Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2018.04a
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pp.35-35
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2018
터리풀속(Filipendula)은 장미과(Rosaceae), 장미아과(Rosoideae)에 속하는 다년생 초본이며, 북반구 온대지역의 산지지역에 서식하며 15-20여 종이 보고되어 있고, 이 중 10여종이 한국, 중국, 일본, 타이완 등의 동아시아 지역에 분포한다. 본 연구의 목적은 DNA 염기서열 자료를 이용하여 터리풀속(Filipendula)내 종들간의 계통관계를 규명하기 위하여 본 연구를 수행하였다. 이를 위해서 11종 29개체의 터리풀속(Filipendula)샘플과 외군인 산딸기나무속(Rubus)에 속하는 3종 5개체의 샘플을 이용하였다. 추가로 Genbank에서 3속 10종 18개의 염기서열을 다운받아 비교분석에 이용하였다. 계통연구를 위하여 엽록체에 존재하는 atpF-atpH, psbK-psbI, psbA-trnH, matK, rbcL, 5개 마커와 핵에 존재하는 ITS, 총 6개 마커의 염기서열을 생산하였다. 총 52개의 샘플에 대하여 엽록체유전체 5개 마커지역은 염기서열 길이가 3,485bp였고 핵 ITS지역은 631bp였으며, 이들을 합한 염기서열 길이는 4,116bp였다. 계통분석결과, 터리풀속(Filipendula)은 단계통군을 이루었다. F. occidentalis와 F. vulgaris가 기저분류군을 이루었고 이들은 각각의 아속에 해당한다. 그리고 나머지 종들은 모두 하나의 단계통군을 이루었다. 위의 결과들은 1961년 시미즈가 본 속을 Hypogyna아속, Filipendula아속, Ulmaria아속으로 나눈 분류시스템과 일치한다. 나아가 분자계통수에서 Ulmaria아속은 크게 4개의 subclade로 구분되었다. 먼저 subclade I에는 F. vestita, F. kiraishiensis, F. tsuguwoi, F. multijiuga, F. purpurea 등 5개 종으로 구성되었다. Subclade II는 F. ulmaria 한 종으로만 구성되었다. Subclade III에는 F. glaberrima, F. koreana, F. formosa, F.camtschatica 로 구성되었으며 subclade III에는 한국에 서식하는 3종이 포함되었다. Subclade IV에는 F. rubra, F. angustiloba, F. palmata, F. intermedia 4종으로 구성되었다. 이번연구에서는 Ulmaria아속내에 4개의 subclade가 존재함이 처음으로 확인되었다.
In computer-based virtual lab, a bioscience researcher who wants to obtain bio information first uses a biodiversity-related database to retrieve information on species, ecology and distribution of an organism. The researcher also needs to access gene/protein databases such as GenBank or PDB to find information on the organism's genetic sequence and protein structure. Furthermore, the researcher should search for academic papers containing the information on the organism so that his research is based on comprehensive and accurate information. This series of activities often undermines research efficiency as it takes a lot of time and causes inconvenience on the part of researchers. To solve such inconvenience, we analyzed various methods for integrated search and chosen schema integration. In addition, we analyzed each databases and extracted metadata for designing schema integration. This paper introduces a biological information retrieval system(BIRS) using schema integration and it's interface that will increase research efficiency for bioscience.
Park, Soo-Chul;Jung, Uk-Jin;Jeong, Mi-Jeong;Kim, Bum-Gi;Yoo, Young-Bok;Ryu, Jin-Chang
The Korean Journal of Mycology
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v.26
no.3
s.86
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pp.314-320
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1998
A 0.4 kb cDNA fragment was isolated from mRNA of UV or mechanical wound damaged Pleurotus sajor-caju by the differential display method. Expression of the gene corresponding to this cDNA fragment was highly induced by mechanical wound damage or UV treatment. This gene showed only basal level expression in mycelia, stipe, and cap under normal growth conditions. Sequencing analysis showed that this cDNA fragment contains partial open reading frame. Homology search using genbank database revealed that although this gene do not have homology with already reported wound induced genes, it has a significant sequence homology in defined region with the cdc2-related protein kinase gene which is known to be involved in negative regulation of meiotic maturation in Xenopus oocytes.
