Brassinosteroids (BRs) are plant steroid hormones that play essential roles in growth and development. Mutations in BR-signaling pathways cause defective in growth and development like dwarfism, male sterility, abnormal vascular development and photomorphogenesis. Transition from vegetative to reproductive growth is a critical phase change in the development of a flowering plant. In a screen of activation-tagged Arabidopsis, we identified a mutant named abz126 that displayed longer hypocotyls when grown in the dark on MS media containing brassinazole (Brz), an inhibitor of BRs biosynthesis. We have cloned the mutant locus using adapter ligation PCR walking and identified that a single T-DNA had been integrated into the ninth exon of the GIGANTEA (GI) gene, involved in controling flowering time. This insertion resulted in loss-of-function of the GI gene and caused the following phenotypes: long petioles, tall plant height, many rosette leaves and late flowering. RT-PCR assays on abz126 mutant showed that the T-DNA insertion in GIGANTEA led to the loss of mRNA expression of the GI gene. In the hormone dose response assay, abz126 mutant showed: 1) an insensitivity to paclobutrazole (PAC), 2) an altered response with 6-benzylaminopurine (BAP) and 3) insensitive to Brassinolide (BL). Based on these results, we propose that the late flowering and tall phenotypes displayed by the abz126 mutant are caused by a loss-of-function of the GI gene associated with brassinosteroid hormone signaling.
Associations were analysed between polymorphisms localized in intron 3 of the growth hormone gene (GH-MspI) and milk production traits of 543 China Holstein cows. A PCR-RFLP method was used for identification of genotypes. The following frequencies of genotypes and alleles were found: 0.77, 0.21 and 0.02 for +/+, +/- and -/-, respectively, and 0.87 and 0.13 for $GH^+$ and $GH^-$, respectively. Significant differences between herds were observed in the frequencies of both genotypes and alleles. The results of least squares analysis showed that in all three lactation phases the GH +/+ cows yielded most milk (p<0.01 for lactation I and p<0.05 for lactations II and III), whereas +/- cows showed higher milk fat content than +/+ individuals (p<0.05 for lactation I and II, and p<0.01 for lactation III). The +/+ cows yielded more fat than +/- individuals (p<0.01 only in lactation I). The +/+ cows yielded more milk protein than +/- individuals (p<0.01 for lactation I, II, and III). The +/+ cows produced milk of higher protein content than that of +/- individuals (p<0.05 only in lactation II). Based on these results, we conclude that the +/+ of GH locus should be the favored genotype in China Holstein cow breeds for use in marker-assisted selection programmes.
The first Indian transgenic fish was generated in 1991 using borrowed constructs from foreign sources. To construct transformation vectors for the indigenous fishes, growth hormone genes of rohu (r-CH), Labeo rohita and catfish, Heteropneustes fossilis were isolated, cloned and sequenced; their fidelity was confirmed in prokaryotic and eukaryotic systems. A vector was constructed with grass carp b-actin promoter driving the expression of r-GH. Rohu eggs are large. fragile and swell 2~3 times. when fertilized. Hence they were amenable only for electroporated sperm-mediated gene transfer. Accordingly, the sperm electroporation technique was standardized to ensure 25% hatchling survival and 37% Presumptive transgenics without suffering any deformity. Southern analysis confirmed genomic integration in 15% of the tested individuals (Ti) belonging to family lines 2 and 3: another 25% of the Juveniles (Te) were also proved transgenic but with the transgene persisting extrachromosomally for longer than 1 to 2 years. perhaps due to the presence of replicon in the vector. Transgenics belonging to different family lines grew 6~8 times faster than the respective controls. Difference in growth trends of Ti and Te within a family line was not significant. In the Ti family 3 remarkable growth acceleration was sustained for a period longer than 36 weeks but in those of family 2, it gradually decreased. All transgenic fishes including the rohu converted the food at a significantly higher efficiency. Barring the transgenic mudloach, all the other transgenic fishes consumed food at significantly reduced rate.
