Background: Recent attention on chemotherapeutic intervention against cancer has been focused on discovering and developing phytochemicals as anticancer agents with improved efficacy, low drug resistance and toxicity, low cost and limited adverse side effects. In this study, we investigated the effects of Curcuma C20-dialdehyde on growth, apoptosis and cell cycle arrest in colon and cervical cancer cell lines. Materials and Methods: Antiproliferative, apoptosis induction, and cell cycle arrest activities of Curcuma C20-dialdehyde were determined by WST cell proliferation assay, flow cytometric Alexa fluor 488-annexin V/propidium iodide (PI) staining and PI staining, respectively. Results: Curcuma C20 dialdehyde suppressed the proliferation of HCT116, HT29 and HeLa cells, with IC50 values of $65.4{\pm}1.74{\mu}g/ml$, $58.4{\pm}5.20{\mu}g/ml$ and $72.0{\pm}0.03{\mu}g/ml$, respectively, with 72 h exposure. Flow cytometric analysis revealed that percentages of early apoptotic cells increased in a dose-dependent manner upon exposure to Curcuma C20-dialdehyde. Furthermore, exposure to lower concentrations of this compound significantly induced cell cycle arrest at G1 phase for both HCT116 and HT29 cells, while higher concentrations increased sub-G1 populations. However, the concentrations used in this study could not induce cell cycle arrest but rather induced apoptotic cell death in HeLa cells. Conclusions: Our findings suggest that the phytochemical Curcuma C20-dialdehyde may be a potential antineoplastic agent for colon and cervical cancer chemotherapy and/or chemoprevention. Further studies are needed to characterize the drug target or mode of action of the Curcuma C20-dialdehyde as an anticancer agent.
본 연구는 강산성차아염소산수(SAHW)와 초음파(UW)를 병용한 조미오징어 반가공품의 미생물 오염도 저감 기술을 개발하고자 수행되었다. SAHW의 유효염소농도는 $69.67{\pm}0.58ppm$, ORP는 $1071.33{\pm}4.16mV$, pH는 $2.79{\pm}0.05$이었다. 오징어 반가공품을 중량대비 20배의 SHS에 120분간 침지하였을 때 일반세균은 1.49 log CFU/g, 황색포도상구균은 1.32 log CFU/g 감소하였으며, 대장균은 검출한계 이하로 감소하였다. 오징어 반가공품 중량대비 10배의 SAHW에 120분간 침지한 경우, 일반세균은 2.69 log CFU/g, 황색포도상구균은 1.74 log CFU/g 감소하였으며, 20배의 SAHW에 120분간 침지한 경우, 일반세균은 3.62 log lCFU/g, 황색포도상구균은 3.22 log CFU/g 감소하였으며, 대장균은 검출되지 않아 SAHW가 같은 유효염소농도의 SHS보다 살균력이 높은 것을 알 수 있었다. SAHW 단독 처리만으로는 만족할 만한 미생물 저감효과를 얻을 수 없었기에 조미오징어 반가공품을 SAEW에 1차 침지 처리한 후, SAHW에 2차 침지 처리한 결과, 오징어 반가공품 중량 대비 20배의 SAEW로 60분 처리한 후, SAHW로 처리하였을 때는 중량대비 10배, 120분 처리, 중량대비 20배, 90분 처리로 일반세균수는 약 4.0 log CFU/g, 황색포도상구균은 규제치(log 2.0 CFU/g 이하) 이하로 감소하였으며 대장균은 검출되지 않았다. 초음파 세정기에 오징어 반가공품과 중량대비 20배의 TW, SHS, SAHW를 각각 넣어 UW 처리한 후 미생물 오염도를 조사한 결과, SAHW로 60분간 처리하였을 때 일반세균은 검출한계(< 1.00 log CFU/g) 이하로 감소하였으며 황색포도상구균은 규제치 이하로 감소하여 가장 좋은 저감효과를 나타내었다. 대장균의 경우, SAHW 10분간 처리로도 검출한계 이하로 감소하여 SAHW와 UW의 병용이 조미오징어 반가공품 미생물 저감화에 가장 효과가 좋은 것을 알 수 있었다.
