• Archives of Pharmacal Research
• /
• 제20권1호
• /
• pp.29-33
• /
• 1997

The effects of ursodeoxycholic acid (UDCA) and its novel derivative, named as HS-1030, on the proliferation of HepG2, human hepatocellular carcinoma cells were investigated. Whereas UDCA had no significant effect in a concentration range we have tested, HS-1030 inhibited the proliferation of HepG2 cells in a concentration dependent manner. Surprisingly, HS-1030 had no effect on the proliferation of Human Chang liver cell which is a normal liver cell line. We also found that proliferation-inhibitory effect of HS-1030 was due to the induction of apoptosis of HepG2 cells, which was confirmed by observing the internucleosomal DNA fragmentation and morphological changes (ie., cell shrinkage, nuclear condensation and the formation of apoptotic bodies). These results suggest that HS-1030 may be a good candidate as a drug for the treatment of liver cancer.

• Preventive Nutrition and Food Science
• /
• 제19권4호
• /
• pp.348-352
• /
• 2014

Black rice contains many biologically active compounds. The aim of this study was to investigate the protective effects of black rice extracts (whole grain extract, WGE and rice bran extract, RBE) on tert-butyl hydroperoxide (TBHP)-induced oxidative injury in HepG2 cells. Cellular reactive oxygen species (ROS), antioxidant enzyme activities, malondialdehyde (MDA) and glutathione (GSH) concentrations were evaluated as biomarkers of cellular oxidative status. Cells pretreated with 50 and $100{\mu}g/mL$ of WGE or RBE were more resistant to oxidative stress in a dose-dependent manner. The highest WGE and BRE concentrations enhanced GSH concentrations and modulated antioxidant enzyme activities (glutathione reductase, glutathione-S-transferase, catalase, and superoxide dismutase) compared to TBHP-treated cells. Cells treated with RBE showed higher protective effect compared to cells treated with WGE against oxidative insult. Black rice extracts attenuated oxidative insult by inhibiting cellular ROS and MDA increase and by modulating antioxidant enzyme activities in HepG2 cells.

• 생명과학회지
• /
• 제13권3호
• /
• pp.324-332
• /
• 2003

최근 Phenobarbital에 의해서 발현되는 CYP2B유전자의 발현촉진 매개인자로서 Constitutive Androstane Receptor (CAR)가 최근에 규명되었다. 사람의 간암세포인 HepG2 cell line에 CAR유전자를 transfection시켰을 경우 PBRU의 활성을 촉진시켰다. 지금까지 연구된 CAR의 역할은 주로 간세포 내에서 cytochrome P4502B 유전자의 발현을 촉진하는 Phenobarbital의 매개체로서 알려져 있다. 다세포동물에서 각각의 분화된 세포는 독특한 유전자의 발현 Pattern을 갖고 있어서 어느 특정한 세포에서 일어나는 유전자의 발현특징이나 작용기전 혹은 기능이 다른 종류의 세포에서는 일어나지 않거나 상이한 기전에 의해서 조절된다. 이러한 세포간 특이성을 이용하여 유전자 발현에 관여하는 인자들을 규명하는데 기초적 자료로 이용될 수 있다. 따라서 본 연구의 목적은 CYP2B유전자의 발현이 일어나지 않는 콩팥세포 line (COS)에서 CAR 단백질 수용체가 PBRU의 활성촉진에 영향을 미치는지의 여부를 조사하고자 하였다. Control 상태의 Hep G2와 COS 배양세포에서는 CAR 단백질의 발현이 거의 나타나지 않았다. mCAR1-GFP를 transfection 한 후 CAR antibody를 이용하여 immunoblot을 시행하였을 경우, Hep G2 세포에서는 발현이 비교적 약하게 나타났지만, COS 세포에서는 강한 mCAR1-GFP 단백질의 발현을 보였다. 한편, GFP antibody를 이용하여 immunoblot을 시행하였을 경우에는 COS 세포에서 강한 mCAR1-GFP 단백질의 발현을 나타내었을 뿐만 아니라 Hep G2 세포에서도 명백히 단백질의 발현을 관찰할 수 있었다. 또한, Hep G2와 COS세포 모두에서 endogenous RXR의 발현이 일어남을 확인하였고 RXR expression plasmid를 transfection시켰을 때 두 세포 모두에서 단백질의 발현이 현저하게 증가되었다. Constitutive Androstane Receptor (CAR)에 의한 CYP2B의 PBRU 활성효과를 다르게 분화된 세포에서 차이가 일어나는지를 비교하기 위하여 CAR에 의해 매개되는 PBRU의 transactivation효과를 Hep G2와 COS세포에서 조사하였다. Hep G2 세포에서는 transfection된 CAR의 발현에 의해 firefly luciferase 보고단백질의 활성이 약 12배 증가하였다. CAR 발현유전자를 15 ng transfection하였을 때 주어진 보고유전자의 양에 대하여 최대반응을 나타내었고 CYP2B1PBRU가 제거된 CYP2C1 promotor/firefly luciferase를 보고유전자로 사용하였을 때는 CAR에 의한 luciferase의 활성이 나타나지 않았다. Hep G2와는 달리, COS세포에서는 transfection된 CAR의 발현이 PBRU에 의한 firefly luciferase보고단백질의 발현에 영향을 주지 못하였다. 이러한 결과들은 분화된 세포의 종류에 따라서 constitutive androstane receptor의 CYP2BPBRU 활성효과가 다르게 나타날 수 있음을 제시할 뿐만 아니라, 간세포에서 Phenobarbital에 의한 PBRU의 활성유도에 영향을 주는 endogenous 매개 인자들 중 CAR와 RXR과는 다른 전사조절인자들이 필요로 하며 이러한 인자들의 발현이 콩팥 세포에서는 다르게 존재함을 시사한다.

