 양성 17명)을 대상으로 HBV DNA의 검출빈도를 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. Dot blot법의 경우 HBeAg 양성인 환자군, anti-HBe 양성인 환자군에서의 HBV DNA의 검출율은 각각 58.9%, 34.3% 이었고, PCR법에 의한 검출율은 상기군에서 각각 72.2%, 53.9%였다. HBeAg 음성인군에서의 PCR법에 의한 HBV DNA 검출율은 무증상 HBsAg 보유자의 경우 25.0%, 만성 B형 간염 환자군의 경우 61.0%, 간병변증 환자군의 경우 52.8%, 원발성 간세포암 환자군의 경우 52.9%였다. 무증상 HBsAg 보유자에서 HBeAg 양성인 군과 음성인 군간의 HBV DNA 검출율은 각각 77.8%, 25.0%로 유의한 차이가 있었으나, 나머지 군에서는 HBeAg 양성인 군과 음성인 군간의 HBV DNA 검출율의 유의한 차이는 없었다. 이상의 결과로 PCR을 이용할 경우 기존의 dot blot보다 훨씬 예민하게 HBV DNA를 검출할 수 있고, HBsAg 양성인 만성 간질환 환자의 대부분에서는 HBeAg 및 anti-HBe 표식자 체계와는 무관하게 바이러스의 증식이 지속되고 있음을 알 수 있었으며, PCR법이 무증상 HBsAg 보유자의 예후를 알 수 있는 지표로서 유용성에 대한 가능성을 의미하나 확실한 의의를 알기 위하여 전향적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.
본 연구는 B형 및 C형 간염에 대한 한약 치료의 효과를 평가하기 위해 무작위 임상연구를 대상으로 체계적 문헌고찰 및 메타분석을 시행하였다. 검색엔진은 EMBASE, Pubmed, NDSL, KMBASE, KISS, KISTI, Koreamed, Koreantk, Oasis database를 이용하였으며 국내의 검색 엔진 키워드는 '간염' 또는 '바이러스성간염', '한약', '무작위 배정 임상시험'을, 국외 검색 엔진 키워드는 'hepatitis' or 'viral hepatitis' and 'herbal medicine' or 'traditional chinese medicine' and 'randomized controlled trial'을 이용하였다. 연구 결과 15개의 무작위배정 임상시험을 선택되었으며, 그 중 통계적으로 유의미한 결과를 나타낸 연구는 한약과 양약 복합치료군이 양약을 투여한 대조군에 비해 HBV DNA loss에서 높은 효과를 보였다. 한약과 양약 복합치료군이 양약을 투여한 대조군에 비해 HBeAg loss에서 통계적으로 유의한 효과를 보였으며, 한약과 양약 복합치료군이 양약을 투여한 대조군에 비해 ALT가 감소하였다. 본 연구는 B형 및 C형 간염환자를 대상으로 한약의 효과를 확인하기 위해 기존에 시행된 RCT 연구를 대상으로 체계적 문헌고찰을 시행하였으며, 한약과 양약의 복합치료가 양약 단독치료에 비해 치료효과가 더 높은 것으로 나타났다.
목 적 : B형 간염 바이러스 주산기 감염은 현재 감소하고 있지만 HBeAg 양성 산모로부터 분만된 신생아의 10%는 예방조치에도 불구하고 보유자가 된다. 비록 예방조치 실패의 원인이 아직 불확실하나 산모의 분만시 HBV-DNA 수치의 중요성이 제시되고 있다. 본 연구는 산모의 분만시 HBV-DNA 수치가 주산기 예방조치 결과의 유용한 예측인자임을 확인하기 위하여 시행하였다. 방 법 : 주산기 예방조치의 결과를 이미 알고 있는 29명의 HBeAg 양성 산모를 선정하였다. 산모의 HBV-DNA 양을 측정하기 위하여 WHO International Standard For Hepatitis B Virus DNA For NAT Assay를 이용한 정량적 PCR을 시행하였다. 결 과 : 주산기 예방조치 실패군 산모의 로그 HBV-DNA 수치가 성공군 산모의 수치보다 유의하게 높았다(7.99 vs. 6.72, P=0.015). 주산기 예방조치 결과를 예측할 수 있는 산모의 HBV-DNA 수치의 기준은 $2.83{\times}10^7$ 개체/mL(100 pg/mL)로 정할 수 있었는데, 산모의 HBV-DNA 수치가 기준치 미만인 16명 중 예방조치에 실패한 경우는 없었으며(0%), 기준치 이상인 경우는 13명 중 5명(38.5%)이 실패하였다. 결 론 : 현재의 예방조치법으로는 분만시 높은 HBV-DNA 수치를 가지는 산모의 주산기 예방조치 결과는 좋지 않을 가능성이 높다. 따라서 주산기 예방조치의 실패율을 낮추기 위해서는 이러한 위험요인이 있는 경우에 보다 강력한 방법을 적용시켜야 하겠다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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