Seven feeding trials were conducted to determine the effects of feeding rate and frequency in the Korean rockfish Sebastes schlegeli at seven different water temperatures. Two feeding-rate experiments for 5-g Korean rockfish at $17^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$; three feeding rate experiments for 16-g Korean rockfish at $16^{\circ}C$ and $24^{\circ}C$; and finally, two feeding frequency experiments for 93- and 100-g at $15^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$ were conducted. Twenty fish averaging $5.5{\pm}0.2$ g ($mean{\pm}SD$) were randomly distributed into 18 indoor tanks containing 40-L seawater from a semi-recirculation system. Fish were fed a commercial diet for 4 weeks at water temperatures of $17^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$. Two feeding trials were conducted to determine the optimum feeding frequency in growing Korean rockfish reared at temperatures of $15^{\circ}C$ and $19^{\circ}C$. Broken line regression analysis of weight gain (WG) indicated that the optimum feeding rates of 5-g growing Korean rockfish were 4.48% (BW/day; BW, body weight) at $17^{\circ}C$ and 4.83% (BW/day) at $20^{\circ}C$. Broken line regression analysis of WG showed optimum feeding rates of 16-g juvenile Korean rockfish of 3.41% (BW/day) at $16^{\circ}C$, 3.75% (BW/day) at $20^{\circ}C$, and 3.34% (BW/day) at $24^{\circ}C$. The biological performance, results, along with morphological indices and serological characteristics, suggest that a feeding frequency of 1 meal/day was optimal to improve WG in growing Korean rockfish grown from 93 to 133 g at a water temperature of $15^{\circ}C$, and 100 to 132 g at $19^{\circ}C$.
Brevibacterium CH1의 회분배양 결과 최적의 초기 포도당 농도는 $20g/{\ell}$이었고, 균체의 최대 성장속도는 $0.21h^{-1}$이었다. pH 를 조절하여 줌으로써 균체농도와 효소의 비활성이 각각 20, 30 정도 증가하였다. 따라서 pH 조절은 균체농도 및 효소생성에 상당한 영향을 주는 것을 알 수 있었다. M3 배지를 연속적으로 공급하면서 유가식 회분배양 한 결과 88시간 배양 후 균체농도는 $68g/{\ell}$로 고농도 배양이 되었으며, 비활성은 6.1units/mg으로 유지되었다. 효소의 총활성은 배양시간에 따라 증가하여 80시간 배양 후 최대 414.8 units/$m{\ell}$ 이었으며, 회분배양에 비해 4.4배 증가하였다. 이 경우에 Yx/s(cell growth yield)는 0.68g cells/g glucose consumed이었다.
마늘을 발효시켜 만든 흑마늘의 지질 산화 억제 및 사람 Low Density Lipoprotein (LDL)에 대하여 항산화 활성을 실험하였다. 표준품으로서 마늘의 주성분인 alliin과 흑마늘의 에탄올과 물 추출물의 전자공여능을 각각 비교하여 측정한 결과 흑마늘 에탄을 추출물이 효능이 가장 높았다. 사람 LDL을 $Cu^{2+}$유도 LDL로 산화시킬 때 그 항산화능은 각 시료를 $10\;{\mu}g/ml$ 및 $20\;{\mu}g/ml$ 씩 첨가하며 TSARS를 측정한 결과 에탄을 추출물이 항산화 활성이 가장 높았으며 용량 의존형으로 나타났다. 흑마늘의 에탄올과 물추출물을 $10\;{\mu}g/ml$ 및 $20\;{\mu}g/ml$ 첨가한 후 J774 유도 산화에 대한 항산화 효과를 측정한 결과 각 추출물은 항산화 효과가 있었고 용량 의존형의 항산화 활성을 나타내었다. 흑마늘의 각 추출물을 이용한 실험에서 전기영동 이동상은 대조구에 비하여 $10\;{\mu}g/ml$ 및 $20\;{\mu}g/ml$에서 산화를 억제하였고 공액 2중 결합에 의한 실험에서도 항산화 효과가 있었으며 $20\;{\mu}g/ml$의 농도에서 거의 억제되었다.