• 생명과학회지
• /
• 제28권2호
• /
• pp.176-186
• /
• 2018

김(Porphyra yezoensis, Laver)의 MeOH 추출에 의한 유기용매 별 분획물에서 폴리페놀 함량과 항산화 활성 및 간암세포주 HepG2의 세포증식 억제효과를 확인하였다. $CHCl_3$ 분획물의 폴리페놀 함량은 $10.34{\mu}g/mg$으로 물 분획물의 $13.08{\mu}g/mg$ 보다는 다소 적게 나타났으나, DPPH 자유라디칼 소거에 의한 전자공여능(EDA)에서 나타난 $ED_{50}$은 $16.96{\mu}g/ml$로 가장 높게 나타났다. $CHCl_3$과 EtOAc 분획물은 농도의존적으로 HepG2 세포의 증식을 억제하였으며, 특히 $900{\mu}g/ml$의 $CHCl_3$ 분획물을 24시간 동안 처리하여 90%의 세포증식이 억제되었다. 한편 $CHCl_3$ 분획물이 처리된 HepG2 세포의 유전자 발현 양상을 microarray로 확인하였다. P. yezoensis의 효능과 연관지은 gene ontology 분석으로 비타민 D 합성 과정, 항균작용에 대한 반응 및 영양물질에 대한 반응에 관련된 유의 유전자들을 탐색하였다. 유의 유전자로 IL6R와 CYP1A1를 선정하였고, 이들 유전자의 상위 조절자는 ARNT 유전자가 선정되었다. 또한 50 및 $100{\mu}g/ml$의 $CHCl_3$ 분획물이 처리된 HepG2 세포에서 IL6R와 CYP1A1 단백질의 발현과 상위 조절자인 ARNT의 활성을 Western blotting으로 확인하였다.

• 한국임상수의학회지
• /
• 제28권6호
• /
• pp.549-554
• /
• 2011

FK506은 말기 간암환자의 간이식 후 널리 사용되는 면역억제제이다. Dexamethasone은 세포독성 암 치료에서 오심 방지, 정상세포의 보호와 기타 이유 등의로 빈번하게 병용처치된다. 본 연구의 목적은 간암세포주(Hep3B)에서 FK506의 항암효과와 FK506에 의한 항암효과에 대한 dexamethasone의 억제효과를 알아보기 위함이다. 세포의 손상은 세포 생존성 평가와 LDH 및 세포내 ROS 양의 측정으로 평가 하였다. 세포내 칼슘 농도([$Ca^{2+}$]i)와 JNK, Bax 단백질의 발현 정도도 평가하였다. FK506의 처치는 Hep3B의 세포사를 유도하였으며 세포생존성의 감소와 LDH, ROS 및 [$Ca^{2+}$]i 를 증가시켰다. FK506은 Bax와 JNK 의 활성을 증가시켰으며 Bcl-2의 활성을 억제하였다. Dexamethasone 처치 그 자체는 세포생존성, LDH와 ROS에 영향을 주지 않았다. 그러나 dexamethasone과 FK506의 병용처치는 FK506에 의한 LDH 방출, ROS 생성 및 JNK의 활성을 감소시켰다. 이 결과는 간암세포주에서 FK506은 항암효과를 가지지만 dexamethasone의 병용처치는 FK506에 의한 항암효과를 길항한다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
• /
• 제15권4호
• /
• pp.1745-1749
• /
• 2014

