Feline panleukopenia virus (FPV) causes leukopenia and severe hemorrhagic diarrhea, killing 50% of naturally infected cats. Although intact FPV can serve as an antigen in the hemagglutination inhibition (HI) test, an accidental laboratory-mediated infection is concern. A non-infectious diagnostic reagent is required for the HI test. Here, we expressed the viral protein 2 (VP2) gene of the FPV strain currently prevalent in South Korea in a baculovirus expression system; VP2 protein was identified by an indirect immunofluorescence assay, electron microscopy (EM), Western blotting (WB), and a hemagglutination assay (HA). EM showed that the recombinant VP2 protein self-assembled to form virus-like particles. WB revealed that the recombinant VP2 was 65 kDa in size. The HA activity of the recombinant VP2 protein was very high at 1:215. A total of 143 cat serum samples were tested using FPV (HI-FPV test) and the recombinant VP2 protein (HI-VP2 test) as HI antigens. The sensitivity, specificity, and accuracy of the HI-VP2 test were 99.3%, 88.9%, and 99.3%, respectively, compared to the HI-FPV test. The HI-VP2 and HI-FPV results correlated significantly (r = 0.978). Thus, recombinant VP2 can substitute for intact FPV as the serological diagnostic reagent of the HI test for FPV.
Park, Mi-Ja;Joh, Seong-Joon;Choi, Kang-Seuk;Kim, Aeran;Seo, Min-Goo;Song, Jae-Young;Yun, Seon-Jong
Korean Journal of Veterinary Research
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v.56
no.3
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pp.189-192
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2016
The virus neutralization (VN) test was used to determine potency of the infectious bronchitis (IB) vaccine. The results of VN, hemagglutination inhibition (HI), and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) were compared with those of the IBV M41. The $r^2$ values between VN and HI titers and the ELISA antibody titer were 0.8782 and 0.0336, respectively, indicating a high correlation between VN and HI, but not VN and ELISA. The Cohen's kappa coefficient between the VN titer of 2 $log_{10}$ and HI titer of 5 $log_2$ was 0.909. Our results showed that VN could be replaced with HI for testing the potency of IBV M41.
This study was conducted to investigate the similarity between hemagglutination inhibition (HI) test and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA), the HI titer and mean ratio S/P ratio) of avian influenza virus. To perform this study, the 1,457 sera of layers 21 farms in May, July and September, respectively. As a result of HI test, positive rates were 480 to 422 (92.1%) in May, 494 to 394(79.8%) in July and 483 to 402(83.2%) in September, and the mean antibody titer were 4.6, 4.3, 4.0 to 0.3 decreased, respectively. The positive rates by ELISA, 480 to 475(99.0%) in May, 494 to 485(98.2%) in July, 483 to 472(97.7%) in September, and the mean S/P ratio were 2.319, 2.557 and 2.380, respectively. The result of HI test and ELISA positive 480 to 422(92.1%), 475(99.0%), 494 to 394(79.8%), 485(98.2%) and 483 to 402(83.2%), 472(97.7%). Therefore, ELISA was shown more sensitive compare the HI titers.
Canine respiratory coronavirus (CRCoV) is a significant pathogen that causes respiratory diseases in dogs, collectively known as a canine infectious respiratory disease. The virus is highly contagious and exhibits high seroprevalence worldwide. Currently, bovine coronavirus (BCoV) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits are used to detect CRCoV antibodies. However, BCoV-ELISA kits cannot differentiate between infections caused by BCoV and those caused by CRCoV. In this study, we evaluated the hemagglutination inhibition (HI) test for CRCoV by comparing it with the virus neutralization (VN) test. Subsequently, we evaluated the seroprevalence of CRCoV in 383 dog serum samples collected from South Korea utilizing the HI test. The HI test for CRCoV showed a strong correlation with the VN test (R = 0.83, p < 0.001). The analysis of seroprevalence revealed that 52.2% (95% confidence interval [CI], 47.2%-57.1%) of the Korean dog serum samples were positive. The seroprevalence exhibited varied with age, with a positivity rate of 43.9% in dogs under 1 year of age and 66.7% in dogs aged 3 to 5 years (odds ratio, 2.54; 95% CI, 1.43-4.59). In conclusion, the HI test to monitor CRCoV antibody proved to be closely related to the VN test. Furthermore, over half of the dogs in Korea tested positive for CRCoV antibodies. These findings contribute to a better understanding of the sero-epidemiology of CRCoV.
This study was conducted to investigate the similarity between hemagglutination inhibition (HI) test and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) titers and sample to positive ratio (S/P ratio) of Newcastle disease(ND) virus. To perform this study, the 372 sera of broiler chicks and 120 sera of layers and breed chicks were collected from slaughter house and farms, respectively. As a result of HI test out of different chicks, the positive percentage of ND antibody titer of broiler, layer and breeder, when a standard positive HI titer were '2', was 84.4%, 100% and 100%, respectively. The positive percentage of ND antibody titer by ELISA was shown 38.4%, 100% and 100% and S/P ratio were also shown 81.5%, 98.2% and 99.2%, respectively. The results of comparative survey with same sera by two experimental methods were as follows; In low HI titer, ELISA titer was not similar to HI titer, but S/P ratio was similar to it. In high HI titer, ELISA titer was not similar to HI titer. Therefore, HI titer was more similar to S/P ratio than ELISA titer.
