Kim, Keun-Ki;Kim, Yong-Kyun;Son, Hong-Joo;Choi, Young-Whan;Kang, Kyu-Young
Applied Biological Chemistry
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v.48
no.1
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pp.34-39
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2005
There are various crop diseases in green houses that are caused by the cultural environments, especially high temperature and moisture. To solve the forementioned problems, farmers are overusing agricultural chemicals, causing other damages by the chemical residue. In this study, antagonistic bacteria as biological control agents were isolated to produce the environmentally-friendly crops for use in green houses. Eighteen species of antagonistic bacteria were totally isolated from the soil and plants in the Perilla fields, and AK-17 showed the highest activity among the isolates. According to the results of anti-fungal spectrum against several pathogens by AK-17, the antagonism effect of the isolates was remarkable against grey mold rot by Botrytis cinerea, sclerotinia rot by Sclerotnia sclerotiorum, and stem rot by Rhizoctonia solini. To evaluate the biological control effects of the isolates against the major diseases of Perilla, studies were carried out to evaluate the preventive and the curative effects of the diseases throughout the pot experiments. According to the forementioned experiments, the preventive and the curative effects by the isolates against sclerotinia rot were respectively showed as 55% and 92%. For the grey mold rot, those were 40% and 78%, respectively. As to the evaluation of the growth-promoting effect by AK-17, the length and the biomass of the tested plants were increased to 120% and to 164%, respectively. For the leaf numbers and area were respectively increased to 120% and 220%. Furthermore, AK-17 was identified as Burkhoderia sp. according to the results of physiological properties and genetic methods.
The endo-polygalacturonase gene (endo-pgaA) was cloned from DNA of Aspergillus niger SC323 using the cDNA synthesized by overlapping PCR, and successfully expressed in Saccharomyces cerevisiae EBY100 through fusing the α-factor signal peptide of yeast. The fulllength cDNA consists of 1,113 bp and encodes a protein of 370 amino acids with a calculated molecular mass of 38.8 kDa. After induction by galactose for 48 h, the activity of recombinant endo-PgaA in the culture supernatant can reach up to 1,448.48 U/mg. The recombinant protein was purified to homogeneity by ammonium sulfate precipitation and gel filtration column chromatography and subsequently characterized. The optimal pH and temperature of the purified recombinant enzyme were 5.0 and 50℃, respectively. The Michaelis-Menten constant (Km) and maximal velocity (Vmax) of the enzyme for pectin were 88.54 μmol/ml and 175.44 μmol/mg/min, respectively. The enzyme activity was enhanced by Ca2+, Cu2+, and Na+, and strongly inhibited by Pb2+ and Mn2+. The pectin hydrolysates were mainly galacturonic acid and other oligo-galacturonates. Therefore, these characteristics suggest that the recombinant endo-PgaA may be of potential use in the food and feed industries.
In the present study, we investigated the overexpression and characterization of bovine pancreatic (bp)- DNase I in Saccharomyces cerevisiae and Pichia pastoris. The bp-DNase I gene was fused in frame with the GAL10 promoter, $MF{\alpha}$, and GAL7 terminator sequences, resulting in the plasmid, pGAL-$MF{\alpha}$-DNaseI (6.4 kb). Also, the bp-DNase I gene was fused in frame with the AOX1 promoter, $MF{\alpha}$, and AOX1 terminator sequences, resulting in the plasmid, pPEXI (8.8 kb). The recombinant plasmids, pGAL-$MF{\alpha}$-DNaseI and pPEXI were introduced into S. cerevisiae and P. pastoris host cells, respectively. When the transformed yeast cells were cultured at $30^{\circ}C$ for 48 h in galactose or methanol medium, bp-DNase I was overexpressed and the most of activity was found in the extracellular fraction. P. pastoris transformant activity showed 45.5 unit/mL in the culture medium at 48 h cultivation, whereas S. cerevisiae transformant revealed 37.7 unit/mL in the extracellular fraction at 48 h cultivation. The enzymatic characteristics, such as DNA cleavage and half life were investigated. Treatment of the recombinant DNase I from P. pastoris induced degradation of the calf thymus DNA within 1 minute, and this DNA degradation rate was higher than that of commercial bp-DNase I (SIGMA) and the recombinant DNase I from S. cerevisiae.
