• 제목/요약/키워드: Fluoroimmunoassay

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Anti-idiotype 항체를 이용한 17$\beta$-Estradiol 측정을 위한 Time-resolved Fluoroimmunoassay (Time-resolved Fluoroimmunoassay for the Measurement of 17$\beta$-Estradiol using Anti-idiotypic Antibody)

  • 김윤규;김창규;박성민;이치호;이원창;최영숙;김종배
    • 한국가축번식학회지
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    • 제16권4호
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    • pp.325-333
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    • 1993
  • A competitive type immunoassay method for 17$\beta$-estradiol(E2) based on the idiotypic anti-idiotypic antibody and time-resolved fluorescence is described. The anti-idiotypic antibody(Ab2) produced to E2 binding site of the primary idiotype antibody (Ab1) was labelled with europium and was allowed to compete with E2 standards or serum sample for the binding sites of Ab1 which was bound to 2nd antibody captured ontothe surface of microtitre plates. Fluorescence measured by time-resolved fluorometer was inversely proportional to the concentration of E2 over the range 5~500pg/well. The sensitivity of the assay was 5pg per well which was compatible with that ofradioimmunoassay using the same Ab1 and 3H-E2 as a tracer. One great advantage of this method described here was to enable antibodies to be labelled instead of haptens, and thus makes it easier to develop sensitive and robust immunoassay systems specially for haptens.

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FRET에 기반한 Open Sandwich Fluoroimmunoassay (Development of an Open Sandwich Fluoroimmunoassay Based on FRET)

  • ;이문권;성기훈;주재범;이은규
    • KSBB Journal
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    • 제22권6호
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    • pp.426-432
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    • 2007
  • QDs을 기반으로 하는 OsFIA는 매우 빠르고 간단히 수행될 수 있다. 또한 이 분석법은 고체상의 담체나 결합/잔류시약의 분리 등과 같은 여러 과정을 필요로 하지 않으며, 적은 양의 시약으로도 분석이 가능하다. 본 분석법은 높은 감도로 항원을 측정할 수 있으며, 일상적인 분석에도 쉽게 도입될 수 있을 것이다. 선형 범위 내에서 측정 가능한 receptor의 최소농도는 0.05 nM (2.65 ng/mL) 정도이다. 또한, 일반적으로 상용화된 항체를 가치고 수행이 가능하다. 이 OsFIA 분석법은 기존의 실험적 sandwich immunoassay의 효과적인 대안으로 제시된다.

삵에서 TR-FIA를 이용한 분변내 Estradiol과 Progesterone의 검사 (Time-resolved Fluoroimmunoassay (TR-FIA) Analysis of Fecal Progesterone and Estradiol in Leopard Cats (Prionailurus bengalensis))

  • 김영섭;김지용;정소영;이봉주;신남식
    • 한국임상수의학회지
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    • 제27권6호
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    • pp.693-697
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    • 2010
  • 본 연구는 총 4두의 삵에서 발정기와 비발정기, 임신기와 비임신기 동안의 분변에서 steroid metabolic materials를 추출한 후, TR-FIA kit를 이용하여 estradiol과 progesterone의 농도를 측정하였다. 발정기간 (2월) 중 estradiol 농도의 최저는 평균 $4.02{\pm}1.9$ng/g 이었고, 최고는 평균 $86.01{\pm}35.2$ng/g (dry fecal weight) 이었다. 비발정기(11월)의 최저는 평균 $4.42{\pm}1.32$ng/g 이었고, 최고는 평균 $15.62{\pm}6.84$ng/g 이었다. 임신기 (3월) 중 progesterone농도의 최저는 평균 $427{\pm}24.49$ng/g 었고, 최고는 평균 $1490{\pm}265.27$ng/g 이었다. 비임신기 (11월)의 progesterone의 최저는 평균 $71.25{\pm}29.61$ng/g 이었고, 최고는 평균 $291.75{\pm}90.30$ng/g 이었다. 위의 결과에 따라 삵에서 TR-FIA에 의한 분변내 steroid hormone 의 측정은 발정과 임신에 관련된 난소활동을 비 침습적으로 평가하기 위한 적절한 방법으로 판단되었다. 본 연구는 삵과 같이 접근이 어렵고 멸종위기에 처한 야생동물의 사육관리의 효율화와 번식계획의 수립에 도움이 될 것이다.