Journal of the korean veterinary medical association
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v.25
no.5
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pp.282-291
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1989
Incidence of infectious bronchitis virus(IBV) infection in vaccinated breeder chickens was investigated by hemagglutination inhibition(HI)test for IBV using Mass 41 antigen. In the breeder chickens with the reduced egg production. chalky deposit. wrinkled
We evaluated the patterns of serology and fecal viral shedding for any differences by hemagglutination inhibition (HI) and real-time PCR on Korean CPV-2 isolates (CPV-2a-I, CPV-2a-V and CPV-2b). We successfully detected fecal viral shedding from samples extracted 2-3 d.p.i., regardless of the onset of clinical signs. In addition, the pattern of viral shedding differed depending on the CPV-2 isolates used for inoculation. We also observed differences in the serological pattern that was also depended on the CPV-2 isolates inoculated. The onset and amount of fecal viral shedding were not correlated with the level of antibody titers in this study. Our study is a valuable resource for understanding the different pathobiology of the CPV-2 isolates and the correlation between the patterns of serum antibody titer and fecal viral shedding.
Kim, Seung Youn;Kim, Yun Kyung;Eun, Byung Wook;Kim, Nam Hee;Kang, Eun Kyeong;Lee, Byong Sop;Lim, Jung Sub;Lee, Jun Ah;Kim, Dong Ho
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.55
no.12
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pp.474-480
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2012
Purpose: For evaluating the immunogenicity of an influenza vaccine, the microneutralization (MN) test has a higher sensitivity and specificity as compared to the hemagglutination inhibition (HI) test. However, the MN test is more time consuming and is difficult to standardize. We performed the MN test to determine its usefulness as an alternative or complementary test to the HI test for evaluating the immunogenicity of influenza vaccines. Methods: We compared the MN test with the HI test using 50 paired samples taken from a previous clinical study (2008-2009) in Korean children under 18 years of age. Results: The linear correlation coefficients of the 2 tests for H3N2, H1N1, and influenza B were 0.69, 0.70, and 0.66, respectively. We identified a high index of coincidence between the 2 tests. For an influenza vaccine, the postvaccination seroprotection rates and seroconversion rates determined by the MN test were 78.0% and 96.0%, 90% and 42.0%, and 42.0% and 48.0% for H3N2, H1N1, and influenza B, respectively. Geometric mean titer fold increases of H3N2, H1N1, and influenza B were 2.89, 5.04, and 4.29, respectively, and were 2.5-fold higher. We obtained good results in the evaluation of the immunogenicity of the 2008-2009 seasonal influenza vaccines. Conclusion: We found that the MN test was as effective as the HI test. Therefore, we suggest that the MN test can be used as an alternative or complementary test to the HI test for evaluating the immunogenicity of influenza vaccines.
The present study was undertaken to observe the immune status of breeding hens and laying hens against Newcastle disease (ND). The methods of extraction of hemagglutination inhibition (HI) antibody from egg yolk, the detection of HI antibody in egg albumen and the correlation between HI antibody titers in maternal sera and egg yolks were discussed. For the purposes of these experiments, 9 flocks of breeding hens and 16 flocks of laying hens immunized against Newcastle disease virus were investigated. The vaccination program of tested flocks was 3-3-3 or 4-4-4 in general. The results obtained are summerized as follows: Freezing-thawing was the best method far antibody extraction from egg yolk for HI test. The HI antibody against NDV was found in egg albumen (geometric mean, 4.5), but lower than that found in egg yolk (32.1). The geometric mean of HI antibody titers of egg yolks (84.1) was higher than that of maternal sera (68.4) and day-old chicken sera (25.3). There was correlation between HI antibody titers of maternal sera(Y) and those of egg yolks(X). The coefficient correlation was r=0.63, and the line of regression of Y on X was $\hat{Y}$=35.91+0.35X.
An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using purified hemagglutinin of swine influenza virus (H1N1) as antigen was developed for detection of antibody to avian influenza virus (AIV). The sensitivity and specificity of a developed and commercial available ELISA kits were compared with those of agar gel precipitation (AGP) test and hemagglutination inhibition (HI) test using sera collected from chickens under condition of field exposure. The concentration of antigen, serum dilution and concentration of enzyme-conjugated secondary antibody in developed ELISA (S-ELISA) were 0.5ug/100ul, 1:200 and 0.03ug/100ul, respectively. The correlation coefficients between S-ELISA and commercial ELISA and HI titers were 0.419 and 0.533, respectively. A significant correlation (p < 0.01) was not found between HI and ELISA titers. The S-ELISA was found to be as more sensitive and specific than the AGP test, showing 86.8% sensitivity and 85.3% specificity. It is suggested that the ELISA using the SIV as antigen may be useful method as an investigating tool for AIV serological surveillance.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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