The purpose of the present study was to elucidate the possible involvement of the medial vestibular nucleus (MVN) and inferior vestibular nucleus (IVN) following acute hypotension in the vestibuloautonomic reflex through vestibulosolitary or vestibuloventrolateral projections. Acute hypotension-induced cFos expression was assessed in combination with retrograde cholera toxin B subunit (CTb) tract tracing. After injection of CTb into the solitary region, CTb-labeled neurons were located prominently around the lateral borders of the caudal MVN and medial border of the IVN. The superior vestibular nucleus also had a scattered distribution of CTb-labeled neurons. After injection of CTb toxin into the unilateral VLM, the distributions of CTb-labeled neurons in the MVN and IVN were similar to that observed after injection into the solitary region, although there were fewer CTb-labeled neurons. In the caudal MVN, about 38% and 13% of CTb-labeled neurons were double-labeled for cFos after injection of CTb into the solitary region and the VLM, respectively. In the IVN, 14% and 7% of CTb-labeled neurons were double-labeled for cFos after injection of CTb into the solitary region and the VLM, respectively. Therefore, the present study suggests that acute arterial hypotension may result in activation of vestibulosolitary pathways that mediate behavioral and visceral reflexes, and vestibuloventrolateral medullary pathways that indirectly mediate vestibulosympathetic responses.
Objectives : Gyejigamchoyonggolmoryeo-tang (GT, Guizhigancaolonggumulitang in Chinese) is a herbal medicine to be prescribed for insomnia caused by anxiety induced by Heart-Heat and elevated Liver-Yang. In the present study, the onset time (sleep latency) and the duration time of sleep were measured to find out the sleep inducing effects of GT. The expression of c-fos immunohistochemistry was also measured at the ventrolateral preoptic area (VLPO) and tuberomammillary nucleus (TMN) site in brain. Methods : The onset time (sleep latency) and the duration time of sleep were measured 30 minutes after thiopental sodium injection. Thereafter, brain tissue was obtained and c-fos immunohistochemistry was performed on the VLPO and TMN sites. Results : GT statistically significantly reduced the sleep latency required to enter sleep, and significantly increased sleep duration time. GT significantly increased the number of c-fos immunohistochemical staining-positive cells in the sleep-inducing center (VLPO), whereas GT significantly decreased the number of c-fos immunohistochemical staining-positive cells in the arousal center (TMN). Conclusions : It could be concluded that the GT shortened the sleep latency and increased the duration time for sleep induced by thiopental sodium. And it was confirmed that the mechanism was to stimulate the sleep-inducing center (VLPO) and suppress the arousal center (TMN) in the brain. The results of this study are considered to be useful as scientific evidence that can be used clinically for the treatment of insomnia caused by anxiety.
저주파소음(low frequency noise; LFN)은 인체의 다양한 기관과 정신적 상태에 영향을 미치며, 진동음향질환(vibroacoustic disease; VAD)같은 질병들을 야기 시킨다 이전의 연구에서는 인간 또는 설치류에서 VAD는 우울증 또는 불안장애와 같은 만성적인 정신 건강에 위험을 미친다고 보고되고 있다. 본 연구에서는 LFN이 스트레스의 신경생리적 반응에 미치는 영향을 규명하고자 하였다. 이를 위하여, LFN에 노출된 흰쥐에서 스트레스 반응에 중요한 역할을 하는 paraventricular nucleus of the hypothalamus(PVN)에서 초기발현유전자인 c-fos 양성세포 발현, locus coeruleus(LC)에서 NE 생성 효소인 tyrosine hydroxylase(TH) 양성세포 발현과 스트레스 호르몬의 농도를 측정하였다. LFN 집단은 각각 32.5Hz 와 125Hz를 하루에 4시간씩 이틀 동안 소음에 노출 하였으며, 정상집단은 소음에 노출되지 않도록 하였다. 저주파소음에 노출 후 집단 간 혈액내 코르티코스테론 분석과, 면역 조직염색법을 이용하여 스트레스에 반응하는 PVN에서 c-fos발현과, LC에서 TH를 분석한 결과, PVN에서는 c-fos 의 발현과 LC에서 TH의 발현이 증가됨을 관찰할 수 있었으며, 그리고 혈중 코르티코스테론의 농도 또한 LFN 집단에서 높게 발현됨을 확인 하였다. 그리고 32.5Hz보다 125Hz의 소음에서 면역염색반응과 코르티코스테론의 결과가 다소 높게 나타남을 알 수 있었다. 이러한 결과는 저주파소음에 의해 스트레스와 연관된 뇌의 부위에서 c-Fos와 TH의 발현이 증가됨을 증명하고 있다. 따라서 저주파소음은 일반적인 스트레스에 의한 반응과 비슷한 신경적 특징들을 보여주고 있다. 그리고 저주파소음에 의한 중추, 말초신경계의 활성화는 아마도 진동음향질환과 같은 행동장애 질병과 관련이 있을 것임을 시사한다.