Studies were conducted to determine the potential of sodium hypochlorite(SHC) on the control of bacterial yellow blotch in cultivated oyster mushroom, Pleurotus ostreatus. SHC at the concentration of 80 ppm was effective on the control of Pseudomonas agarici causing yellow blotch in oyster mushroom except number 916 isolate. In vitro the mycelial growth was slightly inhibited at the concentration higher than 100 ppm of sodium hypochlorite, but retardation of the mycelial growth was soon recovered. Spray of SHC solution at the concentration of 40-50 ppm per day significantly reduced the incidence of the yellow blotch without impairing the growth of oyster mushroom in field culture. However, the higher concentration of SHC(67 ppm) induced yellow brown or dark gray in color and deformed cap and elongated stripe in morphology of fruiting body. Results indicate that periodical spray of sodium hypochlorite seems to be the recommendable method for protection against bacterial yellow blotch disease in oyster mushroom without reducing food quality.
Kang, Jung-A;Ka, Kang-Hyeon;Kim, Jun Young;Kim, Seong Hwan
The Korean Journal of Mycology
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v.46
no.3
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pp.271-280
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2018
The ectomycorrhizal basidiomycete Tricholoma is one of mushroom groups that cannot be cultivated artificially. To use this mushroom as applicable resource for food production, it is necessary to obtain information about their mycelial growth properties in various environmental conditions. This study investigated the mycelial growth of four domestic isolates of Tricholoma species (T. bakamatsutake, T. fulvocastaneum, T. matsutake, T. terreum) at different physical and chemical conditions. The optimal physical conditions for their mycelia growth were found to be a temperature range of $20{\sim}25^{\circ}C$ and a pH range of 4.0~7.0 in dark condition. The growth of T. matsutake was retarded at high temperature ($30^{\circ}C$). Tests to determine the chemical factors that affected mycelial growth showed that the four Tricholoma spp. grew 1% saline. T. matsutake grew in up to 2% saline. In the presence of various heavy metals (50 ppm) and pesticides (suppliers' recommended concentration), mycelial growth was inhibited the most by cadmium and emamectin benzoate, respectively. However, all the four Tricholoma spp. grew with $Cu^+$. The growth of T. matsutake was not inhibited by abamectin, acetamiprid, and thiacloprid. Extracellular enzyme activities of amylase and ${\beta}$-glucosidase were detected only in T. bakamatsutake and T. fulvocastaneum. The results of the present study allowed us to determine suitable or harmful environmental conditions for the mycelial cultivation of the Tricholoma spp.
The black soldier fly larvae are able to decompose various organic wastes such as livestock manures and food wastes. We tested whether the quality of the insect derived compost, i.e. larval feces, was comparable to that of a commercial fertilizer. Chemical analysis of Hermetia. illucens compost was suitable as a fertilizer. When the kidney bean (Phaseolus vulgaris L.) was raised on the culture soil treated with the H. illucens compost, the growth of leaf area, total dry weight and leaf dry weight increased significantly. The H. illucens compost is thought to act as an increasing factor of RGR (relative growth rate) from the beginning of growth and also had a great effect on the relative growth rate throughout the late stage of growth. There is high statistical significance between NAR (net assimilation rate) and RGR (relative growth rate), but no significance between RGR and LAR (leaf assimilation rate) of the treatments. In addition, the treatment of H. illucens compost promoted the thickness of leaves from the beginning of growth and the tendency of thickening leaves from the beginning of growth and the effect continued throughout the late period of growth. When mixed with 50% of H. illucens compost rather than 25%, it showed the greater effect on the plant growth.