신기술 이용 식중독균 신속검출법 개발 동향 분석 (Trends in Rapid Detection Methods for Food-borne pathogenic Microorganisms by Using New Technologies)

  • 김현주;김용수;정명섭;오덕환;전향숙;하상도
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제25권4호
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    • pp.376-387
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    • 2010
  • 식품으로부터 식중독세균을 검출하는 대부분의 전통적인 방법들은 분리하고자 하는 미생물에 적합한 선택배지에 의존할 수밖에 없다. 이러한 선택배지들은 높은 경제성에도 불구하고 오래 걸려 때를 놓치게 되는 소요 시간이 항상 걸림돌로 작용하고 있으며, 하나의 선택배지로 한의 균만을 선택적으로 분리해 내는 등의 단점이 있다. 이러한 단점을 최소화하기 위하여 IMS 등 면역학적 또는 분자생물학적 기법들을 접목시키고 있고, 증균에서 분리와 확인을 동시에 할 수 있는 package 형태의 제품들이 시판되고 있다. 또한 이러한 제품 중 일부는 국제표준기구로부터 인증을 받았고 대부분 chromogenic 기질을 함유한 선택배지들이 포함되어 있을 만큼 신뢰도가 높다고 할 수 있다. 그러나 선택배지 자체만은 이들 단점을 해결할 수 없어 항체를 활용한 신속, 간편하고 환경친화적인 ELISA법, 검출장비가 불필요하여 가장 신속, 간편하게 현장에서 사용하도록 기술을 향상시킨 paper-strip kit나 ELISA 분석 시 직면하는 시료의 matrix effect를 최소화할 수 있다는 장점을 지닌 형광면역분석법(fluoroimmunoassay)등 새로운 기술이 용도에 맞게 다양하게 개발되고 있다. 또한 동시진단 능력이 우수한 현장 진단형 시스템이 개발될 경우, 향후 신 시장 창출, 바이오칩 기술발전, 식중독균을 포함한 위해 미생물의 동시진단 및 역학조사 등에 지대한 기여를 할 것으로 판단된다. 식품에서 식품위해미생물 검출에 있어서 가장 이상적인 방법은 검출 과정이 간단하고 경제적이며 정확하여야 한다는 것이다. 또한 정량적 결과 산출이 가능하여야 하고, 자동화된 방법으로 전환이 가능하여야 산업에 적용될 수 있다는 것인데, 이러한 이상적인 검출방법은 현재까지 존재하지 않는다. 다만, 여러 방법들이 각각의 장점을 갖고 있을 뿐이다. 즉, 현실적 대안은 현재까지 개발된 각각의 방법을 목적과 대상에 따라 시의적절하게 병용 사용하여야 한다는 것이다.

Trypsin과 chymotrypsin이 호산구 화학주성 및 활성화에 미치는 효과 (The effect of trypsin and chymotrypsin on the chemotaxis and activation of eosinophil)