Background: Variants of human papillomavirus (HPV) show more oncogenicity than do prototypes. The HPV16 Asian variant (HPV16As) plays a major role in cervical cancer of Asian populations. Some amino acid changes in the E6 protein of HPV16 variants affect E6 functions such as p53 interaction and host immune surveillance. This study aimed to investigate activities of HPV16As E6 protein on modulation of expression of miRNA-21 as well as interferon regulatory factors (IRFs) 1, 3, 7 and c-fos. Materials and Methods: Vectors expressing E6 protein of HPV16As (E6D25E) or HPV16 prototype (E6Pro) were constructed and transfected into C33A cells. HCK1T cells expressing E6D25E or E6Pro were established by transducing retrovirus-containing E6D25E or 16E6Pro. The E6AP-binding activity of E6 and proliferation of the transfected C33A cells were determined. MiR-21 and mRNA of interesting genes were detected in the transfected C33A cells and/or the HCK1T cells, with or without treatment by culture medium from HeLa cells (HeLa-CM). Results: E6D25E showed binding activity with E6AP similar to that of E6Pro. Interestingly, E6D25E showed a higher activity of miR-21 induction than did E6Pro in C33A cells expressing E6 protein. This result was similar to the HCK1T cells expressing E6 protein, with HeLa-CM treatment. The miR-21 up-regulation significantly corresponded to its target expression. Different levels of expression of IRFs were also observed in the HCK1T cells expressing E6 protein. Interestingly, when treated with HeLa-CM, IRFs 1, 3 and 7 as well as c-fos were significantly suppressed in the HCK1T cells expressing E6D25E, whereas those in the HCK1T cells expressing E6Pro were induced. A similar situation was seen for IFN-${\alpha}$ and IFN-${\beta}$. Conclusions: E6D25E of the HPV16As variant differed from the E6 prototype in its activities on epigenetic modulation and immune surveillance and this might be a key factor for the important role of this variant in cervical cancer progression.
Objectives : Osteoporosis is a systemic skeletal disorder characterized by reduced bone mineral density and increased risk of fractures. Bisphosphonates and selective estrogen receptors, which are bone resorption inhibitors that are currently widely used as osteoporosis treatments, show serious side effects when administered for a long time. Research on bone resorption inhibitors that complement the problems of existing treatments is needed. The purpose of this study was to investigate the effect of inhibiting osteoclast differentiation and activity on the tuberous root of Ampelopsis japonica (Thunb.) Makino (AM). Methods : After extracting AM using distilled water and ethanol, the inhibitory effects of the two solvents on osteoclast differentiation were compared using the RANKL-induced in vitro experimental model and the TRAP assay kit. The impact of AM on bone resorption was investigated through the pit formation assay, and its effect on F-actin formation was assessed through fluorescent staining. Additionally, protein and mRNA expression levels of osteoclast differentiation markers (NFATc1, c-Fos, TRAP and ATP6v0d2) and resorption markers (MMP-9, CTK, and CA2) were analyzed via western blot and RT-PCR. Results : AM treatment significantly decreased the number of TRAP-positive cells and pit formation area. Furthermore, AM suppressed both the protein and mRNA expression of NFATc1 and c-Fos, key transcription factors involved in osteoclast differentiation and it downregulated the expression of osteoclast-associated genes such as TRAP, CTK, MMP-9, CA2, and ATP6v0d2. Conclusions : These results suggest that AM can inhibit bone resorption and osteoclast differentiation, indicating its potential for use in the treatment and prevention of osteoporosis.