To investigate the effects of environmental salinity on the expression of the genes for growth hormone (GH) and prolactin (PRL) in the pituitary, and their receptors (GHR, PRLR) In the kidney, intestine, and gills in teleosts, we acclimated juvenile olive flounders (Paralichthys olivaceus) to different salinities (5, 15, 25, or 32 psu) for 3 days and examined their mRNA levels using the reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). In the fish adapted to low salinity, the PRL mRNA levels in the pituitary were elevated dramatically, whereas the GH mRNA levels did not differ significantly. PRLR mRNA increased significantly in fish exposed to low salinity, whereas GHR mRNA levels did not differ. These results suggest that PRL is an important hormone for flounders that are acclimated to brackish water and it may control ion homeostasis with PRLR in the osmoregulatory organs.
Kang, T. Y.;Chae, Y. J.;Lee, H.;Lee, K. K.;Park, C. S.;Lee, H. J.
Journal of Embryo Transfer
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v.13
no.2
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pp.97-106
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1998
The pronuclear injection of metallothionein-human growth hormone (MT-hGH) gene into rabbit zygotes was performed to establish in vitro developmental system and to detect the presence of the injected gene by nested PCR. Mature female New Zealand White rabbits were superovulated by eGG and hCG treatments. The rabbits were mated and the zygotes were collected from the oviducts 18-22 h after hCG injection by flushing with D-PBS. Two to three picoliters of MT-hGH gene was microinjected into male pronuclei. The foreign gene-injected zygotes were cultured in TCM-199 or RD mediurn containing 10% FCS with a monolayer of rabbit oviductal epithelial cefls in a 5% $CO_2$ incubator. The presence of injected DNA in rabbit embryos or blastomeres at different developmental stages .vas detected by a nested PCR analysis. The results are summarized as follows ; 1.The developmental rate of the MT-hGH gene-injected zygotes to blastocyst was significantly higher in TCM-199 medium (68.1%) than in RD medium (42.9%). 2.The gene injection into pronuclei at 18 or 22 hours post hCG treatment during pronuclear stage did not much affect on the in vitro development of the rabbit embryos. 3.The rate of gene-positive embryos detected by the nested PCR analysis was significantly decreased when they developed to blastocysts. The results indicate that the screening of transgene in rabbit embryos by nested PCR analysis could be a prornisible method for the preselection of transgenic embryos. Furthermore, the preselection of transgenic embryos would greatly reduce hoth the cost and effort of production of transgenic animals.
Biotechnology will play critical role in improving animal productivity. Animal growth rate and muscle deposition potential can be greatly improved by the application of biotechnology and biotechnological products. Administration of recombinant somatotropin (ST) or other compounds such as IGF-1 and growth hormone-releasing peptides (GHRPs) can enhance growth rate and carcass lean percentage. Gene transfer offers a powerful approach to manipulate endocrine system and metabolic pathways toward faster growth and better feed efficiency. Biotechnology is also extensively used for improving metabolism and activity of gut microorganisms for better nutrient digestibility. Knockout of growth-inhibiting genes such as myostatin results in considerable acceleration of body weight and muscle growth. Animal growth can also be improved by the use of gene therapy. Immunomodulation is another approach for efficient growth through controlling the activity of endogenous anabolic hormones. All the above aspects will be discussed in this review.
Jang, Tae Young;Koo, Bon Chul;Kwon, Mo Sun;Roh, Ji Yeol;Kim, Teoan;Park, Young Sik
Reproductive and Developmental Biology
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v.37
no.3
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pp.91-96
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2013
Transgenic chickens have been spotlighted as an highly potent bioreactor for their fecundity, short generation time, and eggs associated with mass production of protein. In this study, we generated transgenic chickens exhibiting oviduct specific expression of human growth hormone fused to human transferrin for oral administration. Gene of the modified growth hormone located at downstream ovalbumin promoter (~3.6 kb) was introduced to stage X blastodermal cell employing retrovirus vector system. Several transgenic chickens were successfully generated. However, genomic analyses showed unexpected deletion within the transgene. The modification of the transgene seemed to occur during germ cell formation because the deletion was detected only from the sperm DNA of the G0 founder animal. There was no evidence of deletion in the somatic cell DNA samples of the same chicken. Consequently, same pattern of the deletion was confirmed in both somatic and germ cells of the G1 progeny.
