A novel ${\beta}$-cyclodextrin derivative (CCD-C) was synthesized with chitosan and carboxymethyl-${\beta}$-cyclodextrin. Its structure was characterized by elemental analysis, infrared spectra analysis, and X-ray diffraction analysis. The adsorption properties for guanosine 5'-monophosphate, cytidine 5'-monophosphate and uridine 5'-monophosphate were studied. Experimental results demonstrated that CCD-C had higher adsorption capability for guanosine 5'-monophosphate, and that the adsorption capacity for guanosine 5'-monophosphate was 74.20mg/g. The adsorption capacity was greatly influenced by pH, time and temperature. The introduction of chitosan enhanced the adsorption ability and adsorption selectivity of ${\beta}$-cyclodextrin for guanosine 5'-monophosphate. This novel derivative of chitosan is expected to have wide applications in the separation, concentration and analysis of nucleotides in biological samples.
Ganoderma lucidum (Fr.) Karsten을 실험재료로 하여 자실체형성 전후의 RNA를 추출 정량하였다. 버섯의 자실체 형성 전후에 걸쳐 총 RNA함량에 차이가 있었으며 자실체 형성 전에 총 RNA함량이 두드러지게 많았다. 버섯의 추출물인 RNA를 알카리가수분해한 것을 P.E.I. cellulose TLC로 전개한 결과 GMP와 XMP가 확인되었으며 미확인물질로서 한개의 spot가 나타났다. 이것은 위치로 보아 CMP가 아닌가 생각된다. 영지의 RNA추출물을 HPLC로 분석한 결과는 XMP와 GMP가 확인되었으며 그 함량은 각각, 자실체 형성 전의 GMP는 7.l9mg%, XMP는 8.43mg%, 형성후의 GMP는 4.02mg%, XMP는 3.67mg%의 함량분포를 나타내었다.
5-GMP의 열 분해 반응을 pH 5.52에서 7.00의 범위에서 조사하였다. 그 반응 속도는 일차 반응으로 나타났으며, 용액의 pH가 $pKa_2$일 때 반응속도가 가장 컸다. 5'-GMP의 분해 반응은 온도 의존성을 나타냈으며, $93^{\circ}C$에서 $108^{\circ}C$ 범위에서 Arrhenius식을 따르고 있었고, 반응 속도 상수는 $pKa_2$ 이상의 중성 용액 근처에서는 온도 및 pH의 함수로서 다음과 같이 표시되었다. $$K=4.19{\times}10^{26}\;Exp[-1.3(pH+E/RT)]$$
1. 검정곰팡이 (Aspergillus niger)를 실험재료로 하여 동조적으로 액침배양한 결과 포자의 발아로 부터 균사의 생장, 생식기관의 성숙 및 무성포자의 형성까지를 재현시킬 수 있었다. 2. 각 분화과정에서의 균체로 부터 고인산화뉴를레오티드를 추출하여 P.E.I. Cellulose TLC법으로 전개시켰다. 3. 포자형성 직전의 균체로 부터 얻은 추출물 중에 구아노신테트라포스페이트 $(GP_4)$가 존재함을 확인하였다. 4. 분화과정에 따른 균체로부터 추출한 유리아미노산의 총량은 포자형성 직전에 급격히 증가함을 알았다. 5. 정낭과 경자가 완성된 균체에 8-아자구아닌과 시클로헥시미드를 처리한 바 포자형성이 억제되었다. 6. 전낭과 경자가 완성된 균체에 이노신산과 구아닌산을 처리한 바 포자형성이 촉진되었다.
In this study, we investigated the effect of egg yolk lipids (EYL) on collagen ($10\;{\mu}g/ml$)-stimulated platelet aggregation in vivo. Dietary EYL significantly inhibited collagen-induced platelet aggregation, in addition, increased the formation of cyclic adenosine monophosphate (cAMP) and cyclic guanosine monophosphate (cGMP), intracellular $Ca^{2+}$-antagonist as aggregation-inhibiting molecules, in collagen-stimulated platelets. These results suggest that EYL inhibits the collagen-induced platelet aggregation by up-regulating the cAMP and cGMP production. On the other hands, prothrombin time (PT) on extrinsic pathway of blood coagulation was potently prolonged by dietary EYL in vivo. These findings suggest that EYL prolongs the internal time between the conversion of fibrinogen to fibrin. Accordingly, our data demonstrate that EYL may be a crucial tool for a negative regulator during platelet activation and blood coagulation on thrombotic diseases.