Background: Platycodin D (PD), a triterpenoid saponin isolated from the Chinese medicinal herb Platycodonis radix, possesses anti-cancer effects in several cancer cell lines. The aim of this study was to evaluate its anticancer activities in hepatocellular carcinoma cells. Materials and Methods: MTT and colony formation assays were performed to evaluate cell proliferation, along with flow cytometry and Western blotting for apoptosis. Cell adhesion was tested by observing cellular morphology under a microscope, while the transwell assay was employed to investigate the cell migration and invasion. Results: PD concentration-dependently inhibited cell proliferation in both HepG2 and Hep3B cells, and significantly suppressed colony formation and induced apoptosis in HepG2 cells. The protein levels of cleaved poly ADP-ribose polymerase (PARP) and Bax were up-regulated while that of survivin was down-regulated after treatment with PD. Moreover, PD not only obviously suppressed the adhesion of HepG2 cells to Matrigel, but also remarkably depressed their migration and invasion induced by 12-O-tetradecanoylphorbol 13-acetate (TPA). Conclusions: PD presents anti-cancer potential in hepatocellular carcinoma cells via inducing apoptosis, and inhibiting cell adhesion, migration and invasion, indicating promising features as a lead compound for anti-cancer agent development.

• 한국식품영양과학회지
• /
• 제38권8호
• /
• pp.1003-1007
• /
• 2009

부추를 암 예방 식품 소재로 활용하기 위하여 부추로부터 주요 생리활성 물질인 함황화합물을 분리하여 인체 암세포성장 억제 및 간암세포의 사멸이 apoptosis에 의해 유도되는지를 조사하였다. 부추 함황화합물을 1, 5, 10, 20 및 30 $\mu g$/mL 농도로 24, 48 및 72시간별로 간암(HepG2) 및 폐암세포 (A549)에 처리하여 암세포 증식억제 효과를 측정한 결과 HepG2 및 A549 세포에서 농도 및 시간 의존적으로 그 성장을 억제하였으며, 20 $\mu g$/mL 농도 이상에서 암세포 성장이 60% 이상 억제되었다. 또한 부추 함황화합물 30 $\mu g$/mL 농도로 처리 시 대조군에 비하여 폐암 및 간암 세포수 감소 및 심한 형태학적 변화가 관찰되었다. 이들 암세포의 $IC_{50}$ 값을 측정한 결과 부추 함황화합물은 폐암세포(A549)보다 간암세포(HepG2)에 더 효과가 있었다. 한편 부추 함황화합물은 30 $\mu g$/mL 농도에서 핵 응축 및 apoptotic body를 나타내었으며, 농도 의존적으로 subG1 DNA 함량이 증가함으로써 HepG2 암세포 사멸이 apoptosis에 의해 유도되는 것을 확인할 수 있었다.