Kim, Minkyeoung;Lee, Wookyu;Kim, Jaelim;Lee, Kiho;Choi, Yoorae;Kim, Jonghwan;Kang, Ilhyun;Kang, Juhye
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2019.10a
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pp.98-98
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2019
제니(薺苨, Adenophorae Remotiflori Radix)는 "대한민국약전외한약(생약)규격집(KHP)"에 모시대(Adenophora remotiflorus Miquel)의 뿌리로 수재되어있으나, 형태학적으로 유사한 잔대(A. triphylla), 당잔대(A. stricta) 및 더덕(Codonopsis lanceolata)과 오 혼용 우려가 있어 이들을 구별하기 위한 정확하고 객관적인 종 감별법이 필요하다. 본 연구에서는 '제니'의 기원인 모시대와 오 혼용 우려가 있는 종들을 구별 할 수 있는 유전자 마커를 개발하기 위하여 Genbank에 등록된 ycf2 구간을 활요하여 모시대와 잔대, 당잔대를 구분 할 수 있는 INDEL (insertion/deletion) 마커를 개발하였다. 또한, 보다 정확한 종감별을 위해 DNA 바코드로 활용되고 있는 유전자 부위의 염기서열을 분석하여 ITS (25%), atpB-rbcL (15%), atpF-atpH (14%), rpl16 (13%), trnL-F (10%), matK (9%), rpoC1 (7%)에서 변이율(percent of variable sites)을 확인하였다. 향후, 본 연구에서 개발된 INDEL 마커와 더불어 추가적으로 개발을 진행 중인 분자 마커는 한약재 '제니'의 품질관리에 활용 가능할 것으로 사료된다.
Mitochondrial genome is an important molecule for systematic and evolutionary studies in metazoans. The development of next-generation sequencing (NGS) technique has rapidly increased the number of mitogenome sequences. The process of generating mitochondrial genome based on NGS includes different steps, from DNA preparation, sequencing, assembly, and annotation. Despite the effort to improve sequencing, assembly, and annotation methods of mitogenome, the low quality and/or quantity sequence in the final map can still be generated through the work. Therefore, it is necessary to check and curate mitochondrial genome sequence after annotation for proofreading and feedback. In this study, we introduce the pipeline for sequencing and curation for mitogenome based on NGS. For this purpose, two mitogenome sequences of Dermatobranchus otome were sequenced by Illumina Miseq system with different amount of raw read data. Generated reads were targeted for assembly and annotation with commonly used programs. As abnormal repeat regions present in the mitogenomes after annotation, primers covering these regions were designed and conventional PCR followed by Sanger sequencing were performed to curate the mitogenome sequences. The obtained sequences were used to replace the abnormal region. Following the replacement, each mitochondrial genome was compared with the other as well as the sequences of close species available on the Genbank for confirmation. After curation, two mitogenomes of D. otome showed a typically circular molecule with 14,559 bp in size and contained 13 protein-coding genes, 22 tRNA genes, two rRNA genes. The phylogenetic tree revealed a close relationship between D. otome and Tritonia diomea. The finding of this study indicated the importance of caution and curation for the generation of mitogenome from NGS.
J. R. Chun;S. J. Song;J. T. Do;K. S. Chung;Lee, H. T.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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2002.11a
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pp.99-99
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2002
The hormone resistin is associated with typeII diabetes mellitus in rodent model. Resistin impairs glucose tolerance and insulin action. A new class of anti-diabetic drugs were called thiazolidinediones (TZDs) downregulates a resistin which is induced during adipocyte differentiation. But the connection between increased adiposity and resistin remains unknown. The objectives of this study was to clone a mouse resistin cDNA and to generate transgenic mice overexpressing mouse resistin gene. The 555 bp of mouse resistin was amplified from mob cDNAS by polymerase chain reaction (PCR) and cloned into pCR$\^$(R)/ 2.1 TOPO T-vector. Mouse resistin mRNA on the basis of Genbank sequence (acession no. AF323080). Then, the PCR product was cloned into pTargeT$\^$TM/ mammalian expression vector that has pCMV promoter and chimeric intron. Restriction enzyme analysis with BamH I and Not I was carried out to determine an orientation of the insert in the vector. The pCMV-mus/resistin gene was prepared from previous recombinant pTargeT$\^$TM/-mus/resistin by digestion of Bgl II, and has used for microinjection into pronuclei of one cell embryos. The microinjected embryos were transfered to pseudopregnant foster-mother. Mouse resistin expression was detected in transgenic F1 mice by Reverse Transcriptase- Polymerase Chain Reaction (RT-PCR). Resistin gene expression mouse has heavier body weight which was measured higher level of plasma glucose than that of normal mouse. And in diet-induced experiments, the abdominal fat pads were isolated from each 24h starvation and re-feeding after fasting group mice that were assessed by RT-PCR analysis. In fasting group mice, resistin expression was higher than that of re-feeding group mice. This result suggests that the resistin gene overexpressing mice may be became to obesity and be useful as an animal disease model to be diabetes mellitus caused by insulin resistance of resistin.