  • 이명구;김명빈;김진환;윤택중;최정은;김동환;모은경;박명재;현인규;정기석
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제43권3호
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    • pp.359-366
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    • 1996
  • 연구배경 : 기관지천식 등의 알레르기 질환의 병인에 호산구는 중요한 역할을 하며 화학주성의 연구는 새로운 변조성분에 대한 호산구의 반응을 평가하는데 in vivo 실험에 앞서 유용한 방법론으로 쓰이고 있다. 탈과립화된 비만세포와 활성화된 T 림프구가 기관지 천식의 병태생리에 관계하며 tryptase는 비만세포의 활성화후 분비되는 단백분해효소 중 하나로써 호산구의 화학주성과 활성화에 영향을 미칠 것으로 생각된다. 본 연구의 목적은 단백분해효소의 대표격인 trypsin과 chymotrypsin이 호산구의 화학주성과 활성화에 어떤 역할을 하는지 알고자 함에 있다. 방법 : 호산구의 분리는 혼합된 과립구로부터 호중구를 제거하는 면역자기방법으로 하였고 화학주성은 multi-well micro-Boyden chamber로 정량하였으며 ECP 유리정량은 fluoroimmunoassay를 이용하였다. 결과 : 호산구는 trypsin에 화학주성을 보였고 최대의 반응이 $1000{\mu}g/ml$에서 $56.52{\pm}14.50$/HPF로 양성대조군인 PAF에 필적하였다. 반면 chymotrypsin에 대해서는 화학주성을 보이지 않았다. Trypsin으로 처리한 호산구의 ECP 분비능은 trypsin 10, 100, $1000{\mu}g/ml$ 농도에서 음성대조군에 비하여 각각 2.7, 3.7, 6배 높았다. Soybean trypsin inhibitor로 전처치하였을 때 ECP의 분비능은 감소되었으며 $1000{\mu}g/ml$ 농도에서 음성대조군과 유의차이가 없었다. 결론 : trypsin은 호산구에 화학주성을 일으킬 수 있으며 호산구를 활성화하여 호산구 과립단백의 하나인 ECP를 분비하게 한다고 사료된다. 반면 chymotrypsin은 호산구에 대한 직접적인 작용은 없는 것으로 보인다.

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우울증을 수반한 폐경기 여성환자에서의 항우울제와 경피 에스트라디올 호르몬의 병합치료 효과 : 우울증상 및 신체증상과 혈장 Gonadal Hormone, 5-Hydroxyindoleacetic Acid 농도를 중심으로 (Effects of Addition of Transdermal Estradiol to Antidepressants Treatment in Postmenopausal Women with Depression : On the Depression, Physical Symptoms and Plasma Hormonal Status, 5-Hydroxyindoleacetic Acid Levels)

  • 조숙행;김승현;이민수
    • 생물정신의학
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    • 제2권1호
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    • pp.91-99
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    • 1995
  • A on-off study was designed to evaluate the effects of addition of transdermal esrtradiol to tricyclic antidepressants on depression level, vasomotor symptom(hot flush), sexual functions and hormonal status, plasma 5-hydroxyindoleascetic acid(5-HIAA) level in postmenopausal women with depression. Plasma level of estradiol, progesterone, LH, FSH, prolactin and 5-HIAA was measured by Time-resolved fluoroimmunoassay and HPLC(High Performance Liquid Chromatography). To asses their symptoms, the BDI(Beck Depression Inventory) and modified symptom scale, extracted from women's health questionnaire were used. Depression score, sexual function score were decreased by the last 4-weeks of addition of transdermal estradiol to antidepressant treatment, not Significant, but vasomotor symptom (hot flushes) score was decreased significantly(p<0.05) by the last 4-weeks of the given treatment. Thus, during addition of transdermal estradiol to antidepressants treatment, only vasomotor symptom(hot flushes) was improved significantly, but depression level was not changed in postmenopausal women with depression. Plasma FSH, estradiol and prolactin level was not changed in postmenopausal women with depression. Plasma FSH, estradiol and prolactin levels were increased by the last 4-weeks of the treatment. There were not significant correlations between clinical symptoms and plasma hormonal status and 5-HIAA level in baseline. After the last 4-weeks of transdermal estradiol treatment, the change of depression score was correlated significantly with change of serum prolactin and 5-HIAA level and the change of vasomotor symptom score was correlated significantly with the change of plasma prolactin level.