The effects of high carbohydrate diet on growth, serum physiological response, and hepatic heat shock protein 70 expression in Wuchang bream were determined at $25^{\circ}C$ and $30^{\circ}C$. At each temperature, the fish fed the control diet (31% CHO) had significantly higher weight gain, specific growth rate, protein efficiency ratio and hepatic glucose-6-phosphatase activities, lower feed conversion ratio and hepatosomatic index (HSI), whole crude lipid, serum glucose, hepatic glucokinase (GK) activity than those fed the high-carbohydrate diet (47% CHO) (p<0.05). The fish reared at $25^{\circ}C$ had significantly higher whole body crude protein and ash, serum cholesterol and triglyceride, hepatic G-6-Pase activity, lower glycogen content and relative levels of hepatic growth hormone (GH) gene expression than those reared at $30^{\circ}C$ (p<0.05). Significant interaction between temperature and diet was found for HSI, condition factor, hepatic GK activity and the relative levels of hepatic GH gene expression (p<0.05).
Yoon, Ji Young;Kwon, Mo Sun;Kang, Jee Hyun;Ahn, Kwang Sung;Kim, So Seob;Kim, Nam-Hyung;Kim, Jin-Hoi;Kim, Teoan;Shim, Hosup
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.22
no.2
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pp.168-173
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2009
Human follicle-stimulating hormone (hFSH) is a pituitary glycoprotein that regulates follicular development and ovulation. Clinically, hFSH has been used to induce follicular growth in infertile women. The hormone is composed of heterodimers, including a common ${\alpha}$ subunit among the gonadotropin family and a hormone-specific ${\beta}$ subunit. Since assembly of the heterodimer is a rate-limiting step in the production of functional hFSH, transgenic clone cows carrying a single-chain hFSH transgene may efficiently produce functional hormone. Genes encoding the ${\alpha}$ and ${\beta}$ subunits of hFSH were linked using the C-terminal peptide sequence from the ${\beta}$ subunit of human chorionic gonadotropin. Bovine fetal fibroblasts were transfected with the gene construct, including the goat ${\beta}$-casein promoter and a single-chain hFSH coding sequence. Transfected fibroblasts were transferred into enucleated oocytes, and individual nuclear transfer (NT) embryos developed to the blastocyst stage were analyzed for the transgene by polymerase chain reaction. Seventy eight blastocysts (30.8%) were developed from 259 reconstructed embryos. Among these blastocysts, the hFSH gene was detected in 70.8% (34/48) of the embryos. Subsequent transfer of hFSH-transgenic clone embryos to 31 recipients results in 11 (35.5%) early pregnancies. However, all fetuses were lost before reaching day 180 of gestation. The results from this study demonstrated that bovine NT embryos carrying single-chain hFSH could be produced, and further extensive studies in which NT embryos are transferred to more recipients may give rise to single chain hFSH-transgenic cows for biomedical applications.
Objective: Peroxiredoxins (Prxs) play an important role in regulating cellular differentiation and proliferation in several types of mammalian cells. This report examined the expression of Prx isotype I in the rat ovary after hormone treatment. Methods: Immature rats were injected with 10 IU of pregnant mare's serum gonadotropin (PMSG) to induce the growth of multiple preovulatory follicles and 10 IU of human chorionic gonadotropin (hCG) to induce ovulation. Immature rats were also treated with diethylstilbestrol (DES), an estrogen analogue, to induce the growth of multiple immature follicles. Northern blot analysis was performed to detect gene expression. Cell-type specific localization of Prx I mRNA were detected by in situ hybridization analysis. Results: During follicle development, ovarian Prx I gene expression was detected in 3-day-old rats and had increased in 21-day-old rats. The levels of Prx I mRNA slightly declined one to two days following treatment with DES. A gradual increase in Prx I gene expression was observed in ovaries obtained from PMSG-treated immature rats. Furthermore, hCG treatment of PMSG-primed rats resulted in a gradual stimulation of Prx I mRNA levels by 24 hours (2.1-fold increase) following treatment, which remained high until 72 hours following treatment. In situ hybridization analysis revealed the expression of the Prx I gene in the granulosa cells of PMSG-primed ovaries and in the corpora lutea of ovaries stimulated with hCG for 72 hours. Conclusion: These results demonstrate the gonadotropin and granulosa cell-specific stimulation of Prx I gene expression, suggesting its role as a local regulator of follicle development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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