To investigate the effect of ursolic acid on the expression of oncogenes in tumor cells of mice, sarcoma 180 ascites tumor cells were implanted into the left groin of ICR mice and the tumor bearing mice were treated with ursolic acid. The expression of oncogenes were measured by in situ hybridization method. Ursolic acid significantly reduced the expression of oncogenes in the tumor cells. Therefore, it can be said that the prestated anticarcinogenic effect of ursolic acid could be partly ascribed to the mechanism included in the oncogene´s transcription level.
Objectives: This study was performed to evaluate the effect of Samkieumgamibang (SKG) on osteoporosis. Methods: The osteoclastogenesis and gene expression were determined in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. And, osteoblastogenesis was also determined in rat calvarial cell. Results: SKG decreased the number of TRAP positive cell in osteoclast. It also decreased the expression of Cathepsin K, MMP-9, TRAP, c-fos, NAFTc1 and JNK1 in osteoclast. SKG increased the expression of iNOS in RANKL-stimulated in osteoclast. Otherwise, SKG inhibited TRAP activity in osteoclast. SKG increased cell proliferation, ALP activity, bone martix protein, collagen and nodule in osteoblast. Conclusions: It is concluded that SKG might decrease the bone resorption resulted from decrease of osteoclast differentiation and it's related gene expression. And, SKG might increase the bone formation resulted from increase of osteoblast function.
C-fos는 원종양유전자(proto-oncogene)인 v-fos의 세포 동족체로써, 성장인자나 신경전달 물질에 의해 수분 내에 다양한 형태의 세포에서 활성화된다. Fos단백질은 스트레스와 통증 과정의 신호전달기전에서 세포활동을 조절하는 3차전령으로 활동한다. 열충격 단백질(Heat shock protein : 이하 HSP)은 계통발생학적으로 초기 척추 동물에서부터 발현되며 생체방어체계의 중요한 인자로 세포가 고열, 외상, 허혈 등의 스트레스에 직면했을 때 발현이 증가하는 단백질로 알려져 있다. 본 연구에서는 캡사이신(capsaicin)으로 말초 신경병변을 유발시킨 후 통각신경활성의 지표로 이용되는 원종양 유전자인 c-fos의 발현과 열 또는 스트레스로 야기되는 손상에 대한 조직의 방어작용으로 발현되는 HSP 70의 발현을 동시에 관찰함으로서, 급성으로 유발된 말초 신경병변의 확인과 동시에 실험동물 체내에서 방어적인 역할을 밝히는 일환으로 이 실험을 실시하였다. 본 실험의 결과는 다음과 같다; 1. 척수 등쪽뿔 천층(Laminae I and II)에서 각각 c-fos와 HSP70을 항원으로 하는 면역조직화학적 방법으로 염색한 표본에서 0.9% NaCI 투여 2시간 후 c-fos와 HSP70의 양성을 나타내는 세포는 전혀 없음을 알 수 있었다. 2. 척수 등쪽뿔 천층에서 c-fos 단백질을 항원으로 하는 면역조직화학적 방법으로 염색한 표본에서 Capsaicin 투여 2시간 후 c-fos 단백질에 양성을 나타내는 세포가 많이 발현됨을 육안적 관찰로서 알 수 있었다. 3. 척수 등쪽뿔 천층에서 HSP70을 항원으로 하는 면역조직화확적 방법으로 염색한 표본에서 Capsaicin 투여 2시간 후 HSP7O의 양성을 나타내는 세포가 보통수준으로 발현됨을 육안적 관찰로서 알 수 있었다. 이 실험의 결과로 볼 때, 화학적인 신경병변 유발물질에 의한 손상을 방어하기 위해서 체내에는 내인성 물질이 형성될 것이라는 추측과 c-fos 가 다른 유전자의 발현을 유도한다는 점을 함께 고려 하였을때, Capsaicin에 의한 말초 신경병변에서 c-fos 발현이 많이 나타나는 것은 손상을 방어하는 물질의 생성에 관여하기 때문이며, 방어물질 중 이 실험에서 본 HSP70도 증가한 내인성 방어물질의 하나라고 할 수 있을 것이다.