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분변내 스테로이드 호르몬의 측정을 통한 멸종 위기 침팬지의 번식형태와 임상적용 (The Reproductive Patterns and Clinical Application of Endangered Common Chimpanzees by Monitoring the Steroid Hormone Measurements in Fecal Samples)

  • 정소영;김미영;정유정;장유니;임양묵;윤용달
    • 한국발생생물학회지:발생과생식
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    • 제15권2호
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    • pp.167-172
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    • 2011
  • 멸종 위기에 처한 침팬지에서 연중번식주기와 무월경, 번식주기, 임신진단을 포함한 번식형태를 관찰하기 위하여 형광항체 분석법을 사용하여 에스트라디올, 프로게스테론, 테스토스테론 호르몬 대사산물과 인간융모성 성선자극호르몬을 측정하였다. 본 연구결과, 침팬지의 번식능력은 연령이 번식에 중요한 영향을 주는 인자가 아니며, 개체별 번식능력의 차이, 산과질환의 유무, 배우자와 합사한 조건에서 나타나는 성적행동의 차이 같은 여러 가지 요인이 복합적으로 작용한다는 것을 알 수가 있었다. 본 연구는 침팬지의 종보전과 인간과 연관된 폐경과 산과질환을 연구하는데도 유용하게 활용될 수 있을 것이다.

번식 장애 한우의 혈액요소태질소 및 성 스테로이드 호르몬 농도 변화 (Alteration in Concentrations of Blood Urea Nitrogen and Sex Steroid Hormone in Korean Cattle with Reproductive Disorders)

  • 최창용;손동수;조상래;김현종;최선호;강다원
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제23권1호
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    • pp.59-64
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    • 2008
  • The objective of this study is to investigate the changes in concentrations of blood urea nitrogen (BUN) and sex steroid hormones, such as estrogen, progesterone, and testosterone in Korean cattle (Hanwoo) with reproductive disorders and to examine the relationship between BUN and body condition score (BCS) in Hanwoo. The concentration of BUN was 16.2 mg/dl, 17.8 mg/dl, 15.1 mg/dl, 17.9 mg/dl, and 28.3mg/dl in pregnancy, repeat breeding, follicular cyst, luteal cyst, and ovarian atrophy, respectively. In Hanwoo with BCS $2.0{\sim}2.9$, $3.0{\sim}3.5$ and $3.6{\sim}4.0$, the concentration of BUN was 15.8 mg/dl, 17.0 mg/dl, and 17.6 mg/dl, respectively. Fluoroimmunoassay showed that serum estrogen and progesterone levels were decreased in reproductive disorders Hanwoo, such as ovarian atrophy, endometritis, and weak estrus. The testosterone level was significantly decreased in Hanwoo with reproductive disorders compared to that in pregnant Hanwoo ($0.02{\sim}0.03\;ng/ml$ vs 0.13 ng/ml, p<0.05). The progesterone and estrogen concentrations in follicular fluid obtained from ovary with follicular cyst were significantly higher (p<0.05) than those in normal follicle fluid. These results show that there is no relationship between BUN and BCS in Hanwoo, and the concentration of sex steroid hormone in serum and follicular fluid are changed in reproductive disorders Hanwoo.

산전선별검사를 통한 35세이상 산모 다운증후군 양성률 비교 평가 (Down syndrome in women aged more than 35 Years positive detection rates)