Purpose: H. pylori infection is thought to contribute to iron-deficiency anemia, especially during puberty. The ferritin protein Pfr of H. pylori is homologous to eukaryotic and prokaryotic ferritins. The purpose of this study was to analyze the H. pylori pfr status in gastric biopsy specimens according to clinical data, including antral gastritis with or without iron-deficiency anemia. Methods: A total of 26 H. pylori-positive patients aged from ten to 18 years were categorized into subgroups based on the presence or absence of iron-deficiency anemia. All of them had antral gastritis. Sixteen patients were proved to have iron-deficiency anemia by hematological study, two of which had a duodenal ulcer. The other ten patients showed normal hematological findings. DNA isolation was performed from each of the gastric biopsy specimens. PCR amplification of the pfr gene coding was done using two sets of primers. The pfr region, 501 bp, was generated by linking the sequences of the two PCR products. The nucleotide and protein sequences were compared between the pfr regions from Korean H. pylori strains and the NCTC 11638, 26695, and J99 strain, which were obtained from the Genbank. Sequence comparisons were also performed for the pfr regions between the iron-deficiency anemia (+) and (-) groups. Results: Analysis of the complete coding region of pfr gene revealed three sites of mutation. The Ser39Ala mutation was found in 100% (26/26), Gly111Asn in 26.9% (7/26), and Gly82Ser in 11.5% (3/26). There were no significant differences in the mutations of the pfr regions between the iron deficiency anemia (+) and (-) groups. Conclusion: The mutation in the pfr gene did not relate with the clinical phenotype, iron deficiency anemia. Further studies are needed on the aspects of host side or other complex factors to elucidate anemia. Further studies are needed on the aspects of host side or other complex factors to elucidate the mechanisms by which the H. pylori infection might lead to iron deficiency anemia.
Plum pox virus (PPV) is a significant viral disease in Prunus spp. worldwide. A nationwide survey was started in Prunus spp. orchards, since PPV was first detected from peach in Korea, 2015. During 2016-2017, samples were collected from 30,333 trees in 1,985 orchards of stone fruits in 8 provinces and 4 cities, Korea and tested by RT-PCR using specific PPV primer set. As a result, 21 trees including peach (9 trees), Japanese apricot (4 trees), plum (1 tree), apricot (7 trees) in 10 orchards were infected and controlled by eradication program. Amplicons of the expected size (547 bp) were obtained from total RNA of seven peach trees in 2016, and directly sequenced. BLAST analysis revealed the highest nucleotide (NT) identity (99%) with a PPV D isolates (LC331298, LT600782) in Genbank. The seven isolates from shared nt sequence identities of 98 to 100% with one another. Phylogenetic analysis showed the isolates in peach clustered closely with the PPV-D isolates from Korea, Japan, USA, and Canada. This is, to our knowledge, the first report of the presence of PPV in Prunus spp. orchards in Korea, 2016-2017, we hope that our results and efforts will contribute to effective measures for eradication of PPV.
Park, So-Yeon;Lee, Young-Sun;Shin, Jong-Sub;Koh, Young-Jin;Jung, Jae-Sung
Journal of Life Science
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v.19
no.5
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pp.684-687
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2009
Xanthomonas arboricola pv. pruni, the causal agent of bacterial shot holes in stone fruits, was known to have a low population diversity. To investigate the genetic characteristics of X. arboricola pv. pruni isolated in Korea, three strains which have identical 16S rDNA sequences - including type strain (LMG852), Japanese isolate (MAFF301420) and Korean isolate (XWD1) - were analysed based on the nucleotide sequences of three DNA regions and RAPD pattern. No sequence diversity among the three strains was found within the ITS, glnA and atpD gene sequences. However, five of 756 nucleotides of the atpD gene determined (accession number FJ429319) were different from those of the French strain available from the Genbank database. RAPD analyses performed with 40 different arbitrary primers revealed that two strains isolated from Korea and Japan showed similarity in their band patterns distinguished by type strain. These results suggest that Korean and Japanese strains are very close and belong to a population with a low genetic diversity, and might have a different origin from strains found in West Europe.
One juvenile raptor which was not able to be identified due to its head damage was discovered on a roadside in Janggok-ri, Jori-eup, Paju on 28th June, 2011. The species was identified by DNA barcoding. After polymerase chain reaction (PCR) of the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I gene (COI), we obtained 695 bp sequences. We analyzed the obtained COI sequence with similar sequences from the BOLD systems and BLAST of the NCBI Genbank, and discovered that its sequence showed 100 % similarity values with the one of the five gray-faced buzzards which were previously researched. In addition, it was confirmed to be a female through sex determination using DNA. Such results are important information as it confirms the breeding of the gray-faced buzzards for the first time in 43 years since its breeding was last recorded in 1968, in Paju. Wildlife rescue center needs to work with adjacent consigned registration and preservation institutions when carcass of wild animals is collected or DNA samples are obtained for more accurate both species and sex identification through a systematic management system in the future. Furthermore, the obtained DNA sample of the gray-faced buzzard and COI gene, DNA barcode, could be used as reference standards for similar researches in the future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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