Substantial evidence suggests that repeated injections of nicotine produce increase in locomotor activity and expression of the immediate-early gene, c-fos in the dopaminergic target areas. Herbal medicine as a therapeutic intervention has been widely used for the treatment of mental dysfunction. Many studies have shown that Cortex Phellodendris (CP) can affect the biochemical balance in the central nervous system. In order to investigate whether CP have an influence on their nicotine-induced behavioral sensitization, we examined the effect of CP on nicotine-induced locomotor activity and c-Fos expression in the striatum and nucleus accumbens utilizing the Fos-like immunohistochemistry (FLI). Male SD rats received CP (200㎎/㎏, i.p.) 30 min before repeated daily injections of nicotine (0.4㎎/㎏, s.c.) for 7 days. Rats were followed withdrawal for 3 days and one challenge for 1 day. System challenge with nicotine produced a much larger increase in locomotor activity and accumbal FLI. Pretreatment with CP significanly inhibited nicotine-induced locomotor activity and FLI in the striuatum and nucleus accumbens. These results demonstrated that reduction in locomotor activity by CP may be reflected by reduction of dopamine release and postsynaptic neuronal activity in the striatum and nucleus accumbens. Our results suggest that CP may have therapeutic effect on nicotine addiction. Supported by a fund (99-PJ9-PG1-002-0004).
Objectives : The purpose of this study is to examine if Radix Aconiti herbal acupuncture may be effective to the neuropathic pain(mechanical allodynia, cold allodynia) in a rat model of neuropathic pain. Methods : To produce the model of neuropathic pain, under isoflurane 2.5% anesthesia, L5 spinal nerve was ligated by 6-0 silk thread. After neurophathic surgery, the author examined if the animals exhibited the behavioral sign of allodynia. The allodynia was assessed by stimulating the medial malleolus with von frey filament and acetone. Three days after the neuropathic surgery, Radix Aconiti herbal acupuncture was injected at Hwando($GB_{30}$) one time per two days for 2 weeks. After that, the author examined the withdrawal response of neuropathic rats' legs by von frey filament and acetone stimulation. And also the author examined c-Fos in the midbrain central gray of neuropathic rats and the change of WBC, RBC, HGB, HCT count in the blood of neuropathic rats. Results : The Radix Aconiti herbal acupuncture injected Hwando($GB_{30}$) decreased the withdrawal response of mechanical allodynia that assessed with von frey filament in RA1-$GB_{30}$, RA2-$GB_{30}$ group as compared with control group. The Radix Aconiti herbal acupuncture injected Hwando($GB_{30}$) decreased the withdrawal response of chemical allodynia(cold allodynia) that assessed with acetone in RA1-$GB_{30}$, RA2-$GB_{30}$ group as compared with control group. The Radix Aconiti herbal acupuncture injected Hwando($GB_{30}$) showed the significant between control group and RA2-$GB_{30}$ group in the c-Fos expression. The Radix Aconiti herbal acupuncture injected Hwando($GB_{30}$) did not show the significant between control group and RA1-$GB_{30}$ group, RA2-$GB_{30}$ group and RA3-$GB_{30}$ group in the WBC, RBC, HGB, HCT count. Conclusions : We have noticed that Radix Aconiti herbal acupuncture at Hwando($GB_{30}$) decreased mechanical allodynia and cold allodynia in the model of neuropathic pain compared with the control group. C-fos expression in the central gray of that group was also decreased compared with the control group. This study can be used as a basic resource on a study and a treatment of pain.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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