  • 오택민;김가연;이영기
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제22권6호
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    • pp.314-320
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    • 2021
  • 최근 사회적으로 결혼연령이 높아짐에 따라 고령산모가 증가하면서 생화학적 표지물질을 이용한 다운증후군 선별검사는 산모들에게 필수적인 검사가 되었다. 다운증후군 임신을 진단하는 과정은 선별검사에서 고위험군으로 보고 되면 융모막 융모생검이나 양수검사 같은 침습적 검사를 통해 염색체 분석을 하는 단계로 진행이 되는데 이러한 확진검사는 비용이 많이 들고 태아손실의 위험도가 높다. 따라서 위험도는 낮고 다운증후군 발견율이 높은 선별검사를 선택하여 불필요한 침습적 검사를 줄여 산모와 태아의 위험도를 낮추는 것이 중요하다. 본 연구는 2018년 용인의 임상검사기관에 산전선별검사를 의뢰한 17세부터 46세까지 총 36,436명을 대상으로 triple test(185명), quad test(3,629명), integrated test(18,932명), sequential test(13,690명) 4가지 검사를 direct sandwich, indirect sandwich 기술을 이용한 Time-resolved fluoroimmunoassay 방법과 sandwich 방법을 이용한 면역측정 방법을 사용하여 35세 미만과 35세 이상 산모의 다운증후군 위험도를 분석하여 산모 연령이 증가함에 따른 양성률의 차이를 확인하였다. 검사결과 전체 산모의 다운증후군 고위험군은 triple test 36명, quad test 408명, integrated tset 1,441명, sequential test 924명 이었다. 이중 35세미만 산모의 고위험군은 triple test 7명(3.8%), quad test 141명(3.9%), integrated tset 644명(3.4%), sequential test 430명(3.4%)이었고, 35세이상 산모의 고위험군은 29명(15.7%), 267명(7.4%), 797명(4.2%), 494명(3.6%)으로 나타나 35세이상 산모가 훨씬 높은 고위험군을 나타내었다. 임상에 있어서 35세 미만과 35세 이상 산모의 위험도 분석을 한 연구는 국내외에 거의 희박하므로 본 연구는 향후 국내외의 많은 검사기관들과 예비 산모들에게 다운증후군 위험의 예방과 치료를 위한 매우 유용한 기초 자료가 될 것으로 생각된다.

선천성 부신 과형성증(21-hydroxylase 결핍)의 신생아 선별 검사 후 진단 알고리즘 (A Diagnostic Algorithm after Newborn Screening for 21-hydroxylase Deficiency)

  • 조성윤;고정민;이경아
    • 대한유전성대사질환학회지
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    • 제16권2호
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    • pp.70-78
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    • 2016
  • 선천성 부신 과형성증 중 가장 흔한 21-hydroxy-lase deficiency (21-OHD)는 신생아 선별검사에서 17-hydroxyprogesterone (17-OHP)의 증가로 조기 진단이 가능하다. 17-OHP가 애매하게 증가되는 경우에는 ACTH 자극 검사가 필요하며, 이 검사는 nonclassical (NC형) 21-OHD 진단의 gold standard이다. 전형적인 임상 증상이 없는 경우, 예를 들어 남성화가 심하지 않은 여아, 경한 simple virilizing (SV)형 남아나 신생아 선별 검사에서 발견되지 않을 수 있는 NC형 환자의 경우, 분자유전학적 검사가 진단에 도움을 줄 수 있으며, 이는 예후 에측 및 유전 상담에도 도움이 된다. 미숙아와 저체중 출생아의 경우는 17-OHP가 위양성을 보이기 쉬우므로 출생 주수나 출생 체중에 따른 cutoff 값 설정이 필요하다. 높은 위양성률을 극복하기 위해 기존 RIA방법에 비해 최근 LC-MS/MS가 민감도와 특이도를 높이는 검사로 주목 받고 있다. 21-OHD 신생아 선별 검사의 효율성을 높이기 위해서는 SW형 남아를 조기에 발견하고, 여아에서 성별 결정을 조기에 올바르게 하고, NC형 환자를 찾아내고, 미숙아/저체중 출생아/아픈 신생아에서 위양성률을 낮추어서 불필요한 재검 및 경제적/심리적 부담을 최소화 하기 위한 노력이 필요하다. 무엇보다 21-OHD가 임상적으로 확실하게 의심되는 경우에는 확진 검사에 앞서 적절한 치료가 조기에 시작되어야 한다. 저자들은 본 종설에서 21-OHD의 신생아 선별 검사 후 진단 알고리즘에 대해 최신 문헌들에 근거하여 가이드라인을 제시하는 바이다.

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