오가피는 건강보조식품, 식품이나 화장품 등의 첨가제로 좋은 약재로 평가되고 있다. 그러나 오가피의 연구의 대부분은 가온 용매추출이나 열수추출을 통한 유효성분의 추출과 생리활성 연구에 치중되어 있다. 따라서 온도 및 추출용매를 조절하여 추출하고 Diaion HP2O 분획을 통한 유효성분의 함량 및 항산화활성에 대하여 연구하였다. 오가피추출물은 열에 불안정하여 갈변현상을 보이므로 상온추출 및 냉온추출하는 것of 좋으며, 에탄올 함량별로 추출시 주 활성성분인 chlorogenic acid의 함량을 보면 100% 정제수 및 100% 에탄올의 단일 용매 추출보다 에탄올수용액을 사용하여 추출시 chlorogenic acid의 함량이 증가함을 알 수 있었다. 에탄올수용액에서의 chlorogenic acid의 함량은 유사하므로 농축시간을 고려하여 70$\sim$85% 에탄올수용액으로 추출하는 것이 바람직할 것으로 사료된다. 최적화된 조건에서 추출된 오가피추출물은 Diaion HP2O column chromatography를 이용하여 10%, 20%, 40%, 60% 에탄올수용액으로 분획 후, 각 분획층의 주 활성성분 합량과 항산화효과를 확인하였다. 10% 및 20% 에탄올 수용액층은 chlorogenic acid가 주 구성성분이었으며, 40% 에탄올 수용액층은 caffeic acid 및 eleutheroside E가 주 구성성분임을 알 수 있었다. Chlorogenic acid와 caffeic acid 함량이 높은 20% 및 40% 에탄올수용액 분획층에서 우수한 DPPH와 superoxide radical에 대한 소거효과를 나타내었다. DPPH radical 소거효과에서 20% 및 40% 에탄올수용액 분획층은 각각 $IC_{50}$ 값이 $1.748{\pm}0.098{\mu}g/ml$, $11.487{\pm}1.768{\mu}g/ml$을 나타내었으며, Superoxide radical 소거효과에서는 $131.491{\pm}2.235{\mu}g/ml$, $200.681{\pm}2.444{\mu}g/ml$로 양성 대조군으로 사용한 ascorbic acid와 동등하거나 dl-$\alpha$-tocopherol보다 우수한 항산화효과를 보였다. 각 분획층의 항산화효과를 미루어 볼 때, 20% 및 40%의 주 구성성분을 조합하여 오가피추출물을 제조하면 더욱 우수한 소재로 개발할 수 있을 것으로 사료된다. 본 기술연구소에서는 최적화된 조건에서 추출된 오가피추출물 및 Diaion HP2O 분획물을 이용하여 B16 melanoma 세포에서의 멜라닌 생성저해 효과를 연구하여 새로운 미백제를 개발 중에 있으며, 건강보조식품, 기능성 향장품소재 등으로의 활용 가치가 높을 것으로 사료된다.
본 연구에서는 녹차 완제품에 원적외선을 처리한 후 물 추출물을 제조하여 항산화능 및 catechin류의 변화를 조사하였다. 녹차 물 추출물의 flavanol 함량은 무처리구(145 mg/g)에 비하여 원적외선을 10분간 처리한 경우 160 mg/g로 증가하였으나, 20분간 처리하였을 경우에는 90 mg/g으로 감소하였다. 또한, DPPH 라디칼 소거능의 경우 원적외선을 10분간 처리한 녹차 추출물의 경우 62.57%로서 무처리구의 61.58%에 비해 약간의 증가를 나타내었지만, 원적외선을 20분간 처리한 경우에는 59.98%로서 감소하였다. 한편, 녹차 추출물의 epicatechin류(EGC, EGCG, EC, ECG)의 함량은 원적 외선의 처리 시간이 증가할수록 감소하였으며, catechin류(GC, C, GCG, CG) 함량은 원적외선을 10분간 처리하였을 때 가장 높게 관찰되었다.
본 연구는 생식으로만 이용하고 있는 어수리 잎을 이용한 기능성 제품을 개발하는데 기초자료를 제공하기 위하여 물과 에탄올을 사용하여($80^{\circ}C$ 50% 에탄올/ $20^{\circ}C$ 50% 에탄올/ $80^{\circ}C$ water/ $20^{\circ}C$ water) 어수리를 추출하여 항산화 활성을 살펴보았다. 항산화성 물질 중 총 폴리페놀 함량은 $80^{\circ}C$에서 50% 에탄올 추출물이 64.73 mg GAE/g으로 가장 높은 함량을 나타내었다. 항산화활성을 측정한 결과 $80^{\circ}C$에서 50% 에탄올로 추출하였을 때 DPPH radical 소거능은 50 ppm에서 69.14%, reducing power는 1000 ppm에서 흡광도 0.93을 나타내었고, ABTS+ radical 소거능은 1000 ppm에서 85.62%의 성을 보여 본 연구에서 사용한 추출방법 중 가장 높은 항산화활성을 보였다. 항산화 활성이 높게 나타난 50% 에탄올 추출물의 일반성분 측정결과 수분함량은 6.38%, 조단백질 함량은 4.35%, 조지방 함량은 0.67%, 그리고 조회분 함량은 1.96%였다. 또한 무기질 분석결과 Na 53.41 mg/100 g, K 396.26 mg/100 g, Mg 5.80 mg/ 100 g, P 47.17 mg/100 g, Zn 0.40 mg/100 g, Fe 5.27 mg/100 g, 그리고 Ca 3.56 mg/100 g으로 나타났다. 기능성 소재 개발의 일환으로 어수리 에탄올 추출물의 항산화관련 성분을 분석한 결과 총 페놀함량과 플라보노이드 함량은 각각 64.73 mg GAE/g과 49.54 mg RE/g로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 어수리를 이용한 기능성식품 제조 시 $80^{\circ}C$에서 50% 에탄올을 이용하여 추출하는 것이 항산화 효과를 높일 수 있는 방법이라고 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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