This study was carried out to investigate the antioxidative capacity of Ampelopsis brevipedunculata 95% ethanol extracts. The concentration of A. brevipedunculata extract at which DPPH radical scavenging activity was inhibited by 50% was 0.42 mg/mL as compared to 100% by pyrogallol as a reference. Total antioxidant status was examined by total antioxidant capacity against ABTS radical reactions. Total antioxidant capacities of A. brevipedunculata extract at the concentrations of 0.1 and 1 mg/mL were 0.65 and 3.71 mM Trolox equivalents, respectively. Oxygen radical absorbance capacities of A. brevipedunculata extract at the concentrations of 5 and $100\;{\mu}g/mL$ were 22.75 and $131.25\;{\mu}M$ gallic acid equivalents, respectively. Superoxide scavenging activities of A. brevipedunculata extract at the concentrations of 0.1 and 1 mg/mL were 27.7 and 56.0%, respectively. Total phenolic contents of A. brevipedunculata extract at the concentrations of 0.5 and 2.0 mg/mL were 0.55 and 2.06 mM gallic acid equivalents, respectively. A. brevipedunculata extract at the concentration of 0.1 mg/mL inhibited 0.2 mM and 0.5 mM tert-butyl hydroperoxide induced cyototoxicity by 36.2 and 23.3%, respectively, in HepG2 cell culture system. Thus strong antioxidant and cytotoxicity-inhibiting effects of A. brevipedunculata extract seem to be due to, at least in part, the prevention from free radicals-induced oxidation as well as high levels in total phenolic contents.
For the assessment of soybean sprouts as a protein food, the sprouts were grown at $15^{\circ}C,\;20^{\circ}C,\;25^{\circ}C\;and\;30^{\circ}C$ with watering four times a day. Change of various nitrogen fractions was investigated both in cotyledon and axis at various growing stages. Total nitrogen content was gradually increased in axis but decreased in cotyledon with growth. Nitrogen loss per sprout was increased from 4.1% at $15^{\circ}C$ to 14% at $30^{\circ}C$ during 8 days growth. Water insoluble protein nitrogen tends to increase slightly in cotyledon and greatly in axis. At high temperature it decreased in cotyledon and increased remarkably in axis. Water soluble protein nitrogen decreased greatly in cotyledon but increased in axis. Water soluble non-protein nitrogen considerably increased with growth, especially in axis and in the high temperature.
Although the method of seedling production of Haliotis discus hannai is well known, the optimum benthic diatom species as a live food at early larval stage are not fully developed. In this study three Pennales diatom species, Caloneis schroederi, Rhaphoneis sp., and Cocconeis californica were examined on settlement, metamorphosis, survival, and growth of Haliotis discus hannai larvae. The larvae fed Raphoneis sp. or C. californica showed high settlement rate with 80-82% within 48 hrs, which was significantly higher than those fed C. schroederi or mixed diets with three diatom species. The larvae fed the former microalgal species also showed higher metamorphosis rate with 32-34% than the latter species with 10-12% within 4 days. With regard to survival and growth of the larvae, single diet with Rhaphoneis sp. or C. californica had better dietary value than the mixed diets for the early larvae of H. discus hannai.
The specificity and sensitivity of oligonucleotide primers were examined for the rapid detection of Salmonella in meat samples. The oligonucleotide primers used in this study were designed with the modification of mdh and invA sequence in the chromosome of Salmonella Typhimurium. Through the subsequent analysis of the specificity and sensitivity of the primers, two types of oligonucleotide primers, SLM1 and SLT4 were selected for the detection of Salmonella genus specific and S. Typhimurium species specific, respectively. The lowest detection limit of each primer was represented as 1 cell per reaction when reacted with a prepared DNA solution. The detection efficiency of the two primers was analysed with beef and pork samples intentionally contaminated with a mixture of Salmonella culture, and three preparation methods -, namely direct reaction after extraction, enrichment after extraction, and DNA extraction after enrichment for PCR reaction, - were also compared. No differences were found in the results according to meat sources and preparation methods.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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