• 분석과학
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• 제18권4호
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• pp.271-277
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• 2005

혈액 내 urea는 임상진단 시 신장 기능을 판단하는 중요한 표지물질로서 측정되고 있다. 단백질 등 질소화합물의 최종 대사물인 urea는 콩팥의 사구체에서 걸러져 소변으로 배출되는데, 사구체의 거르는 능력이 저하되면 결국 혈액 속의 urea 농도가 증가하게 되어 신장 기능의 정상여부를 판단할 수 있게 된다. 이러한 임상진단 결과의 신뢰성 향상을 위해서는 측정결과가 일차분석법으로 인증된 인증표준 물질과 소급성 고리를 유지해야 한다. 본 연구에서는 혈청 내 urea의 일차분석법으로서 $15^N_2$-urea를 내부 표준물질로 사용하는 동위원소희석 액체크로마토그라피-질량분석법 (ID-HPLC/MS)을 개발하였다. 이 방법은 측정원리상 고도의 정확성이 확보될 뿐 아니라 별도의 유도체화가 필요 없기 때문에 빠르고 편리하다. $C_{18}$-분리관에 0.1 mmol/L $NH_4Cl$ buffer를 이동상으로 사용하여 urea를 분리하였는데, 이 완충용액은 비교적 분자량이 작은 urea를 질량분석하는데 방해가 크지 않은 장점이 있다. HPLC와 질량분석기의 인터페이스로서 positive mode의 electrospray ionization (ESI)를 사용하여 높은 감도와 재현성을 성취하였다. 국제적으로 인정된 인증표준물질의 분석을 통해 최적화된 방법의 유효성을 확인하였으며, 국제비교시험에도 참여하여 좋은 결과를 얻었다. ISO guide에 따라 불확도를 계산하였으며, 확장 불확도는 95% 신뢰도에서 약 1.8%로 나타났다. 이 분석법은 표준연에서 개발 중인 혈청인증표준물질을 인증하는 일차기준측정절차로도 사용되고 있다.

• 한국식품과학회지
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• 제43권6호
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• pp.675-682
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• 2011

본 연구는 국내/수입 유통되는 식품과 건강기능식품의 발기부전치료제 및 그 유사물질 혼입 농도를 모니터링하고, 그 결과를 바탕으로 식품의 안전성을 확보하고자 하였다. 전국에서 유통중인 식품 및 건강기능식품 총 226건을 구입하고 24종의 발기부전치료제 및 그 유사물질을 HPLC/PDA 및 LC-ESI-MS-MS를 이용하여 분석하였다. 고체 및 액체 시료의 전처리는 메탄올을 이용하여 추출하였다. 식품 및 건강기능식품 시료에서 확립된 시험법을 이용하여 식품과 건강기능식품 226건을 수거하여 모니터링한 결과, 5건의 성기능 표방 제품에서 acethylvardenafil, sildenafil, tadalafil이 검출되었다. 분석 결과, 검출량은 acethylvardenafil이 1종에서 21,476 mg/kg(15 mg/capsule)이었으며, sildenafil이 2종에서 각각 52,778 mg/kg(29 mg/capsule), 71,535 mg/kg (48 mg/capsule)이었고, tadalafil이 4종에서 9,772 mg/kg(6 mg/capsule) -55,545 mg/kg (33 mg/capsule)이었다. 따라서 식품 및 건강기능식품 중의 발기부전치료제 및 그 유사물질에 대한 지속적인 실태조사가 요구된다.

• Natural Product Sciences
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• 제16권1호
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• pp.26-31
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• 2010

High performance liquid chromatographic method with diode-array detection (HPLC-DAD) has been performed for the simultaneous determination of four marker constituents, paeoniflorin, trans-cinnamic acid, schisandrin and glycyrrhizin in traditional herbal medicinal preparation, So-Cheong-Ryong-Tang (SCRT). The presence of paeoniflorin, trans-cinnamic acid, schisandrin and glycyrrhizin in this decoction was ascertained by retention time, spiking with each authentic standard, UV spectrum and ESI mass spectrum. All four compounds showed good linearity ($r^2$ > 0.998) in a relatively wide concentration ranges. The RSD for intra-day and inter-day precision was less than 3% and the limits of detection (LOD) were less than 30 ng. The mean recovery of each compound was 94.1-113.0% with RSD values less than 3.0%. These results suggest that the developed HPLC method is simple, effective and could be readily utilized as a quality control method for commercial SCRT products.