Platelet activation is essential for hemostatic process on blood vessel damage. However, excessive platelet activation can cause some cardiovascular diseases including atherosclerosis, thrombosis, and myocardial infarction. Scoparone is commonly encountered in the roots of genus Artemisia or Scopolia, and has been studied for its potential pharmacological properties including immunosuppression and vasorelaxation, but antiplatelet effects of scoparone have not been reported yet. We investigated the effect of scoparone on human platelet activation prompted by an analogue of thromboxane A2, U46619. As the results, scoparone dose-dependently increased cyclic adenosine monophosphate (cAMP) levels as well as cyclic guanosine monophosphate (cGMP) levels, both being aggregation-inhibiting molecules. In addition, scoparone strongly phosphorylated inositol 1, 4, 5-triphosphate receptor (IP3R) and vasodilator-stimulated phosphoprotein (VASP), substrates of cAMP dependent kinase and cGMP dependent kinase. Phosphorylation of IP3R by scoparone resulted in inhibition of Ca2+ mobilization in calcium channels in a dense tubular system, and phosphorylation of VASP by scoparone led to an inability of fibrinogen being able to bind to αIIb/β3. Finally, scoparone inhibited thrombin-induced fibrin clotting, thereby reducing thrombus formation. Therefore, we suggest that scoparone has a strong antiplatelet effect and is highly probable to prevent platelet-derived vascular disease.
본 연구에서는 $BH_4$를 대체할 수 있는 유용물질인 세피아프테린의 생산성 증대를 위하여 GTP 생합성 경로의 유전자들을 동시에 발현할 수 있는 재조합 대장균을 제작하였다. 세피아프테린을 생산할 수 있는 재조합 대장균에서 gmk, ndk 및 guaA-guaB 유전자를 동시에 발현함으로써 세포 내 GTP의 농도가 대조구에 비해 약 200% 이상 증가하였고 $126.1{\pm}9.3mg/l$의 세피아프테린이 생산되었는데 이 결과는 대조구보다 세피아프테린의 생산량이 약 43% 증가된 것이다. GTP 생합성에 관여하는 개별 유전자의 단독 발현 또는 두 가지 유전자의 동시 발현은 세포 내 GTP 농도 향상 큰 영향을 미치지 못했지만 네 가지 유전자 모두를 동시에 발현하는 경우는 세포 내 GTP 농도를 유의적으로 증가시킨다는 것이 확인되었다. 결론적으로 세포 내 GTP 생합성에 관여하는 guaA-guaB, gmk 및 ndk 유전자를 동시에 발현함으로써 재조합 대장균에서 세피아프테린의 생산성 증가를 달성하였다.
5'-GMP.2Na를 결정화하기 위한 조건을 검토한 결과 첨가한 용매는 methanol을 사용하였고, 온도는 45$^{\circ}C$, 교반 속도는 160-200rpm으로 하는 것이 좋았다. 이를 Reynold수로 환산한 결과 25,000-32,000이었다. 그리고 결정 seed의 첨가가 결정화에 영향을 줌을 알 수 있었으며 seed 첨가는 methanol 농도가 7.5%에서 10%의 사이가 좋았고 결정의 최대회수의 methanol 농도는 70%이었다.
A series of (diamine)isopropylidenmalonatoplatinum(Ⅱ) complexes and the oxidation products, (diamine)Pt (OOC)2C=C(CH3)2(X)2, (diamine=ethylenediamine(en), 1,2-diaminopropan(dap), N-methylethylenediamine(men); X=OH, OCOCH3, OCOCF3), have been prepared, and their interaction with guanosine-5'-monophosphate (5'-GMP) have been examined by means of 1H NMR spectroscopy. The present platinum(Ⅱ) complexes have shown to interact with 5'-GMP through N7 coordination in two concecutive steps in a similar way as with cisplatin, but no interaction between the present platinum(Ⅳ) complexes and 5'-GMP was observed. However, in the presence of ascorbic acid, the platinum(Ⅳ) complexes have been found to interact with 5'-GMP with the reaction rate depending on their reduction rate.
한국미생물생명공학회 2005년도 2005 Annual Meeting & International Symposium
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pp.233-244
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2005
Guanosine fermentation process can be well predicted and analyzed by the proposed state equations describing the dynamic change of a bioreactor. Pyruvate and alanine were found to be characteristically accumulated along with the decline of the guanosine formation rate during the mid-late phase of the process. The enzymological study of the main pathways in glucose catabolism and the quantitative stoichiometric calculation of metabolic flux distribution revealed that it was entirely attributed to the shift of metabolic flux from hexose monophosphate (HMP) pathway to glycolysis pathway. The process optimization by focusing on the restore of the shift of metabolic flux was conducted and the overcoming the decrease of oxygen uptake rate (OUR) was taken as the relevant factor of the trans-scale operation. As a result, the production of guanosinewas increased from 17 g/L to over 34 g/I.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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