• 한국식품영양과학회지
• /
• 제42권10호
• /
• pp.1525-1532
• /
• 2013

말채나무 열수추출물의 항산화 활성을 알아보기 위해 HepG2 세포에 TBHP로 산화 스트레스를 유도한 뒤 말채나무 열수추출물의 세포 보호효과, ROS 생성억제, 지질과산화 억제 및 GSH 생성에 미치는 영향에 대해 살펴보았다. 말채나무 열수추출물은 HepG2 세포에 TBHP로 산화 스트레스를 유도한 뒤 나타나는 세포독성에 대해 농도 의존적으로 유의하게 세포 보호효과를 보였으며, ROS 생성과 과산화물에 대한 지표로서 측정한 MDA도 말채나무 열수추출물에 의해 효과적으로 억제되었다(P<0.05). 또한 항산화 성분으로 생체 내에서 산화 및 환원반응에 중요한 역할을 하며 항산화 효소인 GSH-Px, GST에 전자공여체로 작용하는 GSH의 생성촉진 효능에서도 말채나무 열수추출물은 산화 스트레스로 감소된 GSH의 생성을 농도 의존적으로 촉진시켰다(P<0.05). 산화 스트레스에 의해 활성이 증가된 항산화 효소(CAT, SOD, GSH-Px, GR)도 말채나무 열수추출물의 처리로 감소하는 경향을 보였다. 이러한 결과로 미루어 보아 말채나무 열수 추출물은 인체 내에서 질병과 노화를 일으키는 원인 물질인 활성산소에 대해 강한 항산화 활성을 나타냄에 따라 보다 다양한 형태의 소재로 활용될 수 있을 것으로 생각된다.

• 생명과학회지
• /
• 제34권2호
• /
• pp.94-104
• /
• 2024

β-lapachone은 다양한 유형의 질병을 치료하기 위해 남미 및 중미 지역의 전통 의학에서 널리 사용되어 온 Tabebuia vellanedae의 껍질에서 분리된 천연 퀴논 화합물의 일종이다. β-lapachone은 여러 유형의 암세포에서 강력한 항암 활성을 갖는 것으로 보고되었지만, 간세포암종 세포의 증식에 대한 효과는 아직 불분명하다. 따라서 본 연구에서는 β-lapachone 인간 간세포암종 Hep3B 세포의 증식에 미치는 영향을 조사하였으며, 본 연구의 결과에 의하면, β-lapachone 처리에 의한 Hep3B 세포의 세포생존율 감소는 세포사멸 유도와 밀접한 관련이 있었다. 또한, β-lapachone이 처리된 Hep3B 세포에서는 항세포사멸 인자인 Bcl-2의 발현이 감소한 반면, 세포사멸 유도 인자인 Bax의 발현은 증가하였으며, 이는 caspase cascade의 활성 증가와 연관성이 있었다. 그러나 pan-caspase 억제제가 존재하는 경우 β-lapachone에 의해 유발된 세포사멸은 약화되었으며, 이는 β-lapachone에 의한 세포사멸 유도가 caspase 의존적인 현상임을 의미한다. 아울러, β-lapachone의 처리는 ERK 경로를 활성화시키면서 PI3K/Akt 경로의 활성을 억제하였으며, β-lapachone 유도 세포사멸에 ERK 억제제의 효과는 미미했지만, PI3K 억제제는 β-lapachone에 의해 유도된 세포사멸을 유의하게 증가시켰다. 비록 생체 내 동물 모델에서의 확인이 필요하지만, 본 연구의 결과는 간세포암종 세포에서 β-lapa-chone의 항암 활성을 이해하는 데 유용한 자료로 활용될 것이다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제28권2호
• /
• pp.236-245
• /
• 2018

Ingredients of soy and fermented soy products have been widely utilized as food supplements for health-enhancing properties. The aim of this study was to evaluate the effects of fermented soymilk (FSM) and soymilk (SM) on free fatty acid-induced lipogenesis in the hepatocellular steatosis model. HepG2 cells were incubated with palmitic acid (PA) for 24 h to induce lipogenesis and accumulation of intracellular lipid contents. The PA-treated cells were co-incubated with FSM, SM, genistein, and estrogen, respectively. Lipid accumulation in the PA-treated HpG2 cells was significantly decreased by co-incubation with FSM. Treatment of HepG2 cells with PA combined with genistein or estrogen significantly increased the expression of SREBP-1. However, FSM co-incubation significantly attenuated SREBP-1 expression in the PA-treated HepG2 cells; in addition, expression of NRF-2 and phosphorylation of ERK were significantly increased in the PA and FSM co-incubated cells. PA-induced ROS production was significantly reduced by FSM and SM. Our results suggested that the bioactive components of FSM could protect hepatocytes against the lipid accumulation and ROS production induced by free fatty acids. These effects may be mediated by the inhibition of SREBP-1 and the activation of NRF-2 via the ERK pathway in HepG2 cells.