• 대한화학회지
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• 제54권5호
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• pp.523-532
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• 2010

제안된 방법은 국제표준(IS)인 Entacapone-d10(EAD10)을 사용하여 체외에서 Entacapon(EA)의 정량화를 위한 간단하고, 감도가 좋고, 명확한 액체 크로마토그래피-직렬 질량 분석법(LC-ESI-MS/MS)이다. 크로마토그래피 분리는 Zorbax SB-C18에서 수행되었고, $2.1{\times}50\;mm$, $5\;{\mu}m$ 컬럼과 10 mM Ammonium formate (pH 3.0)로 구성된 이동상에서 수행되었다: 0.7 mL/min 유속의 아세토나이트릴(60:40 v/v)은 액체-액체 추출을 따른다. EA와 EAD10은 다중 반응 탐색법(MRM)에서 수소부가물을 가지고 상대적으로 포지티브 모드인 m/z $306.1{\rightarrow}233.1$과 $316.3{\rightarrow}233.0$에서 수소부과물을 가지고 측정되었다. 그 방법은 상관계수($r^2$) 0.993 이상을 갖는 1.00 - 2000.00 ng/mL의 선형 농도 범위 이상으로 입증되었다. 하루 중과 하루 이내에 3.60에서 7.30과 4.20에서 5.50% 이내의 정밀성과 97.30에서 104.20과 98.30에서 105.80% 이내의 정확도는 EA를 위해 입증되었다. 이러한 방법은 건강한 인도인 자원자들의 생물학적 동등성 연구에서 성공적으로 적용되었다.

• Natural Product Sciences
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• 제24권3호
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• pp.206-212
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• 2018

Xanthii Fructus has been traditionally used for the treatment of rhinitis, rheumatoid arthritis, and eczema. In this study, a high-performance liquid chromatography-photodiode array (HPLC-PDA) method was developed and then used for the simultaneous analysis of eight phenylpropanoids in Xanthii Fructus. The analytical column used for this separation was a $SunFire^{TM}$ $C_{18}$ column, maintained at $40^{\circ}C$. The mobile phase used was 1.0% acetic acid in distilled water and 1.0% acetic acid in acetonitrile with gradient elution. For identify of each component, the mass spectrometer (MS) was used a Waters triple quadrupole mass spectrometer requipped with electrospray ionization (ESI) source. The HPLC-PDA method showed good linearity: correlation coefficients were ${\geq}0.9996$. The limits of detection and quantification of the eight compounds were 0.02 - 0.04 and $0.06-0.14{\mu}g/mL$, respectively. The extraction recoveries ranged from 97.51 to 108.67%. The relative standard deviation values of intra- and inter-day precision were 0.06 - 1.55 and 0.09 - 1.68%, respectively. The validated HPLC-PDA method was applied to simultaneously analyse the amounts of eight phenlypropanoids in Xanthii Fructus.

• 분석과학
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• 제20권2호
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• pp.115-123
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• 2007

헤테로싸이클릭 아민류(heterocyclic amines, HAs)는 소고기, 돼지고기, 닭고기 그리고 생선과 같은 근육질의 육류를 조리 할 때 생겨나는 돌연변이원성/발암성 화학물질로 잘 알려져 있다. 식품으로부터 HAs의 분석에 있어 가장 큰 어려움은 HAs가 식품 중에 극히 미량(수 ng/g)으로 존재한다는 것과 많은 방해물질이 존재한다는 것이다. 식품으로부터 HAs를 추출하고 정제하기 위해 고체-상 추출(solid-phase extraction, SPE)이 많이 사용되고 있다. HAs 분석을 위해 여러 단계의 SPE 과정을 수행하였다. HAs의 회수율은 표준물질이 녹여져 있는 메탄올 수용액과 조리되지 않은 돼지고기에 표준용액을 스파이크하여 서로를 비교하여 얻었다. 회수율은 25.0 ng/g에서 25.3~93.0%의 값을 얻을 수 있었다. 확립된 감도 좋고 재현성있는 시료전처리방법을 통해서 ${\mu}$-LC/ESI-MS에 주입함으로써 조리된 육류로부터 HAs를 분석하는데 응용될 수 있을 것이다. 다른 방법으로는 freezing filtration 방법으로써 보다 좋은 추출 효율과 재현성을 나타내었다.

• Mass Spectrometry Letters
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• 제6권4호
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• pp.105-111
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• 2015

Sixteen compounds of Neobalanocarpus heimii were successfully identified directly from their plant extract using a triple quadrupole LC-MS/MS system. In order to fulfil the objectives of this work, a series of stilbene oligomers of various degrees of condensation were isolated and their structure are characterized. Out of these, four are resveratrol dimers, three trimers, and nine tetramers. The isolation process was done on a fully automated semi-preparative HPLC system. Their structures were elucidated on the basis of 1D- and 2D-NMR as well as MS data. The mass fragmentation patterns of the compounds were recorded and a retrievable in-house library was built to keep the data. In order to demonstrate the potential of this approach, the polyphenolic crude extract was analysed with the LC-MS/MS system and the MS/MS spectra extracted for each chromatographic peak of interest. The fragmentation patterns were compared with those of anticipated pure compounds that were previously recorded. All compounds were successfully identified. It is therefore believed that the LC-MS/MS potential for dereplication of structurally similar compounds in a crude mixture was thus firmly established.

• Natural Product Sciences
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• 제23권4호
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• pp.247-252
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• 2017

The methylglyoxal (MGO) trapping constituents from onion (Allium cepa L.) peels were investigated using pre-column incubation of MGO and crude extract followed by HPLC analysis. The peak areas of MGO trapping compounds decreased, and their chemical structures were identified by HPLC-ESI/MS. Among major constituents in outer scale of onion, 2-(3,4-dihydroxybenzoyl)-2,4,6-trihydroxy-3(2H)-benzofuranone (2) was more effective MGO scavenger than quercetin (6) and its 4'-glucoside, spiraeoside (3). After 1 h incubation, compound 2 trapped over 90% MGO at a concentration of 0.5 mM under physiological conditions, but compounds 3 and 6 scavenged 45%, 16% MGO, respectively. HPLC-ESI/MS showed that compound 2 trapped two molecules of MGO to form a di-MGO adduct and compounds 3 and 6 captured one molecule of MGO to form mono-MGO adducts, and the positions 6 and 8 of the A ring of flavonoids were major active sites for trapping MGO.

• 생명과학회지
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• 제29권1호
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• pp.90-96
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• 2019

본 연구에서는 천연물 유래 구강 건강소재로써 인도감나무 줄기 추출물의 이용 가능성을 평가하기 위해 TLC, TLC-bioautography, HPLC, ESI-MS 등을 이용하여 인도감나무 줄기 추출물로부터 S. mutans KCTC3065에 대해 항균활성이 있는 항균물질을 분리하고 주사전자현미경과 real-time PCR을 이용하여 추출물이 S. mutans의 생물막에 미치는 영향을 조사하였다. S. mutans에 대한 인도감나무 줄기 추출물의 항균활성은 극성이 낮은 n-hexane 분획물에서 확인되었고 TLC, TLC-bioautography, HPLC에 의해 분리된 항균물질의 분자량은 ESI-MS분석 결과 188로 추정되었다. 인도감나무 줄기 추출물(1 mg/ml) 처리에 따른 S. mutans의 바이오필름 바이오매스 변화는 주사전자현미경으로 관찰하였으며 추출물을 처리하지 않은 대조구는 추출물 처리구에 비해 세포가 군집을 이루고 모여 있었으며 세포 주변에서 바이오필름이 관찰되었지만 추출물을 처리한 처리구의 세포 주변에서는 바이오필름을 관찰할 수 없었다. Real-time PCR을 이용하여 바이오필름 생성 과정에서 치면 부착에 필수적인 GTFs의 발현 양상을 조사한 결과, 인도감나무 추출물이 0.2-1.0 mg/ml의 농도로 처리된 배양액에서 gtfB 유전자 발현은 추출물의 농도에 따라 큰 변화가 없었지만 gtfC 유전자 발현은 추출물의 농도가 높아질수록 감소하는 경향을 나타내었다. 이상의 결과를 종합하면 인도감나무 줄기 추출물은 바이오필름 형성 단계에서 치아우식증 원인균인 S. mutans의 초기 치면 부착을 저해함으로서 바이오필름 생성을 억제할 수 있는 천연물 유래 구강 건강소재로써 이용 가능성이 높을 것으로 판단된다.

• 한국자원식물학회지
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• 제31권6호
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• pp.652-659
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• 2018

In this study, baicalin, as a marker substance of Scutellariae Radix, was quantitatively analyzed by a high performance liquid chromatography-photodiode array detector (HPLC-DAD). We identified wogonoside, baicalein, and wogonin in the Scutellariae Radix by a high performance liquid chromatography-electrospray ionization-mass spectrometer (HPLC-ESI-MS). The baicalin was separated on a Xterra C18 column ($5{\mu}m$, $4.6{\times}250mm$) using mobile phase consisting of 38% acetonitrile in 0.68% phosphoric acid. The baicalin spectrum in the Scutellariae Radix extracts was coincided by comparing with UV-visible spectrum (200-550 nm) of baicalin standard in the library. The amount of baicalin in Scutellariae Radix was 10.46%, which is higher than KFDA's guideline. The marker substances of Scutellariae Radix showed a strong base peak $[M]^+$ in the positive detection mode following as; baicalin (m/z; $271[MH^+-sugar]^+$, $447[M+H]^+$), wogonoside (m/z; $285[MH^+-sugar]^+$, $461[M+H]^+$), baicalein (m/z; $271\;[M+H]^+$), wogonin (m/z; $285[M+H]^+$). These results are consistent with the fragment pattern and molecular weight